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正確清洗實(shí)驗(yàn)器皿的方法介紹2018/08/20: 常規(guī)洗滌法（一般容器）1.清洗實(shí)驗(yàn)器皿前先用肥皂洗手。2.先用自來(lái)水沖去灰塵，再用毛刷蘸洗滌劑液仔細(xì)刷凈內(nèi)外表面，之后邊刷邊用水沖至無(wú)洗滌劑液;3.再用自來(lái)水沖洗3～5次，去離子水沖洗3次。4.不便刷洗的實(shí)驗(yàn)器皿先用洗滌劑液浸泡后用水沖洗。洗凈的玻璃器皿內(nèi)外不掛水珠，器壁上殘留的水用指示劑檢查為中性。5.去污粉不得用于洗滌刻度器皿和玻璃儀器內(nèi)壁，以防劃傷玻璃。不同材質(zhì)器皿的洗滌1.銀、鎳和鐵質(zhì)器皿用NaOH熔融，也可用1：3稀HCl短時(shí)間浸泡后用水沖洗2.瑪瑙器皿不宜浸洗，要先用洗滌劑洗后用水沖

細(xì)胞培養(yǎng)的一般過(guò)程2018/08/20: 一、準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對(duì)開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要，工作量也較大，應(yīng)給予足夠的重視，準(zhǔn)備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無(wú)法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無(wú)菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。二、取材在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞（視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?，?jīng)過(guò)一定的處理（如消化分散細(xì)胞、分離等）后接入培養(yǎng)器血中，這一過(guò)程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無(wú)取材這一過(guò)程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)

干擾素的產(chǎn)生及作用2018/08/17: 干擾素（IFN）是一種廣譜抗病毒劑，并不直接殺傷或抑制病毒，而主要是通過(guò)細(xì)胞表面受體作用使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白，從而抑制病毒的復(fù)制；同時(shí)還可增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）、巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的活力，從而起到免疫調(diào)節(jié)作用，并增強(qiáng)抗病毒能力。干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(zhì)（主要是糖蛋白），是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它們?cè)谕N細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長(zhǎng)，以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。干擾素不能直接滅活病毒，而是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞合成抗病毒蛋白（AVP）發(fā)揮效應(yīng)。干擾素首

移液管的注意事項(xiàng)2018/07/20: 1．移液管(吸量管)不應(yīng)在烘箱中烘干。2．移液管(吸量管)不能移取太熱或太冷的溶液。3．同一實(shí)驗(yàn)中應(yīng)盡可能使用同一支移液管。4．移液管在使用完畢后，應(yīng)立即用自來(lái)水及蒸餾水沖洗干凈，置于移液管架上。5．移液管和容量瓶常配合使用，因此在使用前常作兩者的相對(duì)體積校準(zhǔn)。6．在使用吸量管時(shí)，為了減少測(cè)量誤差，每次都應(yīng)從上面刻度（0刻度）處為起始點(diǎn)，往下放出所需體積的溶液，而不是需要多少體積就吸取多少體積。

分享影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素2018/07/05: 培養(yǎng)基滅菌是否*，影響因素很多，除了培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的種類和數(shù)量，滅菌溫度的高低，時(shí)間長(zhǎng)短外，還取決于：1.營(yíng)養(yǎng)成分的保持濕熱滅菌時(shí)，微生物被殺死的同時(shí)，培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營(yíng)養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng)，造成培養(yǎng)基中原有營(yíng)養(yǎng)成分的數(shù)量變化，因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。2.微生物的耐熱性細(xì)菌芽孢的熱阻較大，滅菌所需要的時(shí)間取決于把細(xì)菌芽

