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Ceturegel®基質(zhì)膠應(yīng)用——基質(zhì)膠塞實(shí)驗(yàn)(plug assay)

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年01月12日 17:42  

血管生成(angiogenesis )會(huì)與傷口愈合、炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病視網(wǎng)膜病變、黃斑變性和腫瘤生長(zhǎng)等存在著密切的關(guān)聯(lián)。在生物體生長(zhǎng)過程中,血管生成是新組織生長(zhǎng)的重要組成部分。在成年期,除在特殊器官中受到嚴(yán)格調(diào)節(jié)的周期性事件外,由于促血管生成和抗血管生成內(nèi)源性因素之間的平衡,幾乎每個(gè)正常組織都缺乏大量的生理性血管生成。當(dāng)促血管生成方向的平衡被打亂時(shí),微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (EC) 會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)檠苌杀硇停瑥亩_始血管生成反應(yīng),該反應(yīng)可以被消除或加速。在研究過程中所涉及到血管生成實(shí)驗(yàn),傳統(tǒng)的體內(nèi)血管生成實(shí)驗(yàn)方法有:角膜微袋、腸系膜、海綿/基質(zhì)植入物、圓盤分析 (DAS)、斑馬魚等【1】。

 

在模型生成過程中的細(xì)胞生長(zhǎng)維持基質(zhì)物就是來源與EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物——基質(zhì)膠來保證血管或膠塞實(shí)驗(yàn)成功。Ceturegel®基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內(nèi)毒素含量,并全部經(jīng)過支原體檢測(cè)保證無支原體污染,包括基本濃度、高濃度、低生長(zhǎng)因子等不同類型基質(zhì)膠。 

 


Ceturegel®基質(zhì)膠

 

 

 

應(yīng)用方向

 

 

 

 

產(chǎn)品特點(diǎn)

 
  • 安全性高:不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒);

  • 濃度多樣性:濃度范圍在8~20 mg/mL之間;

  • 批次穩(wěn)定性好:嚴(yán)格生產(chǎn)質(zhì)檢過程保證批次間性能穩(wěn)定;

  • 低內(nèi)毒素:內(nèi)毒素含量<8 EU/mL;

  • 污染物檢測(cè): 經(jīng)檢測(cè)無支原體和細(xì)菌、真菌殘留;

  • 產(chǎn)量高:產(chǎn)量在50L/月以上;

  • 兼容性好:可與任何類型的細(xì)胞培養(yǎng)基兼容。

 

 

 

基質(zhì)膠塞實(shí)驗(yàn)(plug assay)

 
 

實(shí)驗(yàn)步驟

【2】

 
 
  1. 取3~7周的BALB/c nude小鼠放置在層流凈化屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)。

  2. 從-20℃冰箱內(nèi)取Ceturegel®基質(zhì)膠放置4℃下 12h,待其變成液態(tài)。

  3. 將小鼠按實(shí)驗(yàn)分對(duì)照組、VEGFA組、肝素鈉組和VEGFA+肝素鈉組。

  4. 對(duì)照組裸鼠經(jīng)皮下注射Ceturegel®高濃度基質(zhì)膠0.5 mL,VEGFA與肝素鈉組裸鼠分別經(jīng)皮下注射添加VEGFA (20 μg/L) 、肝素鈉 (50U/mL)的基質(zhì)膠0.5 mL,VEGFA+肝素鈉組裸鼠皮下注射物為混勻VEGFA (20μg /L) 和肝素鈉 (50U/mL) 的基質(zhì)膠0.5mL,皮下注射部位為裸小鼠的腹中線附近。

  5. 1周后處死裸鼠取出基質(zhì)膠塞,嚴(yán)格根據(jù)Drabkin試劑進(jìn)行血紅蛋白濃度測(cè)定。

    注:Drabkin試劑配制: 碳酸氫鈉1.0g,氫化鉀0.05g,高鐵0.2g,加蒸餾水至1 000ml即可,置4C冰箱保存。

 

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 
 

圖.BALB/c nude培養(yǎng)7天培養(yǎng)栓塞結(jié)果

 

 

 

FAQ

 
Q
 

實(shí)驗(yàn)操作要注意哪些事項(xiàng)?

1、高濃度基質(zhì)膠極易凝固,接種前基質(zhì)膠及注射針管冰上預(yù)冷!
2、裸鼠皮下注射膠體積較大,進(jìn)針深度要把握好,慎防漏液!
3、正常飼喂,注意觀察注射基質(zhì)膠部位,穩(wěn)定1-2周觀察即可!

 

 

 

 

產(chǎn)品選擇

 

產(chǎn)品類型

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

基本濃度

Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠

40183ES08/10

5/10 mL

Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40184ES08/10

5/10 mL

低生長(zhǎng)因子

Ceturegel® Matrix GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40185ES08/10

5/10 mL

Ceturegel® Matrix GFR, Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40186ES08/10

5/10 mL

 

 

高濃度

Ceturegel® Matrix High Concentration,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40187ES08/10

5/10 mL

Ceturegel® Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40188ES08/10

5/10 mL

Ceturegel® Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40189ES08/10

5/10 mL

干細(xì)胞專用

Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40190ES08/10

5/10 mL

類器官專用

Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40191ES08/10

5/10 mL

 

 

 

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