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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
細(xì)胞培養(yǎng)基的慨念和原理2016/04/06
細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同,英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時(shí),傾向性地稱(chēng)為培養(yǎng)基,而將粉劑配成液體后,多稱(chēng)為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常常補(bǔ)加血清、抗生素等成分。培養(yǎng)基主要包括天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基等。天然細(xì)胞培養(yǎng)基是人們?cè)缙诓捎玫募?xì)胞培養(yǎng)基,直接取自于動(dòng)物組織提取液或體液,如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,但成分復(fù)雜,差異大、不穩(wěn)定,來(lái)源也受到限制。水解乳蛋白和膠原是
檢測(cè)細(xì)胞凋亡2016/04/01
AnnexinV是檢測(cè)細(xì)胞凋亡的靈敏指標(biāo)之一。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸(PS)由質(zhì)膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè),而AnnexinV與PS有高度的親和力,可以與暴露在細(xì)胞外側(cè)的PS結(jié)合。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),PS的外翻要早于細(xì)胞核的改變,因此與DNA碎片檢測(cè)比較,使用AnnexinV可以更早的檢測(cè)到細(xì)胞的凋亡。但是細(xì)胞死亡時(shí)也會(huì)發(fā)生PS的外翻,所以AnnexinV常與鑒定細(xì)胞死活的核酸染料PI結(jié)合使用來(lái)區(qū)分凋亡細(xì)胞(AnnexinV+/PI-)和死亡細(xì)胞(AnnexinV+/PI+)。操作步驟:1.
我司簡(jiǎn)介活體動(dòng)物基礎(chǔ)原理與應(yīng)用簡(jiǎn)介2016/03/30
活體動(dòng)物體內(nèi)成像技術(shù)是指應(yīng)用影像學(xué)方法,對(duì)活體狀態(tài)下的生物過(guò)程進(jìn)行組織、細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究的技術(shù)。活體動(dòng)物體內(nèi)成像技術(shù)主要分為可見(jiàn)光成像(opticalimaging)、核素成像(radio-nuclearimaging)、核磁共振(magneticresonanceimaging,MRI)成像和超聲(ultrasound)成像、計(jì)算機(jī)斷層攝影(computedtomography,CT)成像五大類(lèi),其中可見(jiàn)光成像和核素成像特別適合研究分子、代謝和生理學(xué)事件,通常稱(chēng)為功能成像;超聲成
小鼠二?;视停―AG/DG)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)2016/03/28
實(shí)驗(yàn)原理用純化的DAG抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的DAG抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的DAG呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)2、標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)
小鼠腫瘤浸潤(rùn)檢驗(yàn)方法2016/03/24
全過(guò)程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在20±2℃的條件下進(jìn)行。1.首先制備組織單細(xì)胞懸液,制備方法詳見(jiàn)“組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)”。2.取一支15ml離心管,加入與組織單細(xì)胞懸液等量的分離液(注:分離液zui少不得少于3ml)。3.用吸管小心吸取組織單細(xì)胞懸液加于分離液液面上,400-500g,離心20-30min。(注:根據(jù)組織單細(xì)胞懸液量確定離心條件,組織單細(xì)胞懸液量越大,離心力越大,離心時(shí)間越長(zhǎng),具體離心條件需客戶(hù)自行摸索,以達(dá)到分離效果)。4.離心后,此時(shí)離心管中由上至下分為四層。*層為稀釋液層
人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒的說(shuō)明2016/03/21
