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“咻”的一下!5分鐘拿到想要的cDNA!

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2023年10月10日 13:31  

“咻”的一下!5分鐘拿到想要的cDNA!


常見的gDNA消化去除通常在正式反轉(zhuǎn)錄步驟之前,加入gDNA消化去除組分后,需在特定溫度下反應(yīng)一段時(shí)間,反應(yīng)冷卻后再加入相關(guān)的反轉(zhuǎn)錄組分進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,步驟多且耗時(shí)通常在半小時(shí)左右。

小翌今天給大家?guī)硪豢羁焖俜崔D(zhuǎn)錄預(yù)混液,gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄一步完成,且只要5分鐘,“咻”的一下,就可拿到想要的cDNA啦!

 

 

 

在檢測(cè)基達(dá)水平時(shí),RNA樣品中的基因組DNA(gDNA)殘留是一個(gè)潛在的風(fēng)險(xiǎn)。gDNA可能會(huì)與目的RNA共同擴(kuò)增,從而產(chǎn)生假陽性的現(xiàn)象,例如Ct值偏小、Ct值波動(dòng)以及熔解曲線雙峰。

▲ Ct值偏小/Ct值波動(dòng)

 

如何避免RNA中殘留的gDNA帶來的干擾呢?通常情況下,我們可以選用帶gDNA去除的RNA提取試劑獲取高質(zhì)量的RNA或是針對(duì)提取的RNA在反轉(zhuǎn)錄時(shí)進(jìn)行g(shù)DNA消化去除處理。

 

 

 
產(chǎn)品名稱
 

Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR

 

 

 
產(chǎn)品特點(diǎn)
 

一步完成:一步完成gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄;
快速反應(yīng):消化&反轉(zhuǎn)僅需5分鐘;
高效合成:可保證100 pg RNA反轉(zhuǎn)錄;
產(chǎn)物穩(wěn)定:cDNA產(chǎn)物可長(zhǎng)久穩(wěn)定保存。

 

 

 
產(chǎn)品性能
 
 
反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量高
 
 

圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,分別檢測(cè)三種基因。品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

 

圖. 以擬南芥RNA為模板,品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

 

 
優(yōu)異的靈敏度
 
 

圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,擴(kuò)增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分別投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行熒光定量檢測(cè)。結(jié)果顯示,11151ES可滿足100 pg-1 μg RNA的反轉(zhuǎn)錄。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

 

 
cDNA產(chǎn)物穩(wěn)定性好
 
 

圖.以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,將獲得的cDNA產(chǎn)物進(jìn)行反復(fù)凍融,分別凍融10次、20次、30次。測(cè)試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在30次反復(fù)凍融處理后,仍保持高度的穩(wěn)定性,Ct值差異不大。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

 

圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,將獲得的cDNA產(chǎn)物在-20℃、4℃、25℃和37℃的溫度條件下放置7天。測(cè)試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在不同溫度下存儲(chǔ)7天,仍保持高度的穩(wěn)定性,Ct值差異不大。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

 

 

試劑盒穩(wěn)定性好

 
 

圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,將分別在-20℃、4℃和37℃的溫度條件下放置3天和7天的試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。測(cè)試結(jié)果顯示不同溫度不同時(shí)間放置下的11151ES反轉(zhuǎn)錄結(jié)果差異不大,試劑盒具有良好的穩(wěn)定性。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

 

 

 
新品上市-反饋有獎(jiǎng)
 
使用翌圣本款新品進(jìn)行測(cè)試,按要求提交實(shí)驗(yàn)結(jié)果,即可參與活動(dòng)!按照要求填寫反饋內(nèi)容的即可獲得計(jì)時(shí)器一個(gè)!另外,針對(duì)其中小伙伴們數(shù)據(jù)詳盡的細(xì)心反饋,額外再加送低溫金屬冰盒一個(gè)。

 

 

提交時(shí)間:10月8日-11月8日
結(jié)果公布:翌圣工作人員將在收到反饋后的3個(gè)工作日內(nèi),通過郵件聯(lián)系獲獎(jiǎng)?wù)?,并通過當(dāng)?shù)貥I(yè)務(wù)員送達(dá)禮品。

 

 

反饋方式

 
 
掃描下方二維碼或點(diǎn)擊鏈接,按要求填寫新品體驗(yàn)反饋即可獲得精美禮品一份。

 

 

0元試用申請(qǐng)通道

 
 
若小伙伴沒有這款一步法快速反轉(zhuǎn)錄預(yù)混液,可通過以下通道申請(qǐng)0元試用裝~

 

 

 
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方法

分類

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

RNA提取

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免氯仿升級(jí)版

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動(dòng)物組織/細(xì)胞總RNA提取,避開有毒試劑,最快15 min完成

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19221ES

qPCR染料法

高靈敏通用型定量預(yù)混液(染料法)

Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix

11184ES

定量預(yù)混液 (染料法),已發(fā)文章累計(jì)IF達(dá)到5000+

Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox)

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Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox)

11202ES

Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox)

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反轉(zhuǎn)錄試劑

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11149ES

5 min快速反轉(zhuǎn),最長(zhǎng)可滿足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-常規(guī)版New

Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(No Dye)

11150ES

cDNA合成預(yù)混液,含gDNA去除(下游應(yīng)用qPCR)

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