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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
包被用抗原2016/08/24
用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動(dòng)物組織、微生物培養(yǎng)物等,須經(jīng)提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶者的血清中提取,一般的細(xì)菌和病毒抗原可以從其培養(yǎng)物中提取,蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中提取等(例如AFP從臍帶血或胎肝中提?。?。重組抗原是抗原基因在質(zhì)粒體中表達(dá)的蛋白質(zhì)抗原,多以大腸桿菌或酵母菌為質(zhì)粒體。重組抗原的優(yōu)點(diǎn)是除工程菌成份外,其他雜質(zhì)少,而且無傳染性,但純化技術(shù)難度較大。以大腸桿菌為質(zhì)粒體的重組抗原如不能充分除大腸
ELISA試劑盒的性能分析2016/08/22
ELISA試劑盒的性能分析ELISA試劑盒的性能分析1.靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于10U/ml。2.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。3.準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。4.貯藏:ELISA試劑盒2-8℃,避光防潮保存。5.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。ELISA試劑盒分類有兩種*:采用雙抗體二步夾心法測(cè)定標(biāo)本中各種動(dòng)物相關(guān)指標(biāo)的水平。第二:采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。
ELISA實(shí)驗(yàn)中血清標(biāo)本的采集及保存方法2016/08/19
ELISA實(shí)驗(yàn)中血清標(biāo)本的采集及保存方法:大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。一般說來,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG聚合,使間接法的試劑本底加深。超過一周測(cè)定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不
植物組織樣本的前處理2016/08/17
一、勻漿介質(zhì)一般采用0.05mol/LTris-HCl,pH7.4磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據(jù)樣本及測(cè)定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。二、組織勻漿的制備1、取組織塊(0.2g~0.5g)zui少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入5ml的勻漿管中。2、按重量(g):體積(ml)=1:4的比例加入4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。3、勻漿的方式:手工勻漿,機(jī)器勻漿。①手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合
氨基酸簡(jiǎn)介2016/08/15
氨基酸(Aminoacid)是構(gòu)成蛋白質(zhì)(protein)的基本單位,賦予蛋白質(zhì)特定的分子結(jié)構(gòu)形態(tài),使它的分子具有生化活性。蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)重要的活性分子,包括催化新陳代謝的酶。兩個(gè)或兩個(gè)以上的氨基酸化學(xué)聚合成肽,一個(gè)蛋白質(zhì)的原始片段,是蛋白質(zhì)生成的前體。氨基酸(aminoacids)廣義上是指既含有一個(gè)堿性氨基又含有一個(gè)酸性羧基的有機(jī)化合物,正如它的名字所說的那樣。但一般的氨基酸,則是指構(gòu)成蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)單位。在生物界中,構(gòu)成天然蛋白質(zhì)的氨基酸具有其特定的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),即其氨基直接連接在α-碳原子上
干細(xì)胞無血清凍存液2016/08/12
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:●soalrbio公司的干細(xì)胞無血清凍存液是一種化學(xué)成分確定、不含動(dòng)物源蛋白的凍存液?!窨梢詮V泛地運(yùn)用于人和動(dòng)物的各類干細(xì)胞的凍存。●批次間十分穩(wěn)定,可以維持干細(xì)胞的多潛能性,不影響干細(xì)胞的增值和分化能力。●細(xì)胞復(fù)蘇率達(dá)90%以上,復(fù)蘇效果優(yōu)于有血清凍存液?!駸o需程序降溫,可直接放置-80℃凍存。產(chǎn)品包裝和規(guī)格:50ml運(yùn)輸與儲(chǔ)存:冰袋運(yùn)輸,2-8℃保存,保質(zhì)期2年。使用說明:1.細(xì)胞消化和計(jì)數(shù),用胰酶對(duì)待凍存的細(xì)胞進(jìn)行消化,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。2.1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘(4℃),
