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biogenes大腸桿菌|360-HCP ELISA說明書
大腸桿菌細胞廣泛用于生物制藥的生產。在藥物開發(fā)過程中，殘留宿主細胞蛋白 (HCP) 的分析對于確保生物制藥的質量和安全非常重要。對于大腸桿菌，HCP 模式受應用制造條件的強烈影響。僅使用一組抗體的傳統(tǒng)通用測定法并不能充分代表這種多樣性。為了克服與傳統(tǒng)通用 HCP 檢測相關的限制，BioGenes 開發(fā)了增強型通用 E.coli|360-HCP ELISA，它由一組四種不同的通用試劑盒組成。
大腸桿菌中的 HCP模式受多種因素影響
1)大腸桿菌菌株的遺傳背景
不同大腸桿菌菌株的基因組表現(xiàn)出顯著的多樣性。典型的大腸桿菌基因組編碼約。4,500 - 5,000 個基因，其中大約 50% 的基因存在于核心基因組中。據(jù)估計，大腸桿菌的泛基因組包括約。128,000 個基因，因此攜帶了大量潛在的 HCP 物種。
2) 細胞培養(yǎng)條件
大腸桿菌的基因表達高度依賴于細胞的生長階段、培養(yǎng)基和補充劑的類型以及生長條件。中樞代謝途徑的重組、應激相關基因的表達和底物降解酶的分泌主要受營養(yǎng)物質的有效性和細胞應激條件（如溫度、氧氣和鹽度）的影響。
3) 重組藥物的性質
重組（外來）蛋白的過表達可導致重組菌株的蛋白質組在代謝功能蛋白、伴侶蛋白和熱休克蛋白的表達模式方面發(fā)生顯著變化。
為什么有四種套件類型？
所有這些條件共同影響了在大腸桿菌發(fā)酵過程中發(fā)生的* HCP 譜，沒有單一的通用試劑盒能夠檢測每一個 HCP。E.coli|360-HCP ELISA
使用不同組的抗 HCP 抗體提供更高的檢測特異性和靈敏度，分為四種試劑盒類型（A 型、C 型、D 型、E 型），用于優(yōu)化 HCP 檢測。
大腸桿菌抗原的遺傳背景：BL21 (DE3) & W3110
發(fā)酵培養(yǎng)基：LB培養(yǎng)基和礦物培養(yǎng)基
由于難以預測大腸桿菌中的 HCP 譜，我們建議先測試所有四種試劑盒類型，然后根據(jù) ELISA 關鍵參數(shù)（如稀釋線性、準確度和總覆蓋率）選擇性能最佳的試劑盒。
| 類型 | 細胞系 | 生長培養(yǎng)基 |
|---|---|---|
| A型（第二代即將發(fā)布） | BL21 (DE3) | 礦物介質 |
| E型 | W3110 | 礦物介質 |
| D型（第二代即將發(fā)布） | BL21 (DE3) | LB培養(yǎng)基 |
| C型 | W3110 | LB培養(yǎng)基 |
請注意：在 360-HCP ELISA 試劑盒中從 Triton™ X-100 轉換為 TWEEN®20
根據(jù) REACH（化學品的注冊、評估、授權和限制）法規(guī) (EC) No 1907/2006 的附件 XIV，Triton™ X-100（包含 4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯酚，乙氧基化）將在 2021 年 1 月 1 日之前在我們所有的 ELISA 試劑盒組件中被 TWEEN®20（聚山梨醇酯 20）取代。
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