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【產(chǎn)品簡介】
新城疫（Newcastle disease,ND）又名為雞瘟，是目前危害我過養(yǎng)殖業(yè)的主要禽流感業(yè)的主要禽流感傳染病之一，主要侵害雞，火雞，其他禽類和野雞類，引起呼氣道感染及免疫抑制，多年來一直在各類禽類群中廣泛存在，雖然有疫苗進行免疫接種，但免疫雞群仍然發(fā)病，給養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大損失。
【使用意義】
①本產(chǎn)品用于雞血清抗體的檢測，以確定被檢雞是否感染過雞新城疫病毒或免疫雞體內(nèi)抗體水平。
②評估雞群感染ND的風險程度。
③了解雛雞母源抗體水平，為ND免疫程序的制定提供參考。
【檢測原理】
本品系由包被新城疫病毒的微孔板和酶標記抗雞IgG及其他試劑組成，應用酶免間接法原理（ELISA）檢測雞血清或血漿中新城疫病毒IgG抗體。
【試劑盒組成】
| 1. | 雞傳染性支氣管炎病毒抗原包被微孔板條 | 96T×1 |
| 2. | 酶標記物 | 11ml×1 |
| 3. | 樣品稀釋液 | 20ml×1 |
| 4. | 顯色劑A | 7 ml×1 |
| 5. | 顯色劑B | 7 ml×1 |
| 6. | 洗滌液（用前1：25稀釋） | 10 ml×2 |
| 7. | 抗體陽性對照血清 | 0.6 ml×1 |
| 8. | 抗體陰性對照血清 | 0.6 ml×1 |
| 9. | 終止液 | 7 ml×1 |
| 10. | 封板膜 | 3 |
| 11. | 密封袋 | 1個 |
| 12. | 說明書 | 1份 |
【使用方法】
1. 使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2. 取所需用量包被微孔板條，設(shè)空白、陰性及陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3. 陰性、陽性對照孔分別加陰性、陽性對照血清100μl；空白對照孔不加；樣品稀釋，血清每孔樣本先1：50稀釋后加100μl；蛋黃以1:100稀釋后每孔加100ul。
4. 混勻，置37℃溫浴30分鐘。
5. 扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。
6. 每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。
7. 置37℃溫浴30分鐘。
8. 洗滌，同步驟5。
9. 每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。
10. 每孔加終止液50μl，混勻，置酶標儀450nm處測各孔A值（建議用雙波長450nm、630nm）。
【結(jié)果判定】
1. 陰性對照：正常情況下，陰性對照孔A值≤0.1；
2. 陽性對照：正常情況下，陽性對照孔A值≥0.4；
3. 結(jié)果判定：
3.1 未曾免疫
臨界值（C.O.）的計算：臨界值=0.15+陰性對照孔均值；檢測標本A450值≥臨界值判定為本試驗陽性；檢測標本A450值＜臨界值判定為陰性。所有陰性、陽性對照和樣品的A值均須減去空白平均值后作為計算值；陰性對照孔A值大于0.10時應舍棄，如所有陰性對照孔A值都大于0.10時須重復實驗；陰性對照孔低于0.05時以0.05計算。
3.2 免疫雞群
檢測樣本A450值≥0.45即血凝滴度≥6log2時有很好的保護；
0.45> A450≥0.2時相應血凝滴度為5log2；
0.3> A450≥0.2時相應血凝滴度為4log2，有一定保護力；
當A450≤0.3時，建議加強免疫。
【注意事項】
1. 操作時必須戴手套，穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
2. 試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
3. 樣品稀釋液應用加液器加注，并經(jīng)常校對其準確性。
4. 洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
5. 所有樣品洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
6. 微孔板從冷藏環(huán)境中取出時應在室溫中平衡至潮氣干盡后方可，未用完的微孔板須放入有干燥劑的密封袋中保存。
7. 用于檢測的樣品應保持新鮮。
8. 剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
9. 不同批號試劑組分不得混用。
【保存與有效期】
于2～8℃避光保存，有效期自成品檢定合格之日起為12個月。
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