人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒使用說明書
本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷
人(Human)甘露聚糖結(jié)合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA檢測試劑盒使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預
先包被甘露聚糖結(jié)合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)抗體的包被
微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并
*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,
并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甘露聚
糖結(jié)合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)呈正相關。用酶標儀在
450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞
刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地
分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘
取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于
-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的
濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解
后再使用。
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