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肉毒梭菌中毒癥病原學與流行病學特征2011/01/12

肉毒梭菌中毒癥（botulism）是由肉毒毒素進入機體后引起人和多種動物的一種以運動神經(jīng)麻痹為特征的中毒性疾病。該病在*均有分布，動物的發(fā)病多數(shù)是由于食入含有毒素的高蛋白腐敗性飼料所致。肉毒梭菌（Ctostridiumbotulinum）是兩端鈍圓的大桿菌，革蘭染色陽性。無莢膜，可在自然界形成芽孢。它是嚴格厭氧菌，在厭氧肉肝湯中加入新鮮肝塊才能旺盛生長。在血液瓊脂表面的菌落呈圓形或不規(guī)則形狀，半透明、灰白色，表面扁平或微凸，邊緣呈葉狀、扇貝狀或樹根狀，具有日型溶血。在繁殖過程中該菌可產(chǎn)生毒力*的

豬瘟病原學2011/01/12

豬瘟（hogcholera，HC）俗稱爛腸瘟，歐洲人稱為古典豬瘟（classicalswinefever，CSF）。豬瘟與非洲豬瘟具有相同的癥狀，但兩者的病原不同。該病是由豬瘟病毒（RNA病毒）引起的一種具有高度傳染性和致死性的傳染病。HCV感染在臨床上可表現(xiàn)為死亡率很高的急性型，或者死亡率變化不定的亞急性型、慢性型以及隱性型。其特征是急性型高熱稽留呈敗血性變化，小血管變性而引起各器官的廣泛性出血、梗死和壞死等表現(xiàn)。豬瘟的流行廣泛，發(fā)病率、死亡率高。豬瘟1810年首先發(fā)現(xiàn)于美國，在我國也已流行多

DNA為基礎的方法檢測飼料中的動物源性2011/01/08

以檢測DNA為基礎的方法主要有核酸探針雜交、DNA指紋分析、PCR-RFLP分析、PCR特異擴增（常規(guī)PCR方法和Real-timePCR方法）。其主要原理都是對各物種內(nèi)特異的核酸序列進行提取、鑒定，從而判定飼料內(nèi)有無該物種的成分，只是結(jié)果判別的信號條件不同。核酸探針雜交方法的原理是堿基配對，即一條DNA鏈能與它的特異互補鏈配對形成雙鏈DNA。因此，用一個熒光物質(zhì)或放射性物質(zhì)標記的單鏈核苷酸探針能夠很快地從許多其他DNA分子的混合物中檢測出它的互補單鏈。由于雜交探針需要用熒光物質(zhì)或放射性物質(zhì)進行

近紅外光譜方法檢測飼料中的動物源性成分02011/01/08

近紅外光譜測定（NIRS）是飼料界zui廣泛應用的技術之一，可以將它用于飼料中動物源性成分的檢測。NIRS的原理是飼料中的分子物質(zhì)可以吸收不同波長的光線。其優(yōu)點是檢測快速，不使用有害的試劑，所需樣品量少，為非破壞性檢測，經(jīng)濟重復性好以及具有可以開發(fā)為商業(yè)化的儀器的潛力。主要缺點是這項技術是間接檢測，因此需要大量樣品的參考值來形成一個校正和參考模型。目前，世界上許多國家特別是歐盟國家，為了防止瘋牛病已制定了各種法律來確保飼料的生物安全，主要是控制動物源性成分在飼料中的應用，禁止在反芻動物的飼料中添

5種磺胺類藥物殘留的液相色譜2011/01/08

（1）試劑和材料除特別注明外，所用試劑均為分析純；水為超純水。①磺胺類藥物對照晶（SMM、SDM、SMz、SMZ和SQ）②甲醇色譜純③乙腈色譜純④正己烷⑤正丙醇⑥無水硫酸鈉⑦堿性氧化鋁SPE柱每根柱填料量為28⑧磺胺類藥物貯備液（1mg／mi）分別取上述磺胺類藥物對照晶各約50mg，精密稱定，置同一50ml量瓶，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。置一20~C以下冰箱中保存，有效期3個月。⑨磺胺類藥物工作液（5Ps／mi）精密量取磺胺類藥物貯備液o．5ml，置100ml量瓶，用甲醇稀釋至刻度，搖

