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說說快速轉膜液的操作步驟

來源:上海維景生物科技有限公司   2023年01月09日 16:56  
  快速轉膜液是一種粉末形態(tài)的安全無毒的用于濕法快速轉膜的緩沖液。使用本快速轉膜液時,在400mA恒流轉膜約20-25分鐘即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉移至PVDF膜或硝酸纖維素膜(NC膜)等印跡膜上,并且產熱少,轉膜效果好。而相同的條件下使用傳統(tǒng)的轉膜液需要轉膜更長時間。本產品為預混粉末安全無毒害,使用前需要用水和乙醇配制,但無需調節(jié)pH值。本產品不含有毒有害組分,也無需使用劇毒的甲醇等試劑。
 
  

快速轉膜液

 

  下面說說快速轉膜液的操作步驟:
  
  1、1X快速轉膜液的配制(1000ml):取50ml快速轉膜液(20X)+850ml去離子水+100ml無水乙醇2:做好轉印三明治結構,然后轉移至電泳槽中,設定恒流400mA,電泳時間25-30分鐘完成蛋白轉膜。注意:PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒以上。
  
  2、轉印電流建議設定恒流400mA,一般25-30分鐘可以將150kD以下蛋白全轉??;小于100kD蛋白20分鐘即可全轉??;對于大于150kD蛋白,建議延長5-10分鐘。
  
  3、凝膠的濃度影響轉印的效率,對于膠濃度7.5%,20分鐘即可完成轉??;對于膠濃度10%,25-30分鐘即可完成轉??;對于膠濃度大于10%,建議延長5-10分鐘
  
  4、40分鐘時間內轉膜不需要放冰上,轉膜槽內外都不可放冰預冷,否則會影響效率。
  
  本快速轉膜液產熱少,外槽無須冰浴,僅用轉膜槽中的內置冰盒進行降溫即可。本快速轉膜液使用便捷,無需調節(jié)pH值。本產品適合手工配制的Tris-Gly和Hepes等緩沖系統(tǒng)的SDS-PAGE凝膠的轉膜,也適合Tris-Gly、Hepes和Bis-Tris系統(tǒng)等預制膠的轉膜。使用后轉膜液可以回收,回收后可以再使用1-2次。

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