細(xì)胞用于組織修復(fù)具有重要意義2018/07/05: 近日，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了驅(qū)動(dòng)胚胎干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞成熟分化的一條分子機(jī)制，內(nèi)皮細(xì)胞是可以形成血管的一類細(xì)胞，通過(guò)這一機(jī)制了解該分化過(guò)程對(duì)于幫助科學(xué)家們有效地將干細(xì)胞誘導(dǎo)為內(nèi)皮細(xì)胞用于組織修復(fù)具有重要意義。這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)能夠調(diào)節(jié)胚胎干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化所需特定基因表達(dá)的關(guān)鍵酶，這兩個(gè)關(guān)鍵酶主要負(fù)責(zé)進(jìn)行表觀遺傳學(xué)修飾。表觀遺傳學(xué)修飾是通過(guò)對(duì)DNA或與DNA相互作用的蛋白添加或去除某種化學(xué)基團(tuán)改變特定基因表達(dá)活性，而不改變DNA本身序列的一種基因表達(dá)調(diào)控方法。研究人員利用小鼠模型對(duì)幾種組蛋白去甲基化酶能否

什么因素會(huì)影響抗原抗體反應(yīng)呢？2018/05/25: 抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后，雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體，若溶液中無(wú)電解質(zhì)參加，仍不出現(xiàn)可見反應(yīng)。為了促使沉淀物或凝集物的形成，常用0.85％氯化鈉或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。由于氯化鈉在水溶液中解離成Na+和C1－，可分別中和膠體粒子上的電荷，使膠體粒子的電勢(shì)下降。當(dāng)電勢(shì)降至臨界電勢(shì)（12～15mV）以下時(shí)，則能促使抗原抗體復(fù)合物從溶液中析出，形成可見的沉淀物或凝集物。（一）溫度在一定范圍內(nèi)，溫度升高可加速分子運(yùn)動(dòng)，抗原與抗體碰撞機(jī)會(huì)增多，使反應(yīng)加速。但若溫度高于56℃時(shí)，可導(dǎo)致已結(jié)合的抗

血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用2018/03/06: 血清是一種成分復(fù)雜的混合物，且對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用，我們培養(yǎng)細(xì)胞離不開血清。那在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中由血清引起的細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響都有哪些表現(xiàn)？1、細(xì)胞生長(zhǎng)速度緩慢，長(zhǎng)滿單層時(shí)間長(zhǎng)；從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞，用同一種培養(yǎng)液，分別加入10％的對(duì)照血清和待檢血清，在相同條件下培養(yǎng)72小時(shí)，會(huì)出現(xiàn)對(duì)照血清長(zhǎng)滿單層，而待檢血清大約只有60～70％，這種血清就不適合用來(lái)大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞。2、細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常，細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生變化；由于血清的質(zhì)量問題，使原本狀態(tài)正常的細(xì)胞經(jīng)傳代后形態(tài)會(huì)變差；比如

體外細(xì)胞的原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)2018/03/05: 一、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。直接從體內(nèi)獲取的組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，則需要做再培養(yǎng)，即將培養(yǎng)的細(xì)胞分散后，從一個(gè)容器以1：2或其他比率轉(zhuǎn)移到另一個(gè)或幾個(gè)容器中擴(kuò)大培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的累積次數(shù)就是細(xì)胞的代數(shù)。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或DMS作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形

常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)初代消化培養(yǎng)法2017/11/30: 1.準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角燒瓶中，結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖

抗體是怎么形成的？2017/11/30: 抗體是怎么形成的？抗原進(jìn)入機(jī)體后,首先一部分被抗原提呈細(xì)胞捕獲,加工處理后呈遞給Th（T細(xì)胞輔助細(xì)胞,使Th細(xì)胞活化,另一部分直接跟B細(xì)胞表面的抗原受體（BCR）結(jié)合,產(chǎn)生刺激B細(xì)胞活化的信號(hào),然后活化的Th細(xì)胞給B細(xì)胞第二個(gè)刺激信號(hào),這時(shí)B細(xì)胞就被活化產(chǎn)生抗體,和抗原特異性的結(jié)合.然后抗體通過(guò)自身的巨噬細(xì)胞,中性粒細(xì)胞等吞噬細(xì)胞的受體與這些細(xì)胞結(jié)合,介導(dǎo)抗原抗體復(fù)合物被吞噬,進(jìn)而被降解.體液免疫：生發(fā)中心母細(xì)胞的輕鏈和重鏈V基因可發(fā)生高頻率的點(diǎn)突變,在抗原誘導(dǎo)的情況下產(chǎn)生.在初次免疫應(yīng)答時(shí),大