人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒,專(zhuān)注于ELISA相關(guān)產(chǎn)品的和,力求將ELISA技術(shù)的加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過(guò)程的科學(xué),有機(jī)、系統(tǒng)地結(jié)合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,實(shí)現(xiàn)ELISA技術(shù)的自動(dòng)化操作。人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:ELISA試劑盒規(guī)格:(1)96T可用做84個(gè)標(biāo)本,12個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);(2)48T可用做42個(gè)標(biāo)本,6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);ELISA試劑盒組成:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)
毛細(xì)管柱應(yīng)用范圍及老化溫度2016/03/16
PB-1型非極性柱(鍵合,聚二甲基硅氧烷)ELISA試劑盒對(duì)照品牌:HP-1,DB-1,BP-1,CP-SIL5CB,UItra-1,007-1,RTx-1,AT-1類(lèi)似固定相:SE-30,SP-2100,OV-1,OV-101使用溫度:-60℃-320℃應(yīng)用范圍:烷烴,芳烴,多環(huán)芳烴,醇,酚,酮,酯,醛,胺,鹵代烴,吡啶,糖衍生物,氨基酸衍生物,維生素衍生物,鎮(zhèn)痛藥,農(nóng)藥,溶劑,膽固醇,香料,咖啡,食品添加劑等二、SPB-5型弱極性柱(鍵合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)對(duì)照品牌:HP-5,D
踝關(guān)節(jié)骨折及脫位的手術(shù)治療2016/03/14
目的總結(jié)踝關(guān)節(jié)骨折及脫位切開(kāi)復(fù)位內(nèi)固定方法和效果。方法對(duì)采用手術(shù)治療76例踝關(guān)節(jié)骨折及脫位的臨床資料進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果3例術(shù)后發(fā)生傷口淺表感染,經(jīng)加強(qiáng)抗炎后*,其它傷口均Ⅰ期愈合。ELISA試劑盒隨訪(fǎng)1~3a,患者骨折愈合時(shí)間為12~18周。按BairdJackson踝關(guān)節(jié)功能評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):本組優(yōu)44例,良26例,可5例,差1例,優(yōu)良率為92.1%。結(jié)論手法恢復(fù)踝關(guān)節(jié)力線(xiàn),及時(shí)手術(shù)治療踝關(guān)節(jié)骨折及脫位可取得滿(mǎn)意的臨床療效。【關(guān)鍵詞】踝關(guān)節(jié)骨折;脫位;手術(shù)治療踝關(guān)節(jié)骨折為關(guān)節(jié)內(nèi)骨折,好發(fā)于青壯年。
懷孕期謹(jǐn)防5種疾病2016/03/11
據(jù)香港媒體報(bào)道,3月20日曬出大肚照,并自曝已經(jīng)懷孕。26日晚,她又曬出一張吊鹽水的照片,透露自己病了:“你們好嗎?我這兩天身體不太好、吃了不新鮮的東西、上吐下瀉……持續(xù)臥床中!太好動(dòng)閑不下來(lái)的我,現(xiàn)在很乖,鋼鐵V暫時(shí)飛不起來(lái),聽(tīng)說(shuō)zui近流行腸胃型病毒!ELISA試劑盒準(zhǔn)媽媽孕期小心5種疾病看到孕期如此辛苦,網(wǎng)友們大呼心痛。其實(shí)準(zhǔn)媽媽在孕期zui怕生病,感冒、水腫、過(guò)敏等時(shí)時(shí)困擾她們。因此,準(zhǔn)媽媽需要掌握充足的知識(shí),保護(hù)身體,并且阻擋所有可能傷害小寶寶的外界危險(xiǎn)因子。育兒專(zhuān)家提醒各位準(zhǔn)媽媽?zhuān)?
良好的心態(tài)是發(fā)生“奇跡”的共性2016/03/07
數(shù)據(jù)顯示,十年來(lái)我國(guó)癌癥的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。癌癥的兇殘,讓人們尤為關(guān)注五花八門(mén)的防治方法。其中,有的半對(duì)半錯(cuò),有的純屬謠言。ELISA試劑盒傳言一:基因好的人不易得癌癥。有些人一輩子抽煙酗酒,大吃大喝不得癌。有些人家里有遺傳史,不抽煙不喝酒也患癌了。真相:遺傳因素的確是目前zui為確切的癌癥危險(xiǎn)因素之一,但每種癌癥的遺傳特質(zhì)不同,遺傳傾向有所差異。我們體內(nèi)有一種原癌基因,是細(xì)胞的正?;颍?dāng)原癌基因發(fā)生結(jié)構(gòu)改變或過(guò)度表達(dá)時(shí),才有可能導(dǎo)致細(xì)胞癌變。抽煙、空氣污染、電離輻射、肥胖等因素可能導(dǎo)致某些基