恩諾沙星和環(huán)丙沙星殘留檢驗的液相色譜法2011/01/08

（1）試劑和材料以下所用的試劑，除特別注明外均為分析純試劑，水為符合GB／T6682規(guī)定的二級水。①環(huán)丙沙星含環(huán)丙沙星不得少于99．0％②恩諾沙星含環(huán)丙沙星不得少于99．0％③乙腈：色譜純④三乙胺⑤氫氧化鈉⑥磷酸二氫鉀⑦磷酸⑧5．0mot兒氫氧化鈉溶液：取氫氧化鈉飽和溶液14ml，加水稀釋到100ml；⑨0．03mot／L氫氧化鈉溶液：取5．0mol／L氫氧化鈉溶液o．6ml，加水稀釋到100ml。⑩0．05mol／L磷酸／三乙胺溶液（pH2．4）：取85％的磷酸3．4ml，加水稀釋到1000m

氣相色譜法測定氯霉素CAP殘留32011/01/08

（1）試劑和材料除另有規(guī)定外所有試劑均為分析純，水為蒸餾水或相當?shù)娜ルx子水。①乙酸乙酯：重蒸餾②甲醇：重蒸餾③正己烷：重蒸餾④丙酮：重蒸餾⑤硅烷化試劑：3ml六甲基⑥氯化鈉水溶液：1mol／L⑦氯霉素標準品：含量≥99．5％⑧氯霉素標準溶液：準確稱取適量的氯霉素標準晶，用丙酮配成o．10rug／mi的貯備液，根據(jù)需要稀釋成適當濃度的標準工作液。（2）儀器和設備①氣相色譜儀：配有電子俘獲檢測器②均質(zhì)器③離心機：3000r／mtn④多功能微量化學樣品處理儀或其他相當?shù)膬x器⑤具塞離心管：5ml⑥離心管

酶聯(lián)免疫吸附法（EIASA）測定克倫特羅殘留22011/01/08

（1）試劑和材料以下所有試劑，除特別注明外，均為分析純試劑；水為符合GB／T6682規(guī)定的二級水。①鹽酸克倫特羅對照品：含鹽酸克倫特羅不得少于98．5％②鹽酸③無水甲醇④氫氧化鈉⑤磷酸二氫鉀⑥磷酸⑦鹽酸溶液取鹽酸4．2ml，加水至1000ml，即得。⑧o．5mol／L磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀68g，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．O，用水稀釋至1000ml，即得。⑨0．05mol幾磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀6．88，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．0，用水稀釋至1000mi，即

酶聯(lián)免疫吸附法（EIASA）測定克倫特羅殘留02011/01/08

（1）試劑和材料以下所有試劑，除特別注明外，均為分析純試劑；水為符合GB／T6682規(guī)定的二級水。①鹽酸克倫特羅對照品：含鹽酸克倫特羅不得少于98．5％②鹽酸③無水甲醇④氫氧化鈉⑤磷酸二氫鉀⑥磷酸⑦鹽酸溶液取鹽酸4．2ml，加水至1000ml，即得。⑧o．5mol／L磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀68g，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．O，用水稀釋至1000ml，即得。⑨0．05mol幾磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀6．88，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．0，用水稀釋至1000mi，即

間接凝集反應2011/01/08

將可溶性抗原（或抗體）先吸附于適當大小的顆粒性載體的表面，然后與相應抗體（或抗原）作用，在適宜的電解質(zhì)存在的條件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象，稱間接凝集反應（indirectagglutination）或被動凝集反應（passiveagglutination）。由于這種反應適用于各種抗體和可溶性抗原的檢測，其敏感度高于沉淀反應，因此被廣泛應用于臨床檢驗。根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝載體顆粒集反應的方式，間接凝集反應可分為以下4類1．正向間接凝集反應用抗原致敏載體以檢測標本中的相應抗體。2．反向用