細(xì)胞培養(yǎng)2017/09/13: 一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)在所有的細(xì)胞離體培養(yǎng)中，zui困難的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清：動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)常常需要血清。zui常用的是小牛血清。血清提供生長(zhǎng)必需因子，如激素、微量元素、礦物質(zhì)和脂肪。有一天人們真正學(xué)會(huì)了配制和血清一樣的培養(yǎng)液，那時(shí)血清才可被取代。在這里，血清等于是動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)的天然營(yíng)養(yǎng)液。⑵支持物：大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞有貼壁生長(zhǎng)的習(xí)慣。離體培養(yǎng)常用玻璃，高速冷凍離心機(jī)，塑料等作為支持物。⑶氣體交換：二氧化碳和氧氣的比例要在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中不斷進(jìn)行調(diào)節(jié)，不斷維持所需要的氣體

對(duì)于血清的研究2017/08/29: 血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)是需要的，因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng)，如MEM培養(yǎng)基，較為常用的量為8％～10％的比例，原代培養(yǎng)使用量為15%～20%，而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3％左右，細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。血清是非常復(fù)雜的混合物，成分多樣，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用：1）提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)；2）提供激素和各種生長(zhǎng)因子，如胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（、地塞米松）、類固醇激

淋巴細(xì)胞分離液的原理及應(yīng)用2017/08/24: 淋巴細(xì)胞分離液是一種根據(jù)細(xì)胞密度差異，借助離心產(chǎn)生的重力加速度，進(jìn)行細(xì)胞的分離純化的常用試劑。常用的淋巴細(xì)胞分離液有Ficoll淋巴細(xì)胞分離液、Percoll淋巴細(xì)胞分離液。Ficoll與Percoll分離單個(gè)核細(xì)胞的方法均為密度梯度離心法。淋巴細(xì)胞分離液的原理：外周血中單個(gè)核細(xì)胞和單核細(xì)胞,其體積、形態(tài)和密度與其他細(xì)胞不同.淋巴細(xì)胞分離液是一種密度介于1.075∽1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,從而將各種血細(xì)胞加以分離?；緫?yīng)用：可用于

無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法2017/08/23: 無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法目前，血清仍是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中zui基本的的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或者細(xì)胞生長(zhǎng)狀況不良時(shí)，常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛以后，再換成無(wú)血清培養(yǎng)液。細(xì)胞轉(zhuǎn)入無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個(gè)適應(yīng)過(guò)程，一般要逐步降低血清濃度，從10%減少到5%，3%，1%，直至無(wú)血清培養(yǎng)。在降低過(guò)程中要注意觀察細(xì)胞形態(tài)是否發(fā)生變化，是否有部分細(xì)胞死亡，存活細(xì)胞是否還保持原有的功能和生物學(xué)特性等。在實(shí)驗(yàn)后這些細(xì)胞一般不再繼續(xù)保留，很少有細(xì)胞能夠長(zhǎng)期培養(yǎng)于無(wú)血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的。細(xì)胞

