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帕米膦酸二鈉注射液（Pamidronate Disodium Injection）為帕米膦酸二鈉 加適量甘露醇制成的滅菌水溶液。帕米膦酸二鈉是一種雙膦酸類骨吸收抑制 劑，臨床上廣泛應(yīng)用于治療骨質(zhì)疏松癥、腫瘤并發(fā)的高鈣血癥和變形性骨炎 [1] 。目前液相色譜法測定帕米膦酸二鈉及其制劑的方法主要有熒光檢測高 效液相色譜法[2, 3] 、蒸發(fā)光散射液相色譜法[4] 和示差折光檢測液相色 譜法[5] 。由于熒光檢測需要柱前衍生，步驟繁瑣；蒸發(fā)光檢測需要用到離子對 試劑，對實(shí)驗(yàn)條件要求較高，重現(xiàn)性較差；示差折光檢測的靈敏度較低等原 因，故本文采用離子色譜法建立了帕米膦酸二鈉注射液的含量檢測方法。

帕米膦酸含有一個氨基和兩個膦酸基團(tuán)，為雙性離子，通過一定PH 抑制其中一方向電離，可以通過離子色譜進(jìn)行分離。而中性情況下其帶負(fù) 電荷較多，可以通過電導(dǎo)檢測器進(jìn)行檢測。如果使用陰離子交換離子色譜 分離，由于雙膦酸基團(tuán)價態(tài)較高，疏水性較強(qiáng)，所以適宜使用疏水性弱的 柱子來進(jìn)行分離。曾實(shí)驗(yàn)過疏水性極弱的Dionex IonPac AS16，疏水性低 的Dionex IonPac AS19，及疏水性中低的Dionex IonPac AS11－HC進(jìn)行實(shí) 驗(yàn)，用OH梯度進(jìn)行淋洗，但均出現(xiàn)峰分叉明顯，峰擴(kuò)展寬等情況，可能受 其氨基的影響。而使用碳酸鹽作為淋洗液的分離柱，如親水性強(qiáng)的Dionex IonPac AS22，則由于保留太強(qiáng)無法出峰。如使用酸作為淋洗液，則可抑制 其電離，使其保持較低的價態(tài)，從而加快出峰。但由于酸只能用非抑制型電 導(dǎo)檢測，因此使用非*電離的有機(jī)酸比*電離的無機(jī)酸有助于降低背景 值。且多價態(tài)的酸其電離類似于膦酸，更有利于洗脫，故選用草酸，鄰苯二 甲酸等進(jìn)行試驗(yàn)。鄰苯二甲酸pKa1=2.95 pKa2=5.41，草酸的PKa1=1.23, Pka2=4.19，因此相同摩爾濃度的淋洗液，草酸由于電離更強(qiáng)，抑制雙膦酸 電離效果更明顯，帕米膦酸出峰更早。且在草酸淋洗液中，帕米膦酸響應(yīng)更 強(qiáng)，相同濃度的峰高為其在鄰苯二甲酸淋洗體系中的20倍。因此使用草酸進(jìn) 行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

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