jembio DNA 聚合酶 Alpha說(shuō)明書(shū)
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DNA 聚合酶 Alpha(小牛胸腺)
DNA 聚合酶 α是一種多亞基酶復(fù)合物,具有 DNA 聚合酶和引物酶活性。它是通過(guò)免疫親和層析從小牛胸腺中分離出來(lái)的 (1)。這種聚合酶用于 DNA 復(fù)制實(shí)驗(yàn)。
單位定義:一個(gè)單位是在 60 分鐘內(nèi)將 1 nmol 總核苷酸轉(zhuǎn)化為酸不溶形式所需的酶量。在 37°C。
測(cè)定條件:60 mM Tris-HCl,pH 8.0,5.0 mM 醋酸鎂,0.3 mg/ml 牛血清白蛋白,1.0 mM 二硫蘇糖醇,0.1 mM 精胺,0.05 mM dCTP,dGTP,dTTP,dATP,(pH 7.0),[ α-3H]dATP 和 10 µg 活化小牛胸腺 DNA。在 37°C 下孵育 30 分鐘。在 50 µl 的反應(yīng)體積中。
質(zhì)量控制:檢測(cè)所有制劑的污染內(nèi)切核酸酶、3'-和 5'-外切核酸酶、非特異性 RNase 以及單鏈和雙鏈 DNase 活性。還測(cè)試了聚合酶的顯著引物酶活性。
儲(chǔ)存緩沖液:20 mM Tris-HCl、pH 8.0、0.25 mM EDTA、50 mM NaCl、1 mM ?-巰基乙醇、0.1% Triton X-100 和 50% (v/v) 甘油。
儲(chǔ)存條件:長(zhǎng)期儲(chǔ)存于-80°C,短期儲(chǔ)存于-20°C。
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