好的花草茶才能喝出健康美麗2016/03/04
zui近,一款名為“食中和”的花草茶產(chǎn)品在京東商場(chǎng)受到了愛(ài)士們的追棒,一些朋友經(jīng)常有這樣的疑問(wèn),這么多花草茶,看起來(lái)都不錯(cuò),但是應(yīng)該怎么選擇,怎么搭配呢?如何選擇到合適自己的花草茶?ELISA試劑盒石文元出身中醫(yī)藥世家,中醫(yī)大學(xué)畢業(yè)后一手創(chuàng)辦了大石藥業(yè),產(chǎn)品歐洲,并先后通過(guò)了德國(guó)PIC/SGMP認(rèn)證、韓國(guó)KGMP認(rèn)證、中國(guó)藥品GMP認(rèn)證和美國(guó)CGMP認(rèn)證,是中國(guó)*一家通過(guò)四國(guó)認(rèn)證的中藥制藥企業(yè)。石文元在業(yè)界富有盛名,曾為前國(guó)家總理*等領(lǐng)導(dǎo)介紹講解,平時(shí)他也為許多身邊的朋友介紹花草茶美容的功效,被
透析袋使用前的處理與方法2016/03/02
透析袋使用前處理:1.把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度(10-20cm)的小段。2.在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA(pH8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。3.用蒸餾水*清洗透析袋。ELISA試劑盒4.放在1mmol/LEDTA(pH8.0)中將之煮沸10分鐘。5.冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋是必須戴手套。6.用前在透析袋內(nèi)裝滿(mǎn)水然后排出,將之清洗干凈。透析袋中文名稱(chēng):透析袋英文名稱(chēng):dialysisbag。透析只需要使用的半透膜即可完成。通常
革蘭氏染色液染色法2016/02/29
革蘭氏染色液染色法是細(xì)菌學(xué)中zui廣泛使用的一種鑒別染色法。1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立。方法是先將細(xì)菌用結(jié)晶紫染色,加媒染劑(增加染料和細(xì)胞的親和力)后,用脫色劑(酒精或丙酮)脫色,再用復(fù)染劑染色。如果細(xì)菌不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽(yáng)性菌(G+);如被脫色,而染上復(fù)染液的顏色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細(xì)胞壁的細(xì)菌分為兩大類(lèi):革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌。單染色法:只能觀(guān)察微生物的大小、形狀、和細(xì)胞排列狀況,但不能鑒別微生物以及它的特殊構(gòu)造等。復(fù)染色法:用兩種或兩種以上染色
ELISA試劑盒的相關(guān)測(cè)定方法2016/02/26
Elisa試劑盒測(cè)定生物體內(nèi)各種微量有機(jī)物的方法大致可分為物理、化學(xué)、免疫學(xué)三類(lèi)。在物理學(xué)分析方法中,主要借助于高精度的儀器設(shè)備,如紫外分光光度計(jì)、質(zhì)譜儀、氣相色譜儀和高壓液相色譜儀等。應(yīng)用這些儀器設(shè)備,雖然可以檢出體內(nèi)較微量的有機(jī)物(可檢出范圍在10-6mol/L~10-12mol/L間),但因操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí),而且檢測(cè)成本較高,因此不利于在中推廣應(yīng)用。Elisa試劑盒化學(xué)方法主要根據(jù)待測(cè)物與其他物質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)、產(chǎn)生顏色變化來(lái)進(jìn)行。該方法是zui早用于定量測(cè)定生物體內(nèi)微量有機(jī)物質(zhì)的基本方法。但因
沙門(mén)氏菌治療腫瘤2016/02/24
一項(xiàng)在小鼠中的新的研究報(bào)告說(shuō),用沙門(mén)氏菌治療腫瘤可誘發(fā)一種能夠有效殺滅癌細(xì)胞的免疫反應(yīng)。他們對(duì)患癌的小鼠進(jìn)行了沙門(mén)氏菌的治療并觀(guān)察到,正如在實(shí)驗(yàn)室的分離細(xì)胞中所觀(guān)察到的,這些腫瘤肽可通過(guò)間隙連接而進(jìn)入到免疫細(xì)胞之中,它們?cè)谀抢锉谎b載到了細(xì)胞的表面。這些新被激活的免疫細(xì)胞突然能夠識(shí)別并殺滅在小鼠中的腫瘤細(xì)胞。令人感興趣的是,這種方法還保護(hù)小鼠不會(huì)發(fā)生癌癥擴(kuò)散到身體的其它部位,而這正是一種“疫苗接種”形式的預(yù)防性策略。該發(fā)現(xiàn)可幫助科學(xué)家們創(chuàng)制可注射到病人體內(nèi)的殺滅腫瘤的免疫細(xì)胞,或其能證明對(duì)一種潛在
