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上海恒遠生物科技有限公司
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抗體發(fā)展與分類2020/03/25
單克隆抗體的發(fā)展經(jīng)歷了四個階段,分別為:鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體。鼠源性單克隆抗體:鼠雜交瘤單克隆抗體主要是將來源于免疫接種過的小鼠的B細胞與骨髓瘤細胞融合,繼而篩選出既能無限增殖又能分泌抗體的鼠雜交融合細胞,進而進行篩選、抗體制備和抗體純化。嵌合性單克隆抗體:指用人的恒定區(qū)取代小鼠的恒定區(qū),保留鼠單抗的可變區(qū)序列,形成一個人-鼠雜合的抗體。其研制程序快,可大幅度降低異源抗體的免疫原性,卻幾乎保持親本鼠單抗全部的特異性和親和力。另外,它還具有人抗體的
ELISA試劑盒HIV抗體檢測操作要點2020/03/23
ELISA試劑盒HIV抗體檢測操作要點ELISA試劑盒HIV抗體檢測是發(fā)現(xiàn)HIV感染的有效途徑,ELISA法是艾滋病初篩試驗室檢測HIV抗體普遍使用的方法之一。具體操作過程中ELISA法的影響因素較多,稍有不慎就會降低實驗的準確性。避免諸多影響因素、保證結(jié)果準確性,才能夠充分發(fā)揮ELISA法的優(yōu)點,經(jīng)過多次實驗的總結(jié)和分析,這篇文章分享了相關(guān)的經(jīng)驗。1試劑的選擇通常所使用的ELISA試劑盒或其它試劑,必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準、批檢合格、臨床評估質(zhì)量優(yōu)良,并且均在有效期內(nèi)使用。不同批
ELISA試劑盒液體類標(biāo)本的各種處理方法2020/03/16
ELISA試劑盒在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本ELISA試劑盒,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。ELISA試劑盒液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求
必看ELISA試劑盒實驗小知識—顯色問題2020/03/12
Elisa試劑盒實驗中顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯se情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間,及時判斷。OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長反應(yīng)時間,可使本
ELISA試劑盒實驗各孔的加樣方法2020/03/12
ELISA試劑盒實驗標(biāo)準品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準品孔10孔,在*、第二孔平分別加標(biāo)準品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,ELISA試劑盒再在第五、第六孔平分別加標(biāo)準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔平分別加標(biāo)準
ELISA試劑盒顯色和比色的方法有什么不同2020/03/03
ELISA試劑盒顯色和比色的方法(1)顯色顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯se情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間,及時判斷。OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加
生物實驗室常見故障的處理方法!2020/02/25
任何實驗都有失敗的可能,而在實驗中常會遇見一些小麻煩,如出現(xiàn)故障、實驗儀器的特殊污垢處理等。不論是化學(xué)實驗,還是生物實驗,安全是非常重要的,那么實驗中出現(xiàn)故障怎么辦?在今天的技術(shù)資料中,恒遠為大家說說實驗室常見故障的處理方法。一、螺旋瓶蓋太過緊固不易打開其實在生活當(dāng)中就經(jīng)常能夠遇到瓶子的蓋子太緊了,打不開,那么這種事情在實驗中出現(xiàn)了該怎么辦呢?其實這個也是常有的事情,總不能來強行的吧?當(dāng)螺旋瓶蓋擰不開時,可用電吹風(fēng)或小火焰烘烤瓶蓋周圍,使其受熱膨脹,再用于布包住瓶蓋用力將其旋開。如果瓶內(nèi)裝有不宜
您知道ELISA試劑盒都可以檢測血清嗎?2020/02/20
我們公司在銷售elisa試劑盒時,都會與客戶溝通清楚,提供檢測方法與說明,務(wù)必了解客戶想要檢測的標(biāo)本,確定可以檢測。而目前不少試劑盒廠家只顧賣產(chǎn)品,不想實驗效果,聲稱各種標(biāo)本都能檢測。只要是ELISA試劑盒就可以檢測血清?這種說法合理嗎?據(jù)我們了解,有些試劑盒對血清和血漿樣本的檢測效果不好,表現(xiàn)在光值偏低,如RF因子存在的話,光值偏高。產(chǎn)生上述現(xiàn)象的主要原因是雜蛋白較多,成份復(fù)雜。所以需要特別的試劑才能消除影響。第yi:如廠家沒有提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液,只是有一個籠統(tǒng)的或統(tǒng)一的稀釋液,
