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蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的層次與測(cè)定方法檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹
dànbáizhì結(jié)構(gòu)是生物分子研究的核心領(lǐng)域,因?yàn)樗鼈兊慕Y(jié)構(gòu)與功能密切相關(guān)。dànbáizhì結(jié)構(gòu)通常分為四個(gè)層次:一級(jí)結(jié)構(gòu)、二級(jí)結(jié)構(gòu)、三級(jí)結(jié)構(gòu)和四級(jí)結(jié)構(gòu)。
圖1
1、一級(jí)結(jié)構(gòu)(Primary Structure):
(1)描述的是dànbáizhì的氨基酸序列。
(2)這一連續(xù)的氨基酸鏈?zhǔn)峭ㄟ^肽鍵連接的。
(3)一級(jí)結(jié)構(gòu)決定了dànbáizhì的身份和許多其生物學(xué)性質(zhì)。
(4)測(cè)定方法:
氨基酸測(cè)序:例如Edman降解法,可以連續(xù)地從dànbáizhì的一端切割并識(shí)別氨基酸。
質(zhì)譜分析:特別是串聯(lián)質(zhì)譜,可以用于識(shí)別和測(cè)定氨基酸序列。
2、二級(jí)結(jié)構(gòu)(Secondary Structure):
(1)描述的是dànbáizhì局部的折疊模式,例如α-螺旋和β-折疊。
(2)由氫鍵引起的局部穩(wěn)定結(jié)構(gòu),氫鍵是在氨基酸的主鏈之間形成的。
(3)這些模式為dànbáizhì的三維結(jié)構(gòu)提供了框架。
(4)測(cè)定方法:
圓二色光譜(CD):用于檢測(cè)dànbáizhì中α-螺旋、β-折疊和無規(guī)則卷曲的內(nèi)容。
紅外光譜(IR):可以用于分析dànbáizhì的二級(jí)結(jié)構(gòu)。
3、三級(jí)結(jié)構(gòu)(Tertiary Structure):
(1)描述的是單個(gè)多肽鏈完整的三維結(jié)構(gòu)。
(2)三級(jí)結(jié)構(gòu)是由于氨基酸的R基團(tuán)之間的相互作用(如疏水作用、離子鍵、氫鍵和二硫鍵)引起的折疊。
(3)描述了dànbáizhì的整體空間排列。
(4)測(cè)定方法:
X射線晶體學(xué):分析純化并結(jié)晶化的dànbáizhì樣品,獲得dànbáizhì的高分辨率三維結(jié)構(gòu)。
核磁共振(NMR)光譜:在液態(tài)條件下獲得dànbáizhì的三維結(jié)構(gòu)信息。
冷凍電鏡(Cryo-EM):用于獲得大分子復(fù)合物的三維結(jié)構(gòu)。
4、四級(jí)結(jié)構(gòu)(Quaternary Structure):
(1)描述的是多個(gè)多肽鏈(亞單位)如何聚集形成完整的dànbáizhì復(fù)合體。
(2)不是所有的dànbáizhì都有四級(jí)結(jié)構(gòu)。只有由兩個(gè)或更多的多肽鏈組成的dànbáizhì才有。例如:血紅蛋白由4個(gè)多肽鏈組成。
(3)測(cè)定方法
X射線晶體學(xué)和冷凍電鏡:都可以用來分析大分子復(fù)合物的結(jié)構(gòu)。
凝膠過濾色譜和親和色譜:可以用于確定亞基之間的相互作用和組裝。
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