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新品上市 | Canace高保真酶全新升級,5sec/kb,保真??欤?/h1>
來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2023年08月22日 09:47  

在使用傳統(tǒng)高保真酶進行PCR時,難免會遇到一些棘手的問題。例如保真度不夠,擴增得到的片段測序后發(fā)現(xiàn)仍有目的堿基發(fā)生突變或缺失。擴增的時間也相對漫長,有時擴增5kb的片段也要花費將近2個小時的時間。現(xiàn)小翌推出一款快速高保真PCR以解決您的煩惱!

2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) 預(yù)混液中含有預(yù)先添加的電泳指示劑,PCR產(chǎn)物可直接進行電泳,擴增產(chǎn)物為平末端。該產(chǎn)品具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,反應(yīng)體系中只需加入引物和模板即可。另外,該產(chǎn)品還含有特異保護劑,使得預(yù)混液反復(fù)凍融后仍可維持穩(wěn)定活性。


產(chǎn)品名稱

2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)


產(chǎn)品特點
  • 超高保真:低錯配率,高GC易突變序列中堿基錯配比231/300000;

  • 擴增速度快:延伸速度快至5 sec/kb;

  • 適用性廣:可覆蓋20-80%GC含量的基因,耐受小鼠裂解物和20%的血液;

  • 穩(wěn)定性好:37℃下存放7d,不影響產(chǎn)品性能;

  • 快速簡便:只需加入引物和模板即可進行擴增,帶有上樣染料,可直接電泳;


產(chǎn)品性能展示
01
保真度高,錯配率低


以不同物種基因組為模板,選取6段GC rich、極易發(fā)生堿基突變/丟失的片段進行擴增,將各自PCR產(chǎn)物克隆至載體,并對每種序列挑取100個單克隆進行測序以確認堿基序列錯配/突變情況。結(jié)果顯示10164ES發(fā)生堿基錯配/突變的比例優(yōu)于國內(nèi)外品牌試劑。


02
10kb以內(nèi)片段擴增延伸時間可達5 sec/kb


使用10164ES和T產(chǎn)品均以5 sec/kb的延伸速度從100 ng人基因組模板擴增不同長度片段(0.4-10 kb),延伸時間均要求為5 sec/kb。結(jié)果顯示,10164ES在10kb以內(nèi)的片段均可以5 sec/kb的延伸速度擴增。Marker: Yeasen 10510ES。


03
可擴增不同GC含量的基因片段


使用10164ES從人gDNA模板中擴增23-76% GC含量片段,延伸時間設(shè)置5 sec/kb。結(jié)果顯示,產(chǎn)品擴增特異性良好,能兼容不同GC含量片段擴增。Marker: Yeasen 10510ES。


04
可兼容不同類型的模板


使用10164ES從不同樣本中擴增不同長度片段,延伸時間設(shè)置5-10 sec/kb。結(jié)果顯示本產(chǎn)品擴增特異性良好,能兼容不同模板的不同片段擴增。

注:1.小鼠gDNA 1 kb;2.小鼠gDNA 2 kb;3.小鼠gDNA 6 kb;4.玉米gDNA 1 kb;5.水稻gDNA 2 kb-A;6.水稻gDNA 2 kb-B;7.人293細胞cDNA 1 kb;8.人293細胞cDNA 2 kb ;9.人293細胞cDNA 3 kb;10.人293細胞cDNA 12 kb;11.大腸桿菌菌液8 kb;12.大腸桿菌菌液16 kb;13.水稻gDNA 10 kb-A;14.水稻gDNA 10 kb-B;15.水稻gDNA 10 kb-C;16.水稻gDNA 20 kb-A;17.水稻gDNA 20 kb-B;18.人血液直擴3 kb。Marker: Yeasen 10510ES


05
不同物種模板擴增檢出率高


用10164ES分別對擬南芥、油菜、馬鈴薯0.5-10 kb 不同GC含量的片段進行擴增,延伸時間5 sec/kb,結(jié)果顯示10164ES可保證擴增。Marker: Yeasen 10510ES。



用10164ES分別對擬南芥、油菜、果蠅、秀麗線蟲和斑馬魚中隨機序列(序列隨機拉取),0.5-10kb覆蓋20-80%GC含量的片段進行擴增,延伸時間5 sec/kb,結(jié)果顯示10164ES檢出率高。


06
穩(wěn)定性好,37℃可放置7天


使用37℃熱加速放置3 d和7 d的10164ES分別擴增100 ng人基因組中3 kb和5 kb的DNA片段,延伸時間設(shè)置5 sec/kb。結(jié)果顯示產(chǎn)品具有不錯的穩(wěn)定性。Marker: Yeasen 10510ES。



客戶試用反饋
01
動物gDNA-120bp-50%GC


客戶評價:PCR過程速度快,條帶合適,可在瓊脂糖電泳中直接上樣。進口N品牌的條帶偏上,可能是自身的buffer影響,且未添加loading buffer,該產(chǎn)品可替代目前我的實驗方案中的高保真酶。


02
植物cDNA-729bp-45.13%GC


客戶評價:與進口T品牌相比,克隆條帶更加清晰單一,整個PCR時間也更快,跑膠時不用再額外加染料,非常方便快捷。


03
微生物gDNA-1158、1953bp-58.8%、52.9%GC


客戶評價:與國產(chǎn)V品牌相比,效果相當,個人感覺更佳。


04
植物cDNA-2000bp-40%GC


客戶評價:效果很好,條帶清楚。



產(chǎn)品試用通道

10163ES01-無電泳指示劑



10164ES-含電泳指示劑





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產(chǎn)品定位

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

5s/kb,保真???無上樣染料)

2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix

10163ES03

1 mL

5s/kb,保真???含上樣染料)

2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)

10164ES03

1 mL

平末端拓撲克隆

Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit

10909ES20

20 T

平末端拓撲克隆,不含多克隆位點

Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit

10910ES20

20 T

單片段同源重組克隆

Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit

10911ES20/50

20/50 T

單多片段通用同源重組

Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit

10922ES20/50

20/50 T

常規(guī)克隆感受態(tài)

10 Chemically Competent Cell

11801ES80

10×100μL

常規(guī)克隆感受態(tài)

DH5α Chemically Competent Cell

11802ES80

10×100 μL

快速克隆感受態(tài)

DH5α Fast Chemically Competent Cell

11803ES80

10×100 μL

常規(guī)克隆感受態(tài)

BL21(DE3) Chemically Competent Cell

11804ES80

10×100 μL

快速PCR

2×Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix(with Dye)

10157ES03/08

1/5×1 mL

常規(guī)條帶分離

Agarose瓊脂糖

10208ES60

100 g






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