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2022
04-26

二維梯度PCR與普通PCR儀有什么區(qū)別？
PCR儀是廣泛應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗、檢疫等領(lǐng)域的一款儀器設(shè)備，在實驗室中的應(yīng)用頻率很高，而隨著科技的發(fā)展以及行業(yè)實際工作的需要，二維梯度PCR等開始出現(xiàn)，而用戶在進行了解的時候，往往不知道梯度PCR儀與普通PCR儀的區(qū)別，因此給他們的選擇帶來了一定的困難，因此下面就來簡單介紹一下二維梯度PCR與普通PCR儀有什么區(qū)別？先需要說明的是PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進行溫度控制，而梯度PCR儀的梯度也要做一下介紹，梯度實際上是指PCR時退火溫度條件可以
2022
04-21

帶你全面了解移液器
移液器是實驗室用于取樣和加液常用的精密量器，是量出式量器，分定量和可調(diào)兩種類型。移液器是指一支移液器的容量是固定的，而可調(diào)移液器的容量在其標(biāo)稱容量范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào)。移液器使用時的注意事項(1)吸取液體時要緩慢均勻，避免液體濺到移液桿上。(2)在調(diào)整取液量的旋鈕時，不要用力過猛，并應(yīng)注意計數(shù)器顯示的數(shù)字不要超過其可調(diào)范圍。(3)移液器在取樣加樣過程中，應(yīng)注意吸液嘴不能觸及其他物品，以免被污染。(4)用完后，要將移液器調(diào)至最大量程，以免壓縮彈簧導(dǎo)致彈簧不能恢復(fù)。(5)移液器在使用完畢后應(yīng)卸掉槍頭后放置
2022
04-19

核酸提取儀使用注意事項
核酸提取儀主要由磁套、磁棒、進給板和步進電機四個部分組成；磁套位于磁棒的下方且對齊形成一對互相配合使用，進給板位于磁套的下方；磁套、磁棒和進給板分別連接一個步進電機；磁套和磁棒的步進電機控制磁套和磁棒的上下相對運動，與進給板相接的步進電機控制進給板的左右水平運動。在步進電機的驅(qū)動下，分別進行上下、水平運動以實現(xiàn)磁珠的收集、釋放、轉(zhuǎn)移進而完成核酸的提取過程，轉(zhuǎn)移的是磁珠、而非液體，提高了樣品回收率，另外由于磁套的保護，磁棒并不直接接觸樣品防止了污染的可能發(fā)生。核酸提取儀使用注意事項：1)儀器接地為
2022
04-12

實時熒光定量PCR儀使用的基本步驟
實時熒光定量PCR儀技術(shù)的原理：體外核酸擴增，加熱使雙鏈DNA解開螺旋，在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交，在TaqDNA聚合酶，dNTPs（脫氧核糖核苷三磷酸），Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物，重復(fù)“變性→退火一引物延伸”過程至25-40個循環(huán)，呈指數(shù)級擴大待測樣本中的核酸拷貝數(shù)。簡單的說，PCR儀就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內(nèi)的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù)，可以將一段基因復(fù)制為原來的一百億至一千億倍。實時熒光定量PCR儀
2022
04-06

程序降溫盒使用經(jīng)驗分析
程序降溫盒的使用方法直都搞不明白，覺得是不是應(yīng)該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時間(細胞剛開始還沒凍的時候就是室溫)，然后把細胞放進去，再一起移到-80度，這樣才能實現(xiàn)程序降溫呢?時間使用長了，感覺里面的液體是不是異丙醇啊，使用時間長了會不會揮發(fā)或變質(zhì)什么的，要不要添加或維護一下呢，還有有一只降溫盒因不小心給傾斜讓液體流出了部分，要補充嗎？程序降溫盒使用經(jīng)驗分析：經(jīng)驗1：凍存盒外表面有刻度的吧，異丙醇液面要高于底線。4a.C*D8Y&P9A，y凍存盒肯定是先放在室溫，然后放進去細胞，
2022
03-23

