optigene GspSSD2.0 等溫 Mastermix說(shuō)明書(shū)
optigene GspSSD2.0 等溫 Mastermix說(shuō)明書(shū)
GspSSD2.0 等溫 Mastermix (ISO-004)
等溫解決方案
快的 LAMP 和 RT-LAMP 主混音。
OptiGene 的工程預(yù)混液可實(shí)現(xiàn) DNA 和 RNA 的最快等溫?cái)U(kuò)增。
包含我們專有的新型 GspSSD LF DNA 聚合酶;通過(guò) in-silico 設(shè)計(jì)進(jìn)一步設(shè)計(jì)。
天然逆轉(zhuǎn)錄酶活性可實(shí)現(xiàn)快速單酶 RT-LAMP。
OptiGene 的等溫預(yù)混液提供 DNA 擴(kuò)增速度
OptiGene 的等溫預(yù)混液(ISO-001 和 ISO-004)與 NEB 的 WarmStart LAMP 試劑盒(DNA 和 RNA)進(jìn)行了比較
從人類 gDNA (Sigma) 擴(kuò)增 DNA 靶標(biāo) (VKORC1)。25μl LAMP 反應(yīng)在 65oC 下在實(shí)時(shí)熱循環(huán)儀 (Roche LC-480) 上進(jìn)行 60 分鐘,一式兩份?!爱a(chǎn)生結(jié)果的時(shí)間”定義為擴(kuò)增熒光值達(dá)到最大熒光 10% 的閾值的時(shí)間。
使用 LAMPDesigner® 設(shè)計(jì)了靶向 VKORC1 基因的 LAMP 引物。
達(dá)到0.8um FIP - CTGTTGCACCTACCCTTCTGGAGCAGGAGAGGGAAATATCA
達(dá)到0.8um BIP - GAAGTCAAGCAAGAGAAGACCTGAAAACTCCTGACCTCAAGTGA
0.2微米F3 - ACCATTATTCTGTCTACCACAC
0.2微米B3 - GACAGGGTTTCACCATGTT
0.4微米LoopF - TCTCTTCCTCTGGCGTCT
0.4微米LoopB - CTCACGCCTATAATCCTAGCATT
時(shí)相比,OptiGene的等溫主要混合物(ISO 001和ISO-004)表現(xiàn)出更快的DNA檢測(cè)NEB 主混音。
OptiGene 的等溫預(yù)混液提供RNA 擴(kuò)增速度
OptiGene 的等溫預(yù)混液(ISO-001 和 ISO-004)與 NEB 的 WarmStart LAMP 試劑盒(DNA 和 RNA)[Lot:0021609] 進(jìn)行了比較。ISO-001 和 ISO-004 不含特定的逆轉(zhuǎn)錄酶 (RT)。為了與 NEB 混合物(包含單獨(dú)和特定的逆轉(zhuǎn)錄酶)進(jìn)行真正的比較,將 0.5U AMV-RT 添加到 OptiGene Master Mix 反應(yīng)(ISO-001 inc. RT 和 ISO-004 inc. RT)中。還比較了標(biāo)準(zhǔn) ISO-001 和 ISO-004 RT-LAMP 反應(yīng),以顯示混合物具有優(yōu)異的固有逆轉(zhuǎn)錄酶活性。
從人總 RNA (Ambion) 中擴(kuò)增 RNA 靶標(biāo) (β-肌動(dòng)蛋白)。25μl RT-LAMP 反應(yīng)在 65oC 下在實(shí)時(shí)熱循環(huán)儀 (Roche LC-480) 上進(jìn)行 60 分鐘,一式兩份。“產(chǎn)生結(jié)果的時(shí)間”定義為擴(kuò)增熒光值達(dá)到最大熒光 10% 的閾值的時(shí)間。
使用 LAMPDesigner® 設(shè)計(jì)了靶向 Beta-actin 基因的 LAMP 引物。
0.8uM FIP – GAGCCACACGCAGCTCATTGTACACGGCATCGTCACCAAC
0.8uM BIP – CTGAACCCCAAGGCCAACCGGCTGGGGTGTTGAAGGTC
0.2uM F3 – CCCTGAAGTACCCCATCGA
0.2uM B3 – ACAGCCTGGATAGCAACGT
0.4uM LoopF – GCCAGATTTTCTCCATGTCGTC
0.4uM LoopB – CGAG
OptiGene 的等溫預(yù)混液(ISO-001 和 ISO-004)在 RT-LAMP 中顯示出速度。
ISO-004 的擴(kuò)增速度比 NEB 混合物快 2 倍,如果添加特定的 RT 酶進(jìn)行同類比較,則快近 3 倍。
主要特征:
最快的 DNA 和 RNA 擴(kuò)增。
*的鏈置換活性
65oC 最佳溫度
5'-3' 外切酶減
3'-5' 外切酶減
貨號(hào): | 描述 |
---|---|
ISO-004 | GspSSD2.0 等溫預(yù)混液 - 300 次反應(yīng) |
ISO-004LNL | GspSSD2.0 Lyse'n'LAMP 等溫預(yù)混液 - 300 次反應(yīng) |
ISO-004nd | GspSSD2.0 等溫預(yù)混液 - 300 次反應(yīng) - 無(wú)染料 |
ISO-004nm | GspSSD2.0 等溫預(yù)混液 - 300 次反應(yīng) - 無(wú) Mg |
ISO-DR004 | GspSSD2.0 等溫預(yù)混液 - 干燥試劑 300 次反應(yīng) |
ISO-DR004-RT100 | 快速等溫逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液 - 干燥試劑 - 10 x 10 反應(yīng) |
ISO-DR004-RT300 | 快速等溫逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液 - 干燥試劑 - 6 x 50 次反應(yīng) |
ISO-004-RT300 | 快速等溫逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液 - 濕試劑 - 6 x 50 反應(yīng) |
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