免疫濁度技術基本原理2011/01/08

免疫濁度技術是利用可溶性抗原、抗體在液相中特異結(jié)合，形成一定大小的抗原抗體復合物，使反應液出現(xiàn)濁度。當反應液中保持抗體過剩時，形成的復合物隨抗原量增加而增加，反應液的濁度亦隨之增加，與一系列的標準品對照，即可計算出樣品的含量。免疫濁度分析的光學基礎是反應液中分散粒子對光的反射、折射、散射（衍射）和吸收等。粒子被光照射后而發(fā)光，這一現(xiàn)象主要取決于粒子的大小、入射光波長及粒徑與波長的比例關系等等。當入射光作用于粒子后向各個方向發(fā)射光，甚至可繞過粒子發(fā)射光線，稱散射或衍射光。但光照射到膠體溶液后，粒子

免疫濁度技術與應用2011/01/08

自1897年Kraus發(fā)現(xiàn)沉淀反應以來，直到1946年才由Budin等完善了凝膠內(nèi)定量測定方法（即單向擴散技術）。但由于其操作繁瑣、敏感度低、費時及不能自動化而趨于淘汰。免疫濁度測定是沉淀反應的一種形式，它是在液相中的沉淀反應。這類技術不僅提高了靈敏度和易操作性，而且簡便快速，易于自動化。目前國內(nèi)外已研制開發(fā)出多種免疫濁度測定的自動化分析儀器并已廣泛用于臨床各種體液蛋白質(zhì)、激素和藥物濃度等測定。免疫濁度技術的應用免疫濁度技術早期主要用于血清、尿和腦脊液中蛋白質(zhì)含量的測定。近10年來，隨著現(xiàn)代科學

鹽析法分離與純化蛋白質(zhì)注意2011/01/06

1）鹽的飽和度：鹽的飽和度是影響蛋白質(zhì)鹽析的重要因素，不同蛋白質(zhì)的鹽析要求鹽的飽和度不同。分離幾個混合組分的蛋白質(zhì)時，鹽的飽和度常由稀到濃漸次增加，每出現(xiàn)一種蛋白質(zhì)沉淀進行離心或過濾分離后，再繼續(xù)增加鹽的飽和度，使第二種蛋白質(zhì)沉淀。例如用硫酸銨鹽析分離血漿中的蛋白質(zhì)，飽和度達20%時，纖維蛋白原首先析出；飽和度增至28%～33%時，優(yōu)球蛋白析出；飽和度再增至33%～50%時，擬球蛋白析出；飽和度大于50%以上時，白蛋白析出。用硫酸銨不同飽和度分段鹽析法，從牛胰中酸性提取分離可得到九種以上蛋白質(zhì)及

鹽析法分離與純化蛋白質(zhì)注意的幾個問題2011/01/06

）鹽的飽和度：鹽的飽和度是影響蛋白質(zhì)鹽析的重要因素，不同蛋白質(zhì)的鹽析要求鹽的飽和度不同。分離幾個混合組分的蛋白質(zhì)時，鹽的飽和度常由稀到濃漸次增加，每出現(xiàn)一種蛋白質(zhì)沉淀進行離心或過濾分離后，再繼續(xù)增加鹽的飽和度，使第二種蛋白質(zhì)沉淀。例如用硫酸銨鹽析分離血漿中的蛋白質(zhì)，飽和度達20%時，纖維蛋白原首先析出；飽和度增至28%～33%時，優(yōu)球蛋白析出；飽和度再增至33%～50%時，擬球蛋白析出；飽和度大于50%以上時，白蛋白析出。用硫酸銨不同飽和度分段鹽析法，從牛胰中酸性提取分離可得到九種以上蛋白質(zhì)及酶

《科學》年度進展被疑造假遭撤銷2011/01/06

一篇在2005年被認為是“重要研究突破”（見下）的Science文章5位作者中的4位提出要撤銷此文，原因是其中的數(shù)據(jù)不可重復，但他們也否認有任何不端行為。植物研究豐收:幾個有關植物開花和其它神秘或驚人特征的關鍵的分子線索在2005年被揭示。比如，植物分子生物學家找到了啟動植物季節(jié)性發(fā)育的信號。另一項研究的重點是涉及刺激開花的基因，還有一項研究發(fā)現(xiàn)了令人驚異的隱藏的RNA。這篇主要針對植物啟動開花時mRNA的遷移的研究，是來自瑞典農(nóng)業(yè)科學大學植物科學中心實驗室（Ume?PlantScienceCe

