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iLite基于細(xì)胞的技術(shù)原理
iLite ®基于細(xì)胞的檢測(cè)基于簡(jiǎn)單的報(bào)告基因技術(shù)。對(duì)特定靶標(biāo)或配體具有特異性的受體在細(xì)胞表面表達(dá)。一旦配體與受體結(jié)合，就會(huì)觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)，從而導(dǎo)致啟動(dòng)子區(qū)域與報(bào)告基因融合，在本例中為螢火蟲(chóng)熒光素酶。報(bào)告基因的激活以及底物的添加將產(chǎn)生光。光量與與受體結(jié)合的配體的量和活性相關(guān)。
就iLite技術(shù)而言，存在第二個(gè)報(bào)告基因，此處顯示為海腎熒光素酶。該報(bào)告基因受到組成型啟動(dòng)子的控制，因此在任何活細(xì)胞中始終處于活躍狀態(tài)。換句話(huà)說(shuō)，從第二個(gè)報(bào)告基因產(chǎn)生的光量將與活細(xì)胞的數(shù)量相關(guān)，因此可用于標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)果以補(bǔ)償細(xì)胞數(shù)量的差異。
iLite技術(shù)提供了一種基于細(xì)胞的功能檢測(cè)形式，具有許多通常與配體結(jié)合檢測(cè)相關(guān)的功能和優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)基于報(bào)告基因格式，已針對(duì)整個(gè)藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中的應(yīng)用進(jìn)行了修改和調(diào)整。
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