如何制備細胞懸液呢?2020/01/16
細胞懸液是指singlecellsuspension。一般就是指把貼壁培養(yǎng)的細胞消化吹打以后形成的懸液,一般會吹打多次,使粘連的細胞都分開。當(dāng)然,本身是懸浮培養(yǎng)的細胞的話,就不用消化了。制備細胞懸液(1)用75%酒精棉球消毒超凈工作臺臺面,然后用75%酒精棉球消毒雙手及暴露部位;(2)用75%酒精棉球消毒各培養(yǎng)用液的瓶蓋以及培養(yǎng)瓶瓶蓋部位,并在酒精燈外焰上方一過,擰開瓶蓋,將瓶口再在酒精燈外焰上方一過后,擰上瓶蓋,但不要擰緊,以便下步操作;?(3)輕輕將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液倒入燒杯中,注意不要讓
些生化試劑的原理2020/01/14
1.溶液I—溶菌液:溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌體細胞壁的主要化學(xué)成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵,因而具有溶菌的作用。當(dāng)溶液中pH小于8時,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,維持滲透壓,防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金屬離子,抑制脫氧核糖核酸酶對DNA的降解作用(DNase作用時需要一定的金屬離子作輔基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因為溶菌酶的反應(yīng)要求有較低的離子強度的環(huán)境。2.溶液II-NaOH-SDS液:NaOH:核酸
冬天怎樣保存ELISA試劑盒更安全2020/01/10
微涼的風(fēng),無聲無息的被擋在門外,無法進得門內(nèi),只因門外屬于天然,門內(nèi)卻屬于人生,直到門內(nèi)的人透過窗戶望見了門外落葉的幾抹金黃,才發(fā)覺到了什么,秋,原本果真是金色的,并不差勁于春的碧綠。不過,那就是一襲輕紗般的美夢,飄過身畔,隨后被白雪代替,接下來小編給您講講elisa試劑盒怎樣保存更安全。(1)要留心防止出現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因此,在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相,然后與后邊參與
細胞凍存和細胞復(fù)蘇對人ELISA試劑盒實驗的影響2020/01/09
凍存技術(shù)1.液氮法目前,細胞凍存zui常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。人ELISA試劑盒采用或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,人ELISA試劑盒減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L3和50L3兩種。細胞
關(guān)于抗體種類繁多,你知道原因么2020/01/03
人類生活在雜亂多變的環(huán)境中,每時每刻都會觸摸到各式各樣的微生物,受到一些相似抗原物質(zhì)的侵擾,從而使機體致病。為了抵御這些外來侵擾,使自身得以持續(xù)生存,人體必須構(gòu)成幾十萬、幾百萬甚至更多種相應(yīng)的特異性抗體以抵擋外界的抗原物質(zhì),才華免遭其害,保護自己。咱們會從抗體的發(fā)作及多樣性進行其原因的論述與剖析。1.抗原的遞上抗原遞上細胞(antigenpresentingcell,APC)的抗原遞上作用是一個涉及抗原汲取、處理與遞上的雜亂進程。Z首要的抗原遞上分子是首要組織相容性復(fù)合物(majorhistoc
關(guān)于抗體和重組蛋白的安穩(wěn)性2019/12/27
1.收到抗體和重組蛋白后的操作收到抗體和重組蛋白后(大部分抗體和重組蛋白是溶液態(tài)),請必須在4℃,12000rpm,離心3分鐘,再打開管蓋進行分裝、溶解和保存(假如抗體和重組蛋白體積小于50μl,請延長離心時刻至5分鐘,以保證悉數(shù)抗體和重組蛋白均離心下來,干粉狀況的同樣適用)??贵w和重組蛋白運用特制的貯存管,只有在12000rpm離心3分鐘,才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體和重組蛋白悉數(shù)離心下來(即使是在10000rpm離心也會離心不*,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體和重組蛋白的量不足的現(xiàn)象)。請詳細閱覽說明書,并依
ELISA試劑預(yù)防非特異性染色2019/12/26