三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?
一次性PCR擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱之為梯度PCR儀。通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增，從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增，這樣既節(jié)約時間，也節(jié)約經(jīng)費。三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?加熱模塊：上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。確保熱準(zhǔn)確性的一種方法就是經(jīng)常使用溫度驗證試劑盒進行檢測，溫度驗證檢測通?？捎糜冢涸诘葴啬Ｊ较孪鄬τ谠O(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性；
2022
03-16

程序降溫盒使用小技巧
程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運用于各種細胞類型，包括干細胞，原代細胞和細胞系。這對于大多數(shù)需要培養(yǎng)的細胞系來說是非常理想的。已經(jīng)通過干細胞，原代細胞和細胞系的使用，證明了提高使用者的工作效率及保存細胞的存活率。通過采用絕緣材料和*的微對流設(shè)計來保證平均降溫速率為-1℃/min，而不是使用酒精或異丙醇等輔助劑。使用便捷，只需插入冷凍管，然后再放在-80℃的環(huán)境中即可。程序降溫盒使用時注意事項：經(jīng)驗1：應(yīng)該不可以把凍存盒放4°的，因
2022
03-10

迷你梯度PCR儀常用的五種分析方法
迷你梯度PCR儀的梯度溫度控制是一項可有助于PCR中引物退火優(yōu)化的功能。梯度設(shè)定的目的是在模塊之間實現(xiàn)變化的溫度，通過每列之間≥2°C的間隔溫度升降，使得可同時對于一系列的溫度進行測試以獲取引物退火溫度。該技術(shù)的一種形式便是設(shè)計帶有三個或更多分割金屬模塊的PCR儀，每一模塊都具有獨立的加熱和冷卻元件。相比于梯度模塊，該模塊設(shè)計可帶來活設(shè)置三種或更多不同溫度的能力，以便使得每個獨立的區(qū)域都能進行更好的溫度控制，特別是在優(yōu)化過程中。獨立金屬模塊的絕熱性阻止了模塊之間的熱交換。這就可實現(xiàn)更為準(zhǔn)確的模塊
2022
03-01

三槽梯度PCR儀科普知識大全，你真不一定都懂
三槽梯度PCR儀溫度的準(zhǔn)確性可能會對PCR的成敗與否起決定性作用，因為PCR的三個主要步驟都依賴于溫度。類似地，加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。因此，所使用的PCR儀能在模塊之間準(zhǔn)確到達設(shè)定的溫度并具有一致性十分關(guān)鍵。確保熱準(zhǔn)確性的一種方法就是經(jīng)常使用溫度驗證試劑盒進行檢測并根據(jù)需要由接受過培訓(xùn)的專業(yè)人士進行重新校準(zhǔn)。溫度驗證檢測通?？捎糜冢涸诘葴啬Ｊ较孪鄬τ谠O(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性；在溫度轉(zhuǎn)換后相對于設(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性；熱蓋溫度的準(zhǔn)確性（可影響模塊
2022
01-21

雙槽梯度PCR儀應(yīng)該這樣使用
雙槽梯度PCR儀的反應(yīng)原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火（復(fù)性）--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至40~60℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板一引物結(jié)合物在
2022
01-17

熒光定量基因擴增儀使用必須遵守下面的基本安全措施
熒光定量基因擴增儀在操作、維護和修理本儀器的所有階段，都必須遵守下面的基本安全措施。如果不遵守這些措施或本說明書其它地方指出的警告，便可能影響到儀器提供的保護。同時，這也會破壞設(shè)計和制造的安全標(biāo)準(zhǔn)以及儀器的預(yù)期使用范圍。a）儀器接地為了避免觸電事故，儀器的輸入電源線必須可靠接地。本儀器使用的是三芯接地插頭，這種插頭帶有一個第3（接地）腳，只能配合接地型電源插座使用，這是一種安全裝置。如果插頭無法插入插座內(nèi)，則應(yīng)請電工安裝正確的插座，不要使接地插頭失去安全作用。b）遠離帶電電路操作人員不得擅自打開
2022
01-11