純化的RNA的點(diǎn)雜交和狹線(xiàn)雜交2016/02/22
1)純化的RNA的點(diǎn)雜交和狹線(xiàn)雜交安裝印跡裝置1.切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標(biāo)上表示方向的記號(hào)。用水把膜簡(jiǎn)單弄濕,在20×SSC中室溫泡1h。ELISA試劑盒2.在膜浸泡期間,先用0.1mol/LNaOH小心清洗印跡裝置,再用無(wú)菌水洗干凈。3.把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕,再放到真空器頂部。4.把樣品槽插入裝置的上部,把濕尼龍膜放在樣品槽加樣孔的底部,用吸管在膜的表面滾動(dòng)以去除膜與裝置夾層中的氣泡。5.加緊夾板,連接真空管。6.加入10×SSC直至液面沒(méi)過(guò)尼龍膜,關(guān)掉真空,再用10
基因工程菌株的培養(yǎng)2016/02/19
[實(shí)驗(yàn)原理]大腸桿菌是含有長(zhǎng)約3000Kb的環(huán)狀染色體的棒狀細(xì)菌,它能在僅含碳水化合物(如葡萄糖,提供碳源和能量)和提供氮、磷、微量元素的無(wú)機(jī)鹽的極限培養(yǎng)基上快速生長(zhǎng)。如果用含氨基酸、核苷酸前體、維生素以及其它一些細(xì)菌不能合成的代謝成分的豐富培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng),那么大腸桿菌會(huì)生長(zhǎng)的更快。大多數(shù)應(yīng)用于DNA重組技術(shù)的細(xì)菌是大腸桿菌K-12株的衍生菌株。當(dāng)大腸桿菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí),其開(kāi)始裂殖前,先進(jìn)入一個(gè)生長(zhǎng)滯后期。在豐富培養(yǎng)基中,它能在20-30min內(nèi)復(fù)制一代,這種指數(shù)生長(zhǎng)相稱(chēng)之為對(duì)數(shù)期。zui后
平推式切片機(jī)石蠟切片法2016/02/17
組織經(jīng)石蠟包埋后制成的蠟塊,用切片機(jī)制成切片的過(guò)程為石蠟切片法。石蠟切片法現(xiàn)使用的切片機(jī)有平推式切片機(jī)、輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)兩種。ELISA試劑盒一、平推式切片機(jī)石蠟切片法1.切片前的準(zhǔn)備:清洗過(guò)的載物片(或免清洗的),毛筆,鉛筆,小竹片,水槽,霧化器,攤片器,切片刀,刀架。2.切片制作步驟:刀架的粗削部放在頭端,在切片機(jī)刀架部夾緊。組織蠟塊裝在切片機(jī)蠟塊固定器上夾緊。右手握切片機(jī)刀頭運(yùn)動(dòng)手柄,左手轉(zhuǎn)動(dòng)切片機(jī)蠟塊運(yùn)動(dòng)旋鈕。先轉(zhuǎn)動(dòng)此鈕,后平拉刀架運(yùn)動(dòng)手柄,進(jìn)行粗削,直至組織切全。停止,將刀架移到細(xì)削部,輕
蛋白質(zhì)的相互作用2016/02/15
1.注意要點(diǎn)(1)探針蛋白的本質(zhì)與相互作用蛋白的來(lái)源:探針蛋白的本質(zhì):是全長(zhǎng)蛋白、相互作用相關(guān)的結(jié)構(gòu)域,甚至是化學(xué)合成的較小的生物活性片段。相互作用蛋白的來(lái)源:已知內(nèi)源性表達(dá)探針蛋白的細(xì)胞系是尋找與其相互作用蛋白的理想實(shí)驗(yàn)材料。(2)細(xì)胞裂解物的制備:成功制備細(xì)胞粗提物的關(guān)鍵因素包括:細(xì)胞的裂解方式;pH的控制;溫度;避免蛋白的降解。這些都需要在預(yù)實(shí)驗(yàn)中多次重復(fù)來(lái)優(yōu)化細(xì)胞裂解條件。提取重組蛋白有時(shí)不必破碎細(xì)胞。例如,許多高表達(dá)的哺乳細(xì)胞系(尤其是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,CHO細(xì)胞)和酵母細(xì)胞株(如Pi
檢測(cè)雜交的蛋白2016/02/03
(一)檢測(cè)雜交的蛋白這項(xiàng)試驗(yàn)zui后的步驟是檢測(cè)能夠特異性地和已經(jīng)固定在膜上的樣品蛋白發(fā)生相互作用的探針蛋白。為了得到的結(jié)果,我們應(yīng)該盡可能的取得信/噪比zui大的結(jié)果,也就是說(shuō),我們需要在得到盡可能強(qiáng)的結(jié)果的同時(shí)盡可能避免背景的產(chǎn)生。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn),非特異性背景結(jié)果的顯現(xiàn)和曝光時(shí)間是成線(xiàn)型關(guān)系的。ELISA試劑盒具體步驟:1.將印跡有蛋白的硝酸纖維素膜加上增強(qiáng)化學(xué)熒光顯影劑,孵育60s。2.將過(guò)量的增強(qiáng)化學(xué)熒光顯影劑從膜上吸去,并將硝酸纖維素膜鋪放于清潔塑料膜上(比如保鮮膜)。3.將塑料膜平整
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