洗板時(shí)應(yīng)注意以下問題2016/08/10
洗板目的在于將特異性結(jié)合于固相上的抗原(抗體)與溫育過程中吸附的非特異性成份分離,使免疫復(fù)合物與待測(cè)抗體(抗原)呈一定比例,洗板是否合格直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。洗板應(yīng)嚴(yán)格按照說明控制洗板時(shí)間及洗板次數(shù),ELISA檢測(cè)一般用洗滌液洗板3次,洗滌液應(yīng)嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行稀釋,洗液應(yīng)注滿每個(gè)微孔并注意洗液不外溢,垂直甩板避免交叉污染,防止出現(xiàn)假陰性及假陽性結(jié)果。使用洗板機(jī)洗板可一定程度上避免環(huán)境污染、提高工作效率,洗滌開始時(shí)注意觀察每根吸液針是否一直插入孔底并吸干孔內(nèi)全部液體,嚴(yán)格按照要求設(shè)置一定的
寄生菌吸器產(chǎn)生效應(yīng)子并轉(zhuǎn)運(yùn)到寄主細(xì)胞中2016/08/08
目前的很多研究證明吸器是活體營(yíng)養(yǎng)真菌和卵菌效應(yīng)子產(chǎn)生的主要場(chǎng)所,并起著將效應(yīng)子轉(zhuǎn)運(yùn)到寄主植物中的作用。目前,已經(jīng)從M.lini鑒定出30余個(gè)無毒基因,從P.graminis、P.striiformis和P.triticina中鑒定出近50個(gè)無毒基因。通過基因組學(xué)研究和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究,已經(jīng)從吸器中獲得了大量的(500–1500個(gè))候選效應(yīng)蛋白。本課題組從P.triticina的吸器產(chǎn)生階段篩選到300余個(gè)候選效應(yīng)蛋白,經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn),這些效應(yīng)蛋白不具有保守的氨基酸保守結(jié)構(gòu),多態(tài)性非常強(qiáng)。杜冬冬對(duì)2個(gè)不
細(xì)胞制備流程及轉(zhuǎn)化方法2016/08/05
細(xì)胞制備流程及轉(zhuǎn)化方法1.轉(zhuǎn)移0.2-1ml培養(yǎng)物至裝有500mlLB(或其他營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基)的1-2升搖瓶2.37°C下劇烈振蕩培養(yǎng)2-6小時(shí)3.定時(shí)監(jiān)控OD600值(培養(yǎng)1小時(shí)后每半小時(shí)測(cè)定一次)4。當(dāng)OD600值達(dá)到0.5-1.0時(shí),從搖床中取出搖瓶,置于冰上冷卻至少15分鐘(需要的話這種方式可以存放培養(yǎng)液數(shù)小時(shí))5.細(xì)胞在4°C5000g下離心15分鐘,棄上清液(如需要,沉淀可在4°C的10%甘油中保存一兩天)6.用滅菌的冰水重懸浮細(xì)胞。先用渦旋儀或吸液管重懸浮細(xì)胞于少量體積中(幾毫升
實(shí)驗(yàn)室常見受傷之應(yīng)急處理2016/08/01
實(shí)驗(yàn)室常見受傷之應(yīng)急處理:1.創(chuàng)傷:傷處不能用手撫摸,也不能用水洗滌。若是玻璃創(chuàng)傷,應(yīng)先把碎玻璃從傷處挑出。輕傷可涂以龍膽紫藥水(或紅汞、碘酒),必要時(shí)撒些消炎粉或敷些消炎膏,用繃帶包扎。2.燙傷:不要用冷水洗滌傷處。傷處皮膚未破時(shí),可涂擦飽和碳酸氫鈉溶液或用碳酸氫鈉粉調(diào)成糊狀敷于傷處,也可抹獾油或燙傷膏;如果傷處皮膚已破,可涂些紫藥水或1%高錳酸鉀溶液。3.眼睛灼傷或掉進(jìn)異物:應(yīng)立即用大量清水沖洗15分鐘,不可用稀酸或者稀堿。若有玻璃碎片入眼,不可自取,不可轉(zhuǎn)動(dòng)眼球??扇纹淞鳒I,如無效則用紗布
分子生物學(xué)2016/07/29
生物學(xué)的研究可以說長(zhǎng)期以來都是科研的重點(diǎn),惟其所涉及的方方面面與人類生活緊密相連。本世紀(jì)5O年代以前的生物學(xué)研究,雖然有些已進(jìn)人了微觀領(lǐng)域,但總的來說,主要是研究生物個(gè)體組織、器官、細(xì)胞或是亞細(xì)胞器這些東西之間的相互關(guān)系。50年代中期,隨著沃森和克里克揭示出DNA分子的空間結(jié)構(gòu),生物學(xué)才真正開始了其揭開分子水平生命秘密的研究歷程。到70年代,重組DNA技術(shù)的發(fā)展又給人們提供了研究DNA的強(qiáng)有力的手段,于是分子生物學(xué)就逐漸形成了。顧名思義,分子生物學(xué)就是研究生物大分子之間相互關(guān)系和作用的一門學(xué)科,
細(xì)胞復(fù)蘇的具體操作2016/07/25
細(xì)胞復(fù)蘇的具體操作:一.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。二.取出凍存管:1.根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。2.從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。三.迅速解凍:1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。四.