熒光定量PCR的理論依據(jù)是什么？
熒光定量PCR在反應(yīng)中，引入了一種熒光化學(xué)物質(zhì)，隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化。從而得到一條熒光擴增曲線。熒光擴增曲線包括3個階段：基線期，擴增期和平臺期。只有在熒光信號擴增期，PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，所以可以在這個階段進行定量分析。為了便于對所檢測樣本進行比較，在熒光定量PCR反應(yīng)的指數(shù)期，需要設(shè)定一定熒光信號的閾值，一般這個閾值是以PCR反應(yīng)的前
2022
01-04

二維梯度PCR的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些？
PCR技術(shù)從發(fā)明至今已有二十多年的時間，用于PCR實驗的儀器不斷的推陳出新。然而PCR的基本過程沒有太大變化，包括變性-退火-延伸這三步。這其中包括反應(yīng)條件、使用試劑的量甚至是引物等，很多研究者在進行PCR優(yōu)化時都會考慮退火溫度的優(yōu)化，這時就會進行梯度PCR。而為什么要通過梯度PCR來優(yōu)化以及如何解決梯度PCR優(yōu)化后所不能解決的問題，這些對很多研究者來說可能并不是很清楚，本文中將會對此作一淺析。二維梯度PCR是針對每臺PCR儀如何設(shè)置合適的退火溫度進行摸索。它是以合成引物的退火溫度為參考值，在進
2021
12-27

實時熒光定量PCR儀保養(yǎng)及維護方法
高分辨率溶解（HRM）作為一種聯(lián)管式的PCR后分析技術(shù)，引起了學(xué)術(shù)界的廣泛關(guān)注。HRM基于DNA雙鏈的溶解特性對PCR產(chǎn)物進行分析，與傳統(tǒng)的溶解曲線分析類似，但提高更多的信息，因而具有更廣泛的應(yīng)用?？筛鶕?jù)PCR產(chǎn)物的序列、長度、GC含量或鏈互補性來區(qū)分樣品，其靈敏度可區(qū)分單個堿基的差別?，F(xiàn)在可以通過這種高效、直接的方法檢測、分析未知的甚至復(fù)雜的序列。離心式設(shè)計及其出色的光學(xué)和溫度表現(xiàn)令其得以勝任HRM。實時熒光定量PCR儀保養(yǎng)及維護：1、儀器表面清潔儀器的表面應(yīng)定期用軟布加少量清水擦洗，清洗后將
2021
12-18

雙槽二維梯度PCR儀該如何設(shè)置合適的退火溫度？
雙槽二維梯度PCR儀就是將多個的PCR反應(yīng)放在一起做，不用一次一次的作很多次，溫度梯度PCR可以很快的找出適合的退火溫度，或者說可以在適合的退火溫度下擴增出目的條帶。除具標(biāo)準(zhǔn)PCR儀功能外，其梯度模塊還能同時進行多達12個不同退火溫度的PCR反應(yīng)，在梯度模塊上，可實現(xiàn)對梯度溫度和梯度寬度等參數(shù)的調(diào)整，自由編程12道溫度，梯度實現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時進行熱循環(huán)。僅一次實驗就能確定特定體系相應(yīng)的退火溫度。從而可在短時間內(nèi)對PCR實驗進行優(yōu)化，大大提高PCR科研效率。雙槽二維梯度PCR儀如何設(shè)置合
2021
12-08

