全自動核酸檢測一體機適用于分子生物學、醫(yī)學、食品工業(yè)、司法科學、生物技術、環(huán)境科學、微生物學、臨床診斷、流行病學、遺傳學、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領域以聚合酶鏈式反應為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。
把一次性pcr擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,其適合退火溫度不同,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的適合退火溫度,進行有效的擴增。
全自動核酸檢測一體機在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)。熒光檢測系統(tǒng)主要包括激發(fā)光源和檢測器。激發(fā)光源有鹵鎢燈光源、氬離子激光器、發(fā)光二極管LED光源,前者可配多色濾光鏡實現(xiàn)不同激發(fā)波長,而單色發(fā)光二極管LED價格低、能耗少、壽命長,不過因為是單色,需要不同的LED才能更好地實現(xiàn)不同激發(fā)波長。
PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這基因擴增儀叫做實時熒光定量PCR儀。
對于熒光定量基因擴增儀,當有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來自樣品池時,或當有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無污物阻擋光路。
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