單孔三通道法行單孔腹腔鏡下輸卵管切除術(shù)初探2016/07/20
初步探討采用單孔三通道法行單孔腹腔鏡下輸卵管切除術(shù)的可行性與安全性。方法回顧性分析2015年8月~2015年10月陜西省西安市閻良區(qū)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科采用單孔三通道法聯(lián)合常規(guī)腹腔鏡手術(shù)器械行單孔腹腔鏡輸卵管切除手術(shù)的2例異位患者的臨床資料。其中1例患者行左側(cè)輸卵管切除術(shù)+盆腔粘連松解術(shù),1例行右側(cè)輸卵管切除術(shù)+盆腔粘連松解術(shù)。經(jīng)臍孔上緣行半環(huán)形切口長(zhǎng)約50px,采用單孔三通道法進(jìn)行穿刺,置入腹腔鏡和操作鉗實(shí)施手術(shù)。結(jié)果本組2例手術(shù)均獲得成功,術(shù)中未增加其它通道,無中轉(zhuǎn)開腹。2例患者手術(shù)時(shí)間20~30
多抗的制備方法2016/07/08
一、器材剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術(shù)鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科手術(shù)剪(剪血管用)一把,手術(shù)刀架,手術(shù)刀片,注射器(1ml、10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑450px)、彎頭止血鉗四把,直頭止血鉗兩把,手術(shù)縫合線,塑料放血管,紗布等。二、兔子的選擇兔子的重量應(yīng)在四斤以上,兩耳光滑,明顯可見耳靜、動(dòng)脈,健康。三、免疫用生理鹽水稀釋免疫原,然后與相應(yīng)的佐劑進(jìn)行1:1混合。抗原和佐劑*混合形成穩(wěn)定的乳劑,將該乳劑在兔子雙肩周圍的皮膚下進(jìn)行皮下注射
IL-2對(duì)T細(xì)胞的作用2016/07/06
IL-2是T細(xì)胞生長(zhǎng)因子,能使T細(xì)胞在試管內(nèi)長(zhǎng)期存活,刺激T細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞分裂周期。IL-2能增強(qiáng)T細(xì)胞的殺傷活性,在體外它與IL-4、IL-5和IL-6一起共同誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T細(xì)胞(Tc)的產(chǎn)生,并使其活性大大增強(qiáng),延長(zhǎng)其生長(zhǎng)期;在體內(nèi)IL-2也能增強(qiáng)抗原誘導(dǎo)的TC活性,甚至可以輔助抗原和半抗原直接在祼鼠體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生TC¬。由IL-2誘導(dǎo)產(chǎn)生的TC輸入體內(nèi)后可產(chǎn)生明顯抗腫瘤作用,但TC在體內(nèi)不易存活,如同時(shí)再輸入少量IL-2,則可明顯延長(zhǎng)Tc在體內(nèi)的存活時(shí)間,并增強(qiáng)其抗腫瘤效果。IL-2并
植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用前景2016/06/27
1.快速繁殖某些稀有植物或有較大經(jīng)濟(jì)價(jià)值的植物依靠自然條件在較短時(shí)間內(nèi)繁殖稀有植物和經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的植物,受到地理環(huán)境和季節(jié)的限制,很難達(dá)到快速、的目的;特別對(duì)于在短時(shí)期內(nèi)需要達(dá)到一定數(shù)量,才能創(chuàng)造應(yīng)有價(jià)值的植物,時(shí)間就是效益,只有通過組織培養(yǎng)的方法才能滿足這一要求。用植物組織培養(yǎng)法繁殖植物,這是組織培養(yǎng)應(yīng)用于的主要的和成效zui大的實(shí)例。首先是在蘭花上的成功應(yīng)用。自Morel在1960年得到蘭花組織培養(yǎng)苗后,很快應(yīng)用于,形成了組織培養(yǎng)法繁殖蘭花工業(yè)。由于組織培養(yǎng)法繁殖植物的明顯特點(diǎn)是快速,每年可
