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遠(yuǎn)慕生物闡述:血漿游離血紅蛋白測(cè)定

來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司   2016年10月17日 16:49  

注:本公司試劑僅用于科研實(shí)驗(yàn)!

實(shí)驗(yàn)原理
血紅蛋白具有類過(guò)氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無(wú)色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測(cè)出其含量。


實(shí)驗(yàn)方法
材料:
1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2.1%H2O2
3.10%醋酸溶液
4.分光光度計(jì)


方法:
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長(zhǎng)為530nm,以空白管調(diào)零,測(cè)定測(cè)定管的吸光度。

試劑 (ml)

測(cè)定管

空白管

2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

0.5

0.5

患者血漿

0.02

/

1% H2O2

0.5

0.5

混勻后室溫放置10min

10%醋酸溶液

5.0

5.0

室溫放置10min

3.計(jì)算公式
血漿游離Hb(mg/L)=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
參考范圍:0-40mg/L


注意事項(xiàng)
1.一切容器避免血紅蛋白污染;
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測(cè)血漿要新鮮,及時(shí)分離,防止人為溶血;
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測(cè)時(shí)要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確。

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