補硒能讓艾茲病病毒“行動緩慢”2011/01/06

zui近美國免疫學家發(fā)現(xiàn)了一種治療艾滋病的新方法，他們利用含硒藥物降低了艾滋病患者血液中艾滋病毒的數(shù)量。在邁阿密大學主導的對比買驗中，每天服用含有濃縮硒酵母膠囊的艾滋病患者在9個月后，血液中硒的濃度增加；30%，體內(nèi)艾滋病毒的數(shù)量也減少了，免疫細胞積極增加。表明；含硒制劑能夠放慢吏滋病毒的繁殖速度。目前科學家們還不能解釋發(fā)生這種變化的原因，而且這種藥物并不是對所有病人都有效，也無法*讓人免受艾滋病毒的侵害。

英國研究顯示常喝碳酸飲料細胞可能受損2011/01/06

英國2007年5月26日公布的一項研究結(jié)果顯示，部分碳酸飲料可能會導致人體細胞嚴重受損。據(jù)悉，喝碳酸飲料造成的這種人體損傷一般都與衰老以及濫用酒精相關，zui終會導致肝硬化和帕金森病等疾病。此次研究的焦點在于苯甲酸鈉的安全性。苯甲酸鈉是苯甲酸的衍生物，天然存在于各種漿果之中，目前被大量用作許多碳酸飲料的防腐劑。破壞人體細胞的“能量工廠”，英國謝菲爾德大學的分子生物學和生物工藝學教授彼得·派珀是研究人體衰老的專家。他的試驗結(jié)果證明，苯甲酸納可以破壞細胞的“能量工廠”——線粒體。他說：“這種化學物質(zhì)

免疫標記技術及其應用2011/01/04

近二十幾年來，免疫學檢測的方法發(fā)展很快，特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術以后，使檢測的敏感性和特異性都大大提高。繼20世紀50年代的免疫熒光（1FA）和60年代的放射免疫（RIA）分析技術之后，在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術。標記免疫技術是將某種可微量測定或超微量測定的物質(zhì)（如放射性核素、熒光素、酶、化學發(fā)光劑等）標記于抗原（抗體）上制成標記物，加入到抗原-抗體的反應體系中與相應的抗體（抗原）反應，以檢測標記物的有無及含量來間接反映樣品中待檢抗原或抗體的存在與多少。

基因芯片技術和DNA測序2011/01/04

基因芯片技術是綜合利用一系列微電子技術，在有限的空間內(nèi)將核酸探針點到固相載體上，或者直接進行探針固相原位合成，將一系列可尋址識別的核酸探針有序集成起來，用于同時進行眾多的顯微核酸雜交反應，可以同時檢測很多種核酸片段?；蛐酒雌渲谱髟砜梢苑譃楹芏囝?，但目前真正成熟的，得以廣泛應用的仍只有使用點樣或原位合成技術的微陣列（microarray）技術?；蛐酒瑱z測的生物學原理和前面所述的核酸探針*相似，所以可以說基因芯片就是高密度的斑點雜交技術。但正因為其高密度，導致了一個量變到質(zhì)變的過程，成為炙手

瘋牛病夾心酶聯(lián)免疫吸附測定方法2011/01/04

本方法（PLAIAELISA）是一種快速、準確性高的瘋牛病篩選方法之一，1999年通過歐盟認證。該方法具有反應時間短、成本低、反應步驟少的特點。瘋牛病夾心ELISA是法國原子能委員會（FrenchAtomicEnergyCommission）研制出來的一種診斷瘋牛病的快速方法，現(xiàn)被美國Bio-Rad公司收購。該方法又稱PLAIA~BSE試驗，它由兩種試劑盒組成，即BSE純化試劑盒和BSE檢測試劑盒。本方法的原理是用BSE純化試劑盒中的試劑和蛋白酶K對牛腦腦干部的朊毒體進行消化、純化、濃縮和溶解。