非特異染色的原因包括一抗和二抗與血清蛋白的相互作用,抗體與組織之間的離子相互作用,以及與能夠影響IHC檢測系統(tǒng)的內(nèi)源分子的相互作用。這些問題會產(chǎn)生高背景,以及無法在適當(dāng)?shù)募毎恢糜^察目的抗原。這種類型的染色問題可通過用封閉劑來封閉非特異相互作用來解決。在將樣本與一抗共同孵育之前,可開展這些步驟預(yù)防非特異疏水相互作用盡管疏水相互作用在抗原表位-抗體的結(jié)合中起了重要作用,但這些力同樣能促進非特異結(jié)合。由于一些氨基酸的中性側(cè)鏈,大部分蛋白有著某種程度的疏水性。將組織與熱滅活的正常血清或牛血清白蛋白(B
ELISA試劑盒進口大鼠儲存需防光2019/12/20
防震1.轟動易爆破,放地下室中。2.克己的大晶體明礬、大晶體硫酸銅,用軟紙墊包擴大口試劑瓶中,進行緩沖,并按“四位數(shù)字”進行編號入廚。防火1.在儀器室“大門鄰近”、“顯眼”、“隨手”的地方設(shè)置水缸、消防桶、砂缸、泡沫滅火器一瓶。泡沫滅火器藥物,每年geng新一次。(如有“CCl4”或“1211”滅火器非常好)2.室內(nèi)電線一概換成暗線,以防藥物熏蒸,短路走火。防鼠1.ELISA試劑盒進口大鼠漿糊中恰當(dāng)多調(diào)一些苯酚。2.對“指示劑”一櫥藥品,放一些易蒸發(fā)的藥物例如甲醛、煤酚皂等。鼠害嚴峻的櫥中,可替
流式細胞儀結(jié)構(gòu)與原理2019/12/18
流式細胞術(shù)(FlowCytoMeter,FCM)是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段,它可高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù),與傳統(tǒng)熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準確性好等優(yōu)點,成為當(dāng)代的細胞定量分析技術(shù)。工作原理將待測細胞染色后制成單細胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動室,不含細胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出,鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度,這樣,鞘液就能夠包繞著樣品高速流動,組成一個圓形的流束,待測細胞在鞘液的包被下單行排列
過年后ELISA試劑盒加樣后分批操作2019/12/10
ELISA試劑盒試驗中,加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。為避免樣品蒸騰,試驗時將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。很多不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,然后架空ELISA試劑盒后的過程中攪擾物質(zhì)的再吸附。在ELISA試劑盒檢查試驗中,包被原的性質(zhì)很首要,蛋白濃度,是不是降解,這到你做出的抗體可不可以被其辨認。加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板外表輕拭吸干。合理安排檢查量,避免反響板過多構(gòu)成洗板等候時刻長。保存抗原很首要,做重組蛋白時,要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。避免孵育時刻
細胞傳代的辦法您做對了嗎?2019/12/06
經(jīng)過自主研發(fā)和吞并重組不斷擴展企業(yè)產(chǎn)品線,逐漸發(fā)展為試劑的專業(yè)商和電子商務(wù)集成供應(yīng)商,成為試劑職業(yè)發(fā)展的者。開端細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否*。一:細胞與試劑方面:1.細胞(單層細胞,鏡檢合適)2.培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等合適細胞有要求的培養(yǎng)液)3.滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)4.7.5%NaHC03溶液5.0.25%胰蛋白酶6.PBS洗液。二:實驗小用具方面:1.小方瓶(100m1)2.克氏瓶3.膠塞4.吸管(10ml、1m1)5
沙門氏志賀氏增菌液管操作流程2019/12/03
努力地工作,就像不苛求回報一樣;真誠地去愛,就像從來沒有受過傷害一樣;投入地跳舞,就像沒有人在一旁看著你一樣。這樣的生活,肯定可以給你帶來快樂。接下來介紹沙門氏志賀氏增菌液管操作流程培養(yǎng)基三類:1)固體培養(yǎng)基。是在培養(yǎng)基中加入凝固劑,有瓊脂、明膠、硅膠等。固體培養(yǎng)基常用于微生物分離、鑒定、計數(shù)和菌種保存等方面。(2)液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基中不加任何凝固劑。這種培養(yǎng)基的成分均勻,微生物能充分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料,適于作生理等研究,由于發(fā)酵率高,操作方便,也常用于發(fā)酵工業(yè)。(3)半固體培養(yǎng)基。是
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