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4個參數(shù)教你鑒別DNA提取磁珠

來源:洛陽吉恩特生物科技有限公司   2016年07月06日 13:34  

1、磁珠的概念

磁珠是生物磁珠的簡稱,是生物化學(xué)與材料學(xué)的有效結(jié)合,磁珠兼具液體流動性和固體磁性材料的特點,在外磁場的作用下可以定向移動和集中,當(dāng)外磁場撤去后,稍加振蕩或抽吸即可均勻分散于液體中。

隨著生物學(xué)研究的深入和材料技術(shù)的進步,生物磁珠在生物技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用越來越廣泛和深入。

2、磁珠的結(jié)構(gòu)

生物磁珠的種類是多種多樣的,磁珠為核殼結(jié)構(gòu),中心為氧化鐵內(nèi)核,中層包裹封閉基質(zhì),外層修飾官能團。中層基質(zhì)不同,磁珠的基本性質(zhì)會有所不同;修飾的官能團不同,磁珠的吸附特性會有所不同。即便是相同的封閉基質(zhì)和官能團,基質(zhì)的包被工藝不同,會造成基質(zhì)厚度、孔容、孔徑、比表面積不同,所能吸附的顆粒粒徑偏好也會有所不同;即便是修飾相同的官能團,官能團修飾工藝不同,會造成官能團密度、臂長不同,所攜帶的表面電荷、斥力、氫鍵數(shù)量不同,吸附能力會隨之改變。

由此可見,磁珠的種類是多種多樣的,制作過程中一點微小的變化,都會制出*不同的磁珠。而不同的磁珠基本特性不同,用于實驗中吸附和釋放吸附物的條件也*不同,所以不同磁珠適用的領(lǐng)域也有所區(qū)別。

3、DNA提取磁珠的重要參數(shù)

DNA提取磁珠應(yīng)用于DNA吸附與提取純化的領(lǐng)域,具有一些重要的參數(shù)要求,如半沉降時間,磁吸時間,粒徑,比表面積,表面官能團密度等。

吉恩特生物的DNA提取磁珠,經(jīng)過反復(fù)試驗,有著嚴格的生產(chǎn)工藝,于吸附DNA的相關(guān)實驗,具有分散性好,半沉降時間長,性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點。

3.1、DNA提取磁珠的懸浮性

因為磁珠雖然具有一定的流動性,能夠均勻分散在液體中,跟隨液相進入實驗體系,但磁珠畢竟還是固體,會在液體中以一定速度沉降。所以磁珠的半沉降時間應(yīng)在2min以上,才能保證磁珠在混勻后到加入樣本中的過程中不因為沉降過快而導(dǎo)致加入量不準確,如果是高通量的實驗,對磁珠的半沉降時間要求應(yīng)該更高。吉恩特生物的DNA提取磁珠,01系列磁珠半沉降時間可達20-30min,02系列磁珠半沉降時間也在3-8min以上,良好的懸浮性,使實驗不用頻繁混勻磁珠,方便快捷的同時增加了實驗的穩(wěn)定性和均一性。

3.2、DNA提取磁珠的磁吸時間

磁珠攜帶目的DNA與體系中雜質(zhì)分離的過程,主要是通過外加磁場使磁珠定向移動并達到固液分離的目的,所以磁珠的磁吸時間會影響固液分離的時間。吉恩特生物的DNA提取磁珠,磁吸時間均小于30s02系列磁珠甚至可達到磁吸時間小于10s。適應(yīng)手動和儀器操作進行核酸純化的實驗頻率。

 3.3、DNA提取磁珠的比表面積

部分使用磁珠的實驗人員認為粒徑越小的磁珠比表面積越大吸附效果也越好,這種想法并不*正確。因為磁珠表面并不是光滑平整的球面,而是在中間基質(zhì)層有孔洞,外圍修飾集團有凸起的,比表面積并不由粒徑大小決定,而且也并不是比表面積越大吸附效果就越好的。有研究表明,當(dāng)比表面積在60m2/g時,對核酸的吸附效果較好。粒徑在300nm左右的磁珠包被基質(zhì)層薄內(nèi)陷孔洞少,孔容孔徑低;粒徑在1um左右的磁珠包被基質(zhì)層厚,表面有大量孔洞,兩者比表面積都可以達到60m2/g左右。

3.4DNA提取磁珠的官能基團

一般認為磁珠表面官能團能越密集,對核酸的吸附效果越好,但考慮到空間位阻、電荷斥力,過高濃度使官能團陷入磁珠內(nèi)部等原因,DNA提取磁珠的表面官能團數(shù)量并不是無限制越多越好的。適當(dāng)?shù)慕档痛胖樯a(chǎn)過程中官能團修飾原料,可以很好的控制DNA提取磁珠的粒徑和吸附量平衡。

4、結(jié)語

除了磁珠本身的性質(zhì)之外,提取純化DNA的過程中,使用的試劑體系也要和磁珠相匹配,能夠提取DNA的磁珠種類很多樣,不僅包被的中層基質(zhì)可能不同,表面修飾的官能團也并不盡相同,不同磁珠適用的試劑體系是有區(qū)別的,吸附原理也不同,需要使用者根據(jù)具體情況進行不同的調(diào)整和測試。

面對不同的磁珠產(chǎn)品,選擇標(biāo)準的DNA提取磁珠生產(chǎn)廠家,是效率zui高的方法。

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