藥理保健的作用2016/06/08
蛻皮激素作用于人體有促進(jìn)膠元蛋白合成、抗心律不齊、抗疲勞;促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、激細(xì)胞分裂,排除體內(nèi)的膽固醇;降血脂,抑制血糖上升;通經(jīng)活絡(luò),除濕鎮(zhèn)痛,等生理活性。是天然的抗癌制劑。露水草蛻皮激素自1976年問世以來,已研制不定期片劑、針劑、膏劑。民間用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,治療不同癥狀的風(fēng)濕及關(guān)節(jié)炎患者有較好療效其有效成份20-羥基蛻皮甾酮經(jīng)臨床研究證明具有直接降血糖作用,對(duì)II型糖尿病總有效率84%,對(duì)改善糖尿病患者“三多一少”癥狀尤為明顯。elias試劑盒在運(yùn)動(dòng)保健品方面,蛻皮激素具有顯著的通過增加氨基
慢性胃炎治療(2016/06/06
1、胃粘膜保護(hù)藥胃粘膜保護(hù)藥其主要作用是增強(qiáng)胃粘膜屏障功能,增強(qiáng)胃粘膜抵抗損害因素的能力。對(duì)于有反酸、胃灼熱、胃痛癥狀及胃鏡提示有粘膜糜爛出血者,可給予粘膜保護(hù)劑。(1)硫糖鋁含有8個(gè)硫酸根的蔗糖硫酸酯鋁鹽在酸性環(huán)境下,可解離出硫酸蔗糖復(fù)合離子,復(fù)合離子聚合成不溶性的帶負(fù)電荷的膠體,能與潰瘍或炎癥處帶正電荷的蛋白質(zhì)滲出物相結(jié)合,形成一層保護(hù)膜,覆蓋于病灶表面,阻止胃酸、胃蛋白酶等損害因素進(jìn)一步侵襲,促進(jìn)破損粘膜的愈合;硫糖鋁還具有吸附胃蛋白酶、中和胃酸、膽汁酸的作用,并能促進(jìn)內(nèi)源性前列腺素E的合
鈣磷在體內(nèi)對(duì)骨的生長(zhǎng)有2016/06/02
1.孩子的成長(zhǎng)與很多因素有關(guān),鈣當(dāng)然是密切相關(guān)的重要因素,但不需要鋪天蓋地、狂轟爛炸盲目進(jìn)補(bǔ),這樣盲目補(bǔ)鈣,可能反而害了孩子,而且鈣的吸收與很多因素相關(guān),比如微量元素磷,他們之間互相影響且互相牽制。2.鈣磷主要在小腸內(nèi)被吸收。鈣的吸收與很多因素相關(guān),比如維生素D、甲狀旁腺素、降鈣素、生長(zhǎng)激素、性激素、利尿劑以及酸性環(huán)境均有利于鈣的吸收,而腎上腺皮質(zhì)激素、甲狀腺素、堿性環(huán)境、磷酸鹽則不利于鈣的吸收;磷的吸收也與一些因素有關(guān),維生素D、甲狀旁腺素、甲狀腺素、酸性環(huán)境也有利于磷的吸收,而腎上腺皮質(zhì)激素
典型麻疹分類2016/05/30
1、潛伏期一般為10~14天,亦有短至1周左右。在潛伏期內(nèi)可有輕度體溫上升。2、前驅(qū)期也稱發(fā)疹前期,一般為3~4天。這一期的主要表現(xiàn)類似上呼吸道感染癥狀:①發(fā)熱,見于所有例,多為中度以上發(fā)熱;②咳嗽、流涕、流淚、咽部充血等卡他癥狀,以眼癥狀突出,結(jié)膜發(fā)炎、眼瞼水腫、眼淚增多、畏光、下眼瞼邊緣有一條明顯充血橫線(Stimson線),對(duì)診斷麻疹極有幫助。③Koplik斑,在發(fā)疹前24~48小時(shí)出現(xiàn),為直徑約1.0mm灰白色小點(diǎn),外有紅色暈圈,開始僅見于對(duì)著下臼齒的頰粘膜上,但在一天內(nèi)很快增多,可累及
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