手動移液器使用期間注意事項
手動移液器是一種長期使用的工具，廣泛用于各種實驗室。由于每天都要使用數(shù)小時，在選擇時人體工程學(xué)和個人偏好（例如握持舒適性）是非常重要的標(biāo)準(zhǔn)。在尋找適合工作的移液器時，還需要考慮其它因素，如應(yīng)用、實驗室工作流程、所需的量程范圍、樣品的物理特性、滿足要求的準(zhǔn)確度和準(zhǔn)確度。手動移液器使用期間注意事項：1.在取液前所取液體應(yīng)在室溫（15-25℃）平衡；若吸液溫度與室溫有異時將吸頭預(yù)洗多次再用。注意移液溫度不得超過70℃。2.吸頭浸入液體深度要合適，吸液過程盡量保持不變。3.在吸取液體時應(yīng)緩慢勻速吸取，避
2021
12-01

細胞凍存盒的實驗步驟，您都知道嗎？
什么是細胞凍存？細胞長勢良好，供大于求時，就可以考慮把細胞凍存起來，以后再用。當(dāng)溫度低于-70℃時，細胞內(nèi)的酶活性全部停止，代謝活動停止，故可以達到長期保存的目的。隨著溫度降低，細胞內(nèi)外的水分都會結(jié)晶，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞，從而引起細胞死亡，特別是-20-0℃的階段，冰晶呈針狀，及容易引發(fā)細胞損傷。細胞凍存盒的基本原則是緩慢冷凍，實驗證明這樣可以大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出
2021
11-24

自動核酸提取儀中共聚焦掃描頭的作用你知道嗎？
自動核酸提取儀隨機配置軟件，免費升級，可控制儀器運行，提供全過程實時監(jiān)控功能，記錄提取過程數(shù)據(jù)文件，每次運行完自動生成報告，記錄當(dāng)次提取實驗信息，包括樣品信息、試劑信息、純化過程記錄，并具備搜索功能，快速查詢所需要查看的程序或報告；具有獨立編程功能，可根據(jù)不同品牌的試劑盒說明書，進行裂解、清洗、洗脫等實驗步驟的工作時長、混勻幅度、是否加熱等功能的編輯和優(yōu)化；支持樣品二維碼掃描信息錄入及管理，可與其它數(shù)據(jù)庫、樣品庫同步共享，實現(xiàn)樣品編碼信息跟蹤追溯。自動核酸提取儀中共聚焦掃描頭的作用：1.單光子部
2021
11-22

寵物也是需要進行PCR檢測的哦！
冠狀病毒的生存方式，是把自己的遺傳物質(zhì)注入到宿主細胞里之后就開始復(fù)制，利用宿主細胞里的蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)來制作病毒的蛋白質(zhì)外殼，重新組裝成新的若干病毒，裂解宿主細胞并逃出宿主體外，之后繼續(xù)這樣的不斷復(fù)制和傳播。目前造成人類新型肺炎疫情的冠狀病毒（2019-Cov）為β屬，而寵物貓狗的貓冠狀病毒（FCov）和犬冠狀病毒（CCov）為α屬。由于貓狗身上缺少ace2酶，因此感染人的病毒無法進入它們的細胞內(nèi)，根本談不上復(fù)制和傳播。并且，貓犬冠狀病毒不會傳染給人。PCR的意思是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，能夠用來擴增DN
2021
11-20

移液器的選擇上需要考慮哪幾點？
移液器又被人們俗稱為移液槍，包括手動移液器、電動移液器；定量移液器、可調(diào)移液器；單通道移液器、多通道移液器。其結(jié)構(gòu)由容量調(diào)節(jié)器、吸液嘴推卸器、體積顯示窗、活塞、活塞套筒、吸引管連接頭等部分組成。1.移液器的選擇對于使用者而言，選擇一支經(jīng)久耐用且準(zhǔn)確性可靠的移液器，要考慮以下幾點：(1)產(chǎn)品的性能：移液器的準(zhǔn)確度和重復(fù)性必須滿足JJG646-2006《移液器檢定規(guī)程》。(2)產(chǎn)品的材料：移液器的外殼應(yīng)具有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導(dǎo)熱。(3)產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)：所選用的移液器，使用者在操作過程中應(yīng)感

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