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  • 螢光素酶如何成為理想的報告基因?

    一,什么是報告基因報告基因:是一種編碼易被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因,其表達產(chǎn)物非常容易被鑒定。傳統(tǒng)基因表達檢測方法的問題:1.通常檢測基因表達是通過RT-qPCR或qPCR(mRNA水平)或WesternBlot(蛋白水平)2.操作方法繁瑣,難于檢測報告基因的優(yōu)點:1.蛋白表達水平檢測2.檢測簡單,易于定量二,什么是理想的報告基因1.具有酶活性(信號放大能力2.蛋白小3.沒有內(nèi)源性表達,背景低4.易于定量5.高靈敏度、線性范圍寬6.反應(yīng)迅速三,螢光素酶在生物醫(yī)藥行業(yè)最主要的報告基因為熒光素酶報告基
  • IL-18丨沉默三十年,老靶點重出江湖

    IL-18概述白介素-18(IL18,也稱為干擾素-γ誘導(dǎo)因子),位于人類第11號染色體和小鼠第9號染色體。IL-18屬于IL-1超家族,最早在庫普弗細胞(駐留在肝臟中的巨噬細胞)中被發(fā)現(xiàn),非造血細胞如腸上皮細胞、角質(zhì)形成細胞和內(nèi)皮細胞中也有IL-18生成。IL-18具有多種生物學(xué)特性,在抗炎,抗腫瘤免疫中具有重要的作用。IL-18受體和信號通路IL-18通過受體介導(dǎo)其作用,該受體屬于IL-1R家族,由IL-18Rα鏈(IL-18R1,IL-1Rrp)和IL-18Rβ鏈(IL-18R輔助蛋白,I
  • 一文讓你了解逐典重組胰蛋白酶的應(yīng)用領(lǐng)域!

    Trypelectase重組胰蛋白酶是逐典生物專門為疫苗、病毒載體生產(chǎn)設(shè)計,具有高效、非動物源和高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特點。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致,由大腸桿菌(E.col)重組表達生產(chǎn)。在GMP級別環(huán)境中生產(chǎn)的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細胞且不造成傷害,產(chǎn)品質(zhì)量滿足藥典要求。一,在醫(yī)藥開發(fā)、生化研究領(lǐng)域中的應(yīng)用在生化研究方面,重組胰蛋白酶可分析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、氨基酸序列;在醫(yī)藥領(lǐng)域,由于重組胰蛋白酶會選擇性水解賴氨酸、精氨酸肽鏈,因此可用于治療各種炎癥、潰瘍、癬疥、水腫、血腫等疾病,并
  • 對于低溫樣品來說,為什么干冰不是一個好的選擇

    為了避免變質(zhì),低溫樣品通常儲存在溫度約為-170°C的液氮或其氣相中。在運輸過程中,一些科學(xué)家將這些樣本放在干冰上。然而,研究表明,將低溫樣品放在干冰上比暴露在室溫下更快地升溫。罪魁禍?zhǔn)祝簩α骱蛡鲗?dǎo)?;谡婧思毎闹委焺┑鹊蜏貥悠沸枰诘陀谒AЩD(zhuǎn)變相閾值(Tg-H2O,約-135°C)的溫度下儲存。在這些條件下儲存可避免生物活性,并最大限度地減少解凍后細胞活力的損失。將真核細胞溶液保存在高于Tg-H2O的溫度下會帶來嚴(yán)重風(fēng)險。當(dāng)封裝的肝細胞球體在-80°C下儲存時,與在-170°C下存儲的相
  • Simoa測定表征和驗證方法——檢測極限和定量下限(Part 1)

    介紹這篇博客文章的目的是為Simoa®用戶提供有效的資源,用于檢測下限(LOD)和定量下限(LLOQ)的常見分析驗證。確定檢測和定量下限的方法在復(fù)雜性上有所不同,這取決于測定開發(fā)階段和適用的法規(guī)。例如,在早期開發(fā)中,通過簡單地插值校準(zhǔn)曲線來近似LOD可能就足夠了,但對于最終驗證,可能需要使用真實樣本進行更深入的實驗和統(tǒng)計方法。指導(dǎo)方針臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)研究所(ClinicalandLaboratoryStandardsInstituteCLSI)專門為診斷免疫測定驗證提供了一些具參考價值的指南。這
  • 揭秘!生物制品中的核酸殘留難題如何破解

    近年來,生物制品在市場中所占比重越來越大,與之俱來的生物安全性問題也隨之而來。我國參照WHO、FDA和歐盟的標(biāo)準(zhǔn),在藥典中明確規(guī)定酵母、大腸桿菌表達的生物制品中的DNA殘留量不超過10ng/劑,CHO和vero細胞表達的EPO、狂犬疫苗、乙肝疫苗等不超過100或10pg/劑。生物制品的核酸殘留去除主要集中在病毒疫苗生產(chǎn)、重組蛋白藥物純化、細胞治療和疫苗研究中緩解PBMC細胞結(jié)團以及慢病毒的大規(guī)模純化等。翌圣生物UCF.METM核酸酶可降解無論是單鏈、雙鏈、線性、圓形還是超螺旋形式的DNA及RNA
  • CAR-T共表達細胞因子的選擇

    外源性細胞因子工程化被認(rèn)為是增強抗腫瘤T細胞免疫的解決方案之一。常見細胞因子對CAR-T細胞的作用包括:細胞因子對CAR-T細胞特性的影響IL-2增強增殖和效應(yīng)能力IL-7延長潛在壽命,提高效應(yīng)功能的持久性IL-9維持T細胞干性,增強效應(yīng)功能IL-15延長細胞壽命IL-8增強T細胞向腫瘤遷移的能力IL-10通過代謝重編程恢復(fù)耗竭T細胞功能IL-12直接上調(diào)細胞毒性,調(diào)節(jié)免疫抑制TMEIL-18增強效應(yīng)功能,重塑TMEIL-23提高效應(yīng)功能,減少耗竭表型IL-33調(diào)節(jié)TMEIL-36γ增強細胞毒性
  • 文獻解讀|Revvity LabChip微流控毛細管電泳檢測mRNA純度及完整性的應(yīng)用

    背景信息近年來,基于核酸的技術(shù)包括mRNA和質(zhì)粒DNA被廣泛地用于遺傳疾病的治療、癌癥預(yù)防,以及疫苗等研究中。與傳統(tǒng)的滅活或減毒活疫苗相比,mRNA疫苗的生產(chǎn)速度相對更快、成本效益更高,而更快的疫苗開發(fā)需要一種高效和快速的檢測方法來監(jiān)測mRNA的純度和完整性。默沙東公司利用LabChip微流控毛細管電泳來檢測mRNA純度及完整性。LabChipGXII系統(tǒng)是Revvity公司(原PerkinElmer)的,該自動化系統(tǒng)使用“芯片上的實驗室”技術(shù)進行電泳。在LabChip上,將含有藍色熒光染料的凝
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