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thenativeantigen CMV-PENT-50說明書

來源:上海起發(fā)實驗試劑有限公司   2022年02月09日 14:56  

thenativeantigen CMV-PENT-50說明書


巨細(xì)胞病毒 gH 五聚體復(fù)合物


重組人巨細(xì)胞病毒五聚體蛋白復(fù)合物,由 gH、gL、UL128、UL130 和 UL131A 蛋白組成,在哺乳動物 HEK293 細(xì)胞中產(chǎn)生,純度高于 95%。該復(fù)合物已在 ELISA 中顯示與我們的重組NRP-2蛋白結(jié)合。


SKU:CMV-PENT-50 

類:抗原和抗體, CMV 抗原 

標(biāo)簽:巨細(xì)胞病毒 gH 五聚體


SDS-PAGE:考馬斯染色的 SDS-PAGE,顯示巨細(xì)胞病毒 gH 五聚體復(fù)合物。

直接ELISA:板用1000ng、100ng、10ng或1ng NRP-2包被并用每孔 500 µg 的 NRP-2、gH 五聚體或 gB huFc-tag 進(jìn)行探測,然后在室溫下封閉 1 小時。在室溫下,用每孔 500 µg 的 NRP-2、gH 五聚體或 gB huFc-tag 對板進(jìn)行探測 2 小時。對于一抗,綿羊抗 gH 五聚體血清以 1:2,000 使用,小鼠抗 His-tag 抗體以 1:1,200 使用(對于 ZIKV-NS1),gB 不使用一抗。二抗 STAR88P 用于 gH 五聚體,濃度為 1:2,000;STAR147P 用于通過 Fc-tag 以 1:2,000 檢測 gB huFc-tag,Biorad 105300 用于以 1:2,000 檢測 ZIKV-NS1。所有二次孵育均在室溫下進(jìn)行 45 分鐘。使用 TMB 膜底物 (KPL) 進(jìn)行檢測 40 分鐘。使用 1M HCl 終止反應(yīng)。測定證實 NRP-2 與 gH 五聚體特異性結(jié)合,但不與 gB 或 ZIKV NS1 結(jié)合。



巨細(xì)胞病毒GH五聚體復(fù)合物

巨細(xì)胞病毒 gH 五聚體復(fù)合物包含五種病毒蛋白(gH、gL、UL128、UL130 和 UL131A)。該復(fù)合物已在 ELISA 中顯示與我們的重組NRP-2蛋白結(jié)合。

 

產(chǎn)品詳情 – 巨細(xì)胞病毒 gH 五聚體復(fù)合物

  • 重組人巨細(xì)胞病毒五聚體蛋白復(fù)合物(菌株 VR1814),由蛋白 UL75 (gH)、UL115 (gL)、UL128、UL130 和 UL131A 組成。

  • gH 蛋白含有一個 C 末端的 His 標(biāo)簽,并在 HEK293 細(xì)胞中重組產(chǎn)生。

  • 在 Dulbecco 的 PBS 中呈現(xiàn),0.2µm 過濾器已滅菌。

  • 在 ELISA 中純化的蛋白質(zhì)與 NRP-2 受體結(jié)合。

  • NCBI 登錄代碼:ACZ79986。

 

背景

hCMV 可導(dǎo)致免疫受損個體(如移植受者和 HIV 患者)的嚴(yán)重發(fā)病/死亡,而先天性 hCMV 感染可導(dǎo)致出生缺陷。

五聚體復(fù)合物在所有野生型 hCMV 毒株上均有表達(dá),但在 AD169 等實驗室毒株中明顯缺失。弗里德等人)。這嚴(yán)重限制了疫苗的開發(fā)。受體介導(dǎo)的病毒進(jìn)入內(nèi)皮細(xì)胞需要功能性的 gH 五聚體復(fù)合物,而這種復(fù)合物是感染個體中抗病毒抗體的主要靶標(biāo)之一。NAC 的新型重組 hCMV gH 復(fù)合物將是實現(xiàn)必要的基礎(chǔ)和應(yīng)用研究的關(guān)鍵。此外,gH 復(fù)合物有望為新一代體外診斷檢測提供基礎(chǔ)。

類似天然的五聚體復(fù)合物在人體細(xì)胞中產(chǎn)生,以確保所有蛋白質(zhì)都正確折疊并具有其天然糖基化模式。通過質(zhì)譜確認(rèn)純化復(fù)合物中所有五種蛋白質(zhì)的存在。五聚體復(fù)合物以即用型液體形式提供,提供 100ug 和 1mg 小瓶大小,有機(jī)會批量購買。

NAC 在其 CMV 系列中提供另外兩種抗原:一種天然高純度抗原,對 IgG 和 IgM 均表現(xiàn)出高親和力,是抗體捕獲測定的理想選擇,另一種更適合作為血清學(xué)對照的標(biāo)準(zhǔn)裂解物。

巨細(xì)胞病毒 gH 五聚體復(fù)合物作為目錄項目出售,僅用于研究用途和體外診斷測定/試劑盒,因此無需事先與 NAC 達(dá)成協(xié)議。如果產(chǎn)品旨在用作藥物或作為生產(chǎn)藥物的手段(包括用作免疫原和用于臨床試驗),則必須事先與 NAC 簽訂合同協(xié)議。

 

參考

  • 弗里德等人。(2013)。Proc Natl Acad Sci 美國 A.110(51)。

 

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