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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第14年
生化試劑類使用方法2021/04/21
生化試劑類作用:1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mMTris-HCl(pH7.5),10mMCaCl2。2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操
其他生化試劑特點(diǎn)與自備的器材方法2021/04/16
其他生化試劑自備的器材:1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光PCR擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20℃冰箱、可調(diào)移液器(2µL、20µL、200µL、1000µL)。2.耗材:熒光PCR反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5mL經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水處理的滅菌離心管、吸頭(10µL、200µL、1000µL)、滅菌雙蒸水。其他生化試劑特點(diǎn):1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品DNA模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。2.引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度為560bp。3.PCRmix中含上樣染料,P
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本要求與操作步驟2021/04/13
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。1.加樣:分別設(shè)空白孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔加待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗小鼠IgG工作液100μl(取1μl
其他ELISA試劑盒的注意事項(xiàng)2021/04/02
其他ELISA試劑盒注意事項(xiàng):(1)IgG:血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG還能激活補(bǔ)體,結(jié)合并增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和ADCC效應(yīng)),穿過(guò)胎盤(pán),保護(hù)胎兒及新生嬰兒免受感染。(2)IgA:分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。(3)IgM:是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強(qiáng)的激活補(bǔ)體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。(4)IgD:主要存在于成熟B細(xì)胞表面,是B
小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟使用2021/03/30
小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)
ELISA檢測(cè)試劑盒樣本要求幾點(diǎn)2021/03/26
ELISA檢測(cè)試劑盒優(yōu)點(diǎn)如下:一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右
人胚腎細(xì)胞使用注意方法2021/03/23
人胚腎細(xì)胞使用方法:收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。1.取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。2.待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。3.細(xì)胞傳代1、吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;2、添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;3、用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)
植物激素及核酸類作用方法2021/03/18
植物激素及核酸類作用:1.低濃度的生長(zhǎng)素有促進(jìn)器官伸長(zhǎng)的作用。從而可減少蒸騰失水。超過(guò)適濃度時(shí)由于會(huì)導(dǎo)致乙烯產(chǎn)生,生長(zhǎng)的促進(jìn)作用下降,甚至反會(huì)轉(zhuǎn)為抑制。不同器官對(duì)生長(zhǎng)素的反應(yīng)不同,根敏感,芽次之,莖的敏感性差。生長(zhǎng)素能促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)的主要原因,在于它能使細(xì)胞壁環(huán)境酸化、水解酶的活性增加,從而使細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)松弛、可塑性增加,有利于細(xì)胞體積增大。2.生長(zhǎng)素還能促進(jìn)RNA和蛋白質(zhì)的合成,促進(jìn)細(xì)胞的分裂與分化。生長(zhǎng)素具有兩重性,不僅能促進(jìn)植物生長(zhǎng),也能抑制植物生長(zhǎng)。低濃度的生長(zhǎng)素促進(jìn)植物生長(zhǎng),過(guò)高濃度的生
抗生素類五大分類2021/03/12
鏈霉素鏈霉素是個(gè)氨基糖苷類抗生素,也是個(gè)用于治療結(jié)核病的藥物,口服吸收極少,肌內(nèi)注射吸收快,鏈霉素對(duì)銅綠假單孢菌和其他G-桿菌的抗菌活性,對(duì)土拉菌病和鼠疫有*,常為,特別是與四環(huán)素聯(lián)合用藥已成為目前治療鼠疫的效手段。也用于治療多重耐藥的結(jié)核病。與青霉素合用可治療溶血性鏈球菌、草綠色鏈球菌及腸球菌等引起的心內(nèi)膜炎。慶大霉素慶大霉素口服吸收很少,肌內(nèi)注射吸收迅速而*。在腎皮質(zhì)中積聚的藥物可比血漿濃度高出數(shù)倍,停藥20d后仍能在尿中檢測(cè)到本品。是治療各種G-桿菌感染的主要抗菌藥,尤其對(duì)沙雷菌屬作用更強(qiáng)
人ELISA試劑盒注意事項(xiàng)說(shuō)明2021/03/10
人ELISA試劑盒標(biāo)本收集:1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3、尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。4
豬ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)與原理2021/03/05
豬ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間較好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,較好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定
菌株原理及保存方法2021/03/02
菌株原理:耐藥菌株是指在長(zhǎng)期的抗生素選擇之后出現(xiàn)的對(duì)相應(yīng)抗生素產(chǎn)生耐受能力的菌株。細(xì)菌的耐藥性,是指細(xì)菌多次與藥物接觸后,對(duì)藥物的敏感性減小甚至消失,致使藥物對(duì)耐藥菌的療效降低甚至無(wú)效。耐藥菌株的出現(xiàn)增加了感染性疾病治愈的難度,并迫使人類尋找新的對(duì)抗微生物感染的方法。菌株保存使用:1、新引進(jìn)的菌種經(jīng)形態(tài)、染色、培養(yǎng)性狀、生化特性等的鑒別確定后作記錄,并進(jìn)行保存。2、長(zhǎng)期保存的儲(chǔ)存菌株以冷凍干燥保藏為主,特殊要求的菌種可用其它方法進(jìn)行保存,保存期可長(zhǎng)達(dá)幾年至幾十年。3、半儲(chǔ)存菌株以含20%甘油的肉
熒光-PCR法原理與技術(shù)原理2021/02/25
熒光-PCR法原理:所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光-PCR法技術(shù)原理:將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復(fù)性,適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律,與模板DNA互補(bǔ)配對(duì)的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應(yīng)體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長(zhǎng),通過(guò)實(shí)時(shí)檢測(cè)與之對(duì)應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信
PCR檢測(cè)試劑盒技術(shù)原理步驟2021/02/24
PCR檢測(cè)試劑盒原理:本試劑盒系由預(yù)包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色
其他生化試劑存在的問(wèn)題及解決辦法2021/02/08
1優(yōu)質(zhì)的儀器用水優(yōu)質(zhì)的儀器用水是使用好檢驗(yàn)試劑的一個(gè)十分重要的環(huán)節(jié)之一。因?yàn)闇y(cè)定離子類項(xiàng)目:比如銅、鐵、鋅、鈣、鎂、磷。這些項(xiàng)目在使用過(guò)程中,儀器用水的質(zhì)量相當(dāng)重要,雖然現(xiàn)在一般醫(yī)院的生化儀都有制水系統(tǒng),但制水系統(tǒng)基本都是制備去離子水,離子交換樹(shù)脂在使用一段時(shí)間后交換能力明顯下降,需要定期進(jìn)行更換,否則制備的水離子含量多,電導(dǎo)率偏高。使用含離子超標(biāo)的水沖洗儀器,直接影響檢驗(yàn)結(jié)果。再如血氨、二氧化碳項(xiàng)目,如果水質(zhì)不好,儀器用水中本身含氨和二氧化碳就很高,則檢驗(yàn)該項(xiàng)目的結(jié)果也會(huì)受到嚴(yán)重的影響。還有如
熒光核酸試劑使用方法產(chǎn)品2021/02/04
熒光核酸試劑使用方法:注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。1.樣本處理(樣本處理區(qū))待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。2.擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMDRT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMDRT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,
小鼠elisa試劑盒樣本處理及提供的材料2021/02/03
小鼠elisa試劑盒樣本處理及要求1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將
小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟及性能2021/01/28
小鼠ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒樣本收集步驟方法2021/01/27
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1、操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說(shuō)明書(shū)一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。3、手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使
人ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)及樣品收集、處理及保存方法2021/01/20
人ELISA試劑盒具有如下優(yōu)點(diǎn):一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。人ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30
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