翌圣全能型逆轉錄酶重磅上市!
逆轉錄酶是逆轉錄的核心酶原料,被廣泛應用于RT-PCR/qPCR、RNA-seq、單細胞測序等場景,但不同應用場景對逆轉錄酶有不同的性能要求,如RT-qPCR,需要逆轉錄酶具有高靈敏度、高cDNA產(chǎn)量、可兼容復雜結構模板等;在主流單細胞測序技術中,還需要具有末端轉移酶活性;用于cDNA克隆則需要可以合成全長的cDNA。目前市售的逆轉錄酶很難實現(xiàn)一酶兼具多種應用場景,不同的應用場景往往需要篩選不同的逆轉錄酶。
為實現(xiàn)一個逆轉錄酶可兼具多個應用,翌圣ZymeEditor™酶改造平臺通過對M-MLV進行定向改造獲得了性能全方面提升的全能型逆轉錄酶:Hifair® Ultra Reverse Transcriptase(Cat#14604ES),可兼具RT-PCR/qPCR、RNA-seq、單細胞測序、cDNA克隆和文庫構建等多個應用場景。
超高靈敏度:可對1pg Total RNA有效逆轉錄
快速逆轉錄:5 min即可完成cDNA合成
持續(xù)合成能力強:無RNase H活性,最大合成長度可達20 kb
高熱穩(wěn)定性:最高反應溫度可達65℃,提升復雜結構模板兼容性
TdT活性:可向合成的DNA 3′ 末端非模板特異性地添加核苷酸
RT-qPCR:優(yōu)異的靈敏度及批次間穩(wěn)定性
圖1. RT-qPCR檢測數(shù)據(jù),紅,藍,綠分別表示14604ES的3個不同批次
分別投入5、50、500 ng的293T RNA,使用3個批次的14604ES在55℃逆轉錄5 min,逆轉錄產(chǎn)物進行qPCR檢測,結果顯示14604ES的3個批次在各個投入量下,△Ct值均< 0.5,表明14604ES具有優(yōu)異的靈敏度及批次間穩(wěn)定性。
RNA-seq:高建庫產(chǎn)量,低低宿主DNA 殘留
圖2. 14604ES應用于RNA-seq建庫產(chǎn)量
圖3.14604ES應用于 RNA-seq測序質(zhì)量
應用于RNA建庫,14604ES的建庫產(chǎn)量高于進口品牌,測序數(shù)據(jù)質(zhì)量相當且宿主DNA殘留更低。
逆轉錄酶選擇指南
定位 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
應用于RT-LAMP | Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase | 11111ES |
應用于RNA-seq | Hifair® IV Reverse Transcriptase | 11112ES |
應用于RT-PCR/qPCR | Hifair® V Reverse Transcriptase | 11300ES |
應用通用型:RNA-seq、RT-PCR、單細胞測序等 | Hifair® Ultra Reverse Transcriptase | 14604ES |
適用于10x Genomics及國產(chǎn)單細胞儀器平臺 | YeaCell™ 1st Strand Synthesis kit for Single Cell 3?RNA-seq | 13594ES |
注:翌圣逆轉酶系列均可提供高低濃度、無甘油等不同產(chǎn)品形式。
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