外泌體曾經(jīng)被認(rèn)為是細(xì)胞卸載廢物的一種方式，在過去的十年中，我們對外泌體的看法發(fā)生了巨大變化。我們已經(jīng)開始認(rèn)識到，外泌體是從細(xì)胞中釋放出來的，通過其RNA，蛋白質(zhì)，脂質(zhì)和DNA的載體充當(dāng)信號載體和組織重塑者。參與癌癥，炎癥，免疫，中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能，心臟細(xì)胞功能。

外泌體在這些基本生物過程中的作用，它們作為生物標(biāo)志物，也可作為靶向遞送生物分子藥物載體（如治療）的工具研究。獲取和研究外泌體所需的一切，從分離和鑒定分析以及染色等?；趒PCR的外泌體miRNA分析還是RNA-Seq方法，我們都有高質(zhì)量的外泌體研究產(chǎn)品來支持您的科學(xué)研究并推進(jìn)您的工作。

外泌體是什么

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞內(nèi)多泡體與細(xì)胞膜合后，釋放到細(xì)胞外的一種直徑約30-150nm的膜性囊泡，區(qū)別于微囊泡（100-1000nm),凋亡小體（400-4000nm）。

目前學(xué)術(shù)界主流觀點認(rèn)為外泌體的產(chǎn)生過程為:組物膜內(nèi)陷形成內(nèi)體(endosome)。再形成多囊泡體(mutivesicutar bodesMVB)，最后分泌到細(xì)胞外成為外泌體。

外泌體發(fā)現(xiàn)歷程

外泌體的功能

細(xì)胞增值與凋亡調(diào)控，轉(zhuǎn)移與侵襲，血管生成，免疫應(yīng)答，細(xì)胞分化，代謝調(diào)控，微生物組調(diào)控，病毒感染。

外泌體研究應(yīng)用

1、載體藥物研究：外泌體可作為載體將包裹在內(nèi)的藥物運送到目標(biāo)區(qū)域，做到靶向治療；

2、診斷研究：主要研究外泌體的種類、數(shù)目、大小和內(nèi)容物與疾病之間的關(guān)系；來預(yù)測疾 病的發(fā)生與進(jìn)展（如阿爾茨海默病）；

3、間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體改造：間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體與間充質(zhì)干細(xì)胞有著相似的功能， 間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體更穩(wěn)定，更好保存，易于管理和控制，可以人為改變其內(nèi)容物 的種類和數(shù)量。

4、外泌體biomarker:外泌體內(nèi)容物分析轉(zhuǎn)錄組測序、芯片（mRNA,LncRNA,miRNA,cir  RNA)、蛋白質(zhì)組、代謝組分析。

外泌體提取方法

翌圣生物經(jīng)過研發(fā)，開發(fā)出*的分離技術(shù)，可以快速從各種樣本中如血漿/血清，細(xì)胞培養(yǎng)上清，尿液，乳液，腹水，羊水，唾液等其他體液中獲得大量完整的外泌體，適用于下游共培養(yǎng)，電鏡分析和高通量測序等實驗。

外泌體的科研思路

對外泌體進(jìn)行提取以后，通常對外泌體進(jìn)行鑒定，方法為：NTA粒徑分析、電鏡掃描和Western Blot，WB中的常見指標(biāo)有CD9, CD63, CD81、TSG101，后續(xù)科研思路比較廣泛，其中外泌體內(nèi)含RNA表達(dá)譜研究二代測序的研究是熱門的科學(xué)研究方向，下圖為常見的科研思路的整理圖：

外泌體的鑒定

外泌體形成和釋放后，會形成自身*的標(biāo)志性蛋白，利用Western blot對這些標(biāo)志蛋白進(jìn)行檢測，可以對外泌體進(jìn)行鑒定。翌圣外泌體鑒定試劑盒針對外泌體標(biāo)志蛋白CD63和TSG101開發(fā)，適用于人、大鼠、小鼠外泌體的鑒定。

實驗方法：

SDS-PAGE膠：10%分離膠；

樣品上樣量：10μg；

一抗：Anti-CD63抗體，1:2000稀釋；Anti-TSG101抗體，1:1000稀釋；4℃孵育過夜；

二抗：Anti-mouse IgG，arigo ARG65350，1:10000稀釋，室溫孵育50min；

曝光時間：5s。

外泌體高通量測序

外泌體參與多種生理或病理過程，如抗原呈遞、RNA轉(zhuǎn)運、組織修復(fù)、神經(jīng)退行性疾病、腫瘤轉(zhuǎn)移、代謝重建等。外泌體中含有細(xì)胞特異核酸和蛋白可以作為疾病的早期分子診斷標(biāo)志物，通過對外泌體內(nèi)RNA的測序分析進(jìn)行疾病鑒定和外泌體功能分析。翌圣生物建庫試劑盒，適合外泌體RNA高通量測序，低樣本高收獲。

優(yōu)質(zhì)的低樣本量RNA建庫質(zhì)量

圖1:不同DV200 Human FFPE RNA的500ng投入量建庫，Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina® 相比于競品N* ，文庫大小一致，1st cDNA 合成效率更高。

圖2：Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina®相比于競品N*，數(shù)據(jù)產(chǎn)出相關(guān)性高，數(shù)據(jù)均一性更好。