白細(xì)胞介素的基本介紹及重要性2017/07/25: 白細(xì)胞介素是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞。由于zui初是由白細(xì)胞產(chǎn)生又在白細(xì)胞間發(fā)揮作用，所以由此得名，現(xiàn)仍一直沿用。白細(xì)胞介素interleukin縮寫為IL。有來(lái)源于淋巴細(xì)胞或巨噬細(xì)胞等許多因子參與。來(lái)源于淋巴細(xì)胞的有淋巴細(xì)胞活素，來(lái)源于巨噬細(xì)胞的總稱為monokine，其中的各個(gè)因子的生物活性各有不同（例如巨噬細(xì)胞活化，促進(jìn)T細(xì)胞繁殖等），因子自身的物理化學(xué)性質(zhì)多不清楚。研究團(tuán)體提出了在淋巴細(xì)胞活素及巨噬細(xì)胞因子（monoki-ne）中，已作為一種提純并弄清了性質(zhì)的稱為白細(xì)胞間[殺菌]素

細(xì)胞培養(yǎng):細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢怎么辦?2017/06/16: 在細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中，難免會(huì)遇到這樣那樣的問題，比如細(xì)胞不貼壁、HP值變化迅速、細(xì)胞凋亡、等等。細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢1.培養(yǎng)基或血清改變：比較不同培養(yǎng)基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有無(wú)差異；通過(guò)生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)比較新老批次血清有無(wú)差異；增大細(xì)胞初始接種密度；使細(xì)胞逐步適應(yīng)新的培養(yǎng)基。2.必需生長(zhǎng)促進(jìn)成分（如L-谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子）耗竭、缺乏或分解：去除原培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基；向培養(yǎng)基中添加生長(zhǎng)促進(jìn)成分（如L-谷氨酰胺）。3.輕度細(xì)菌或真菌污染：在不添加抗生素的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，如細(xì)胞被污染，滅菌處理后丟棄。4.

轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程2017/05/22: 一、準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對(duì)開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,準(zhǔn)備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無(wú)法進(jìn)行.準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無(wú)菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試,具體內(nèi)容可參閱有關(guān)文獻(xiàn).二、取材在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞,經(jīng)過(guò)一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)皿中,這一過(guò)程稱為取材.如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無(wú)取材這一過(guò)程.機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。三、培養(yǎng)將取得的組織

RNA純化方法及沉淀2017/05/18: RNA純化要求---RNA樣品中不應(yīng)存在對(duì)酶（如逆轉(zhuǎn)錄酶）有抑制作用的有機(jī)溶劑和過(guò)高濃度的金屬離子，避免其他生物大分子如蛋白質(zhì)，多糖和脂類分子的污染，排除DNA分子的污染。一、RNA純化方法及沉淀---有機(jī)溶劑抽提法1、抽提在使用RNA提取試劑進(jìn)行RNA提取時(shí)，常使用進(jìn)行抽提，以去除蔗糖、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，并促進(jìn)水相與有機(jī)相的分離，從而達(dá)到純化RNA的目的。抽提RNA后，一般采用異丙醇或乙醇來(lái)沉淀水相RNA。加入0.6倍水相體積的異丙醇或與水相等體積的異丙醇，室溫沉淀20-30min，高速離心，可獲

影響細(xì)胞生長(zhǎng)的幾點(diǎn)因素2017/04/13: 影響細(xì)胞生長(zhǎng)的幾點(diǎn)因素，摘要：細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng),失去了機(jī)體的調(diào)節(jié)和控制,因此,除滿足營(yíng)養(yǎng)的要求外,還必須使細(xì)胞生存環(huán)境晝接近活體的環(huán)境.外環(huán)境的培養(yǎng)條件如溫度、滲透壓、酸堿度等均能影響細(xì)胞的生長(zhǎng).一、溫度：一般哺乳類及禽類細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃.溫度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng).細(xì)胞耐受低溫的能力比抗熱的能力強(qiáng),在低溫下,細(xì)胞的代謝活力及核分裂降低.溫度低于0℃時(shí),雖影響細(xì)胞代謝,但并無(wú)傷害作用.把細(xì)胞置于23~25℃時(shí),細(xì)胞仍能生存和生長(zhǎng),但速度減緩,不過(guò),魚類細(xì)胞的適宜培養(yǎng)

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