諾博萊德 平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他

平末端DNA加A試劑盒

  目錄號(hào)：42016

試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性：

儲(chǔ)存：-20 ℃ 保存。

產(chǎn)品介紹：

由Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA片段，如該平末端DNA片段需要和T載體相連接，需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分，可以在20分鐘左右完成整個(gè)過(guò)程。

操作步驟：

1.    平末端PCR產(chǎn)物用PCR清潔（無(wú)非特異擴(kuò)增）或者膠回收純化（有非特異擴(kuò)增）。

2.    純化好的平末端DNA片段按以下反應(yīng)體系加A尾:

3.   輕輕混勻后72℃保溫20-30 分鐘。

4.    加A尾的產(chǎn)物可以不需要再次清潔或者膠回收純化，取1-2ml直接用于連接反應(yīng)。

平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他