不少朋友在為中秋前的zui后一次實驗仔細預備著，而在實驗的過程中大大小小的問題總會遇到一些。今天上午，一位來自上海科研所的客戶孫教師來電與我公司技術專員交流ELISA實驗問題。在交流的過程中，孫教師標明：
 “做定量要驗證試劑盒的線性規(guī)劃，現(xiàn)在我的盒子線性規(guī)劃太窄，線性區(qū)間的高點與低點的濃度值比值為16。我檢驗了改動反應方式，將線性規(guī)劃略擴寬了一些——線性區(qū)間的高點與低點的濃度值比值為32。假設高點往上一個梯度延伸，則R平方就只有0.96（已經(jīng)是的成果了）?？偟膩碚f線性規(guī)劃仍是太窄。我參看了其他一些廠家的ELISA定量試劑盒，基本上線性區(qū)間的高點與低點的濃度值比值都≥64。我知道，ELISA的信號值規(guī)劃窄，但我想線性區(qū)間的高點與低點的濃度值比值≥64應該仍是可以的。那么怎樣才能將試劑盒的線性規(guī)劃擴寬？"
 對此，研域(上海)技術專員分析解說到：試劑盒的線性規(guī)劃影響的首要要素應該是抗體本身的性質(zhì)，其次才是ELISA反應的各種條件。假設在優(yōu)化了各種反應條件下線性規(guī)劃仍是很窄，只能說制的抗體不是很好。而線性規(guī)劃的影響有兩個要素，*個可能要素是本身抗體的親和力，親和力越高靈敏度越高，高點與低點比值也就越高，若規(guī)范曲線的斜率接近于1，抗體親和力仍是可以的。比值沒有相關規(guī)定說一定要高于64。
 第二個可能要素是本身抗原的影響。不同的蛋白ELISA其靈敏度都不相同，線性規(guī)劃也不同，假設你的項目在某一濃度抵達途徑值，說明這個蛋白與其抗體結合與解離在此濃度下抵達了平衡，改動其他條件也無法增加，除非改用化學發(fā)光法。若是同一種蛋白其線性規(guī)劃沒有其他盒子做的高，可檢驗改動條件下降其布景值然后下下降濃度來前進比值。
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