轉(zhuǎn)化細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)中被污染的原因
我司生物技術(shù)指出:污染是轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。一開始就要十分重視,防止污染,否則會(huì)前功盡棄,不僅浪費(fèi)時(shí)間,而且浪費(fèi)人力、物力,甚至造成無法彌補(bǔ)的損失。細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細(xì)胞污染。他們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)中污染的特點(diǎn)如下:
1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長影響明顯。
2、支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁,原體感染,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè),而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,只是慢慢凋亡。
3、黑膠蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點(diǎn)狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會(huì)太影響,細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好,且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長狀態(tài)不會(huì)有明顯影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失,除更換血清外無須特殊處理。
4、真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,慢慢的會(huì)長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,也很難救活了。
5、原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,輕微活動(dòng),細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,轉(zhuǎn)化細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長,只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長,zui終形成惡性循環(huán)。
phospho-MEK1 (Thr286) 凋亡抑制蛋白抗體
Phospho-MEK1/2 (Ser217/221) 凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體
Phospho-MEK1/2 (Ser221) 凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體
phospho-MEK1/MAPKK1(Ser298) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體
Phospho-MEK6 (Ser202) 凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體
Phospho-MEK6 (Ser207) 凋亡相關(guān)蛋白4抗體
Phospho-Merlin (Ser518) 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體(短型)
Phospho-Met (Tyr1003) 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體
Phospho-Met (Tyr1234/1235) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)
轉(zhuǎn)化細(xì)胞
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