基因與細(xì)胞治療產(chǎn)品，通常會使用含有工程化基因構(gòu)建的載體或遞送系統(tǒng)，對人體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)DNA進(jìn)行基因修飾、改變基因的表達(dá)方式或調(diào)節(jié)細(xì)胞生物特性，以達(dá)到治療的目的。

當(dāng)宿主細(xì)胞為Human來源時，載體系統(tǒng)在宿主細(xì)胞內(nèi)完成擴(kuò)增后，通過裂解宿主細(xì)胞、分離純化，收集得到高純度的載體系統(tǒng)。收集到的溶液中除載體系統(tǒng)外，還有Human宿主細(xì)胞的殘留DNA。

國家藥品監(jiān)督管理局藥品評審中心（CDE）發(fā)布的關(guān)于基因治療產(chǎn)品指導(dǎo)原則中明確指出需對DNA殘留量和殘留片段大小進(jìn)行控制，建議盡量將DNA殘留片段的大小控制在200bp以下。

ICH Q9中也強(qiáng)調(diào)，對于不同的細(xì)胞系根據(jù)其來源和遺傳背景來確定宿主DNA的測試：

●通過降低生物活性來減少宿主細(xì)胞來源的DNA的致瘤性和感染性風(fēng)險；

●通過降低宿主DNA含量，減小DNA片段的大小至功能基因大?。壳暗淖C據(jù)表明為200bp）以下；

●在終產(chǎn)品中需要檢測宿主DNA的含量和片段大小分布情況；

●如果使用到DNA清除，降解或者失活的方法，則需要方法學(xué)驗(yàn)證。

Human細(xì)胞作為宿主細(xì)胞，同樣適用于這一要求。根據(jù)法規(guī)要求，應(yīng)對中間產(chǎn)品、半成品及成品中的Human殘留DNA進(jìn)行檢測，確保殘留的DNA片段大小和數(shù)量低于風(fēng)險要求。

《中華人民共和國藥典》2020年版第三部規(guī)定，外源性DNA殘留檢測采用DNA探針雜交法、熒光染料色法和定量PCR法。目前市場上對宿主細(xì)胞殘留DNA檢測，主要采用熒光探針qPCR方法，qPCR法具有靈敏度、序列特異性和準(zhǔn)確性，可為生物制藥工業(yè)在工藝研究和成品質(zhì)量控制方面提供可靠的檢測手段，現(xiàn)也已成為各生物制品廠家檢測方法。

翌圣生物自主研發(fā)的Human宿主細(xì)胞DNA殘留檢測試劑盒（Human Host Cell DNA Residue Detection Kit），經(jīng)驗(yàn)證可用于GMP體系下的生物制品中Human基因組DNA殘留檢測，并作為放行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)藥典與法規(guī)的方法學(xué)和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行的驗(yàn)證結(jié)果表明，翌圣生物Human HCD Kit匹配且優(yōu)于專屬性、準(zhǔn)確性、精密度、標(biāo)曲線性、耐用性等檢測標(biāo)準(zhǔn)，定量范圍為30fg/μL~300pg/μL。該試劑盒可快速準(zhǔn)確定量檢測各種生物制品及藥品的中間品、半成品和成品中Human殘留DNA殘留量。還研發(fā)了與Human殘留DNA檢測試劑盒配套使用的宿主細(xì)胞殘留DNA樣本前處理試劑盒，以及配套的自動化核酸提取儀器。