国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

探討熒光定量PCR中的Ct值2021/09/15

熒光定量PCR（qPCR）是目前病原檢測領域使用最為廣泛的核酸檢測方法（PCR檢測技術概述）。尤其是非洲豬瘟發(fā)生后，qPCR檢測得到了極大的普及，對于剛剛進入qPCR檢測領域的人，很容易鉆入了“唯Ct值”的牛角尖，今天我們就聊聊qPCR中的Ct值。一、Ct值的基本概念1、什么是Ct值閾值循環(huán)數(shù)Thresholdcycle(Ct)也寫作Cq值，熒光信號大于熒光閾值時PCR循環(huán)數(shù)。儀器軟件通常將第3-15個循環(huán)的熒光值設為基線（baseline），是由于測量的偶然誤差引起的。閾值（threshold

實驗室酶聯(lián)免疫技術的質量控制要點2021/09/07

實驗室酶聯(lián)免疫技術的質量控制：1.測定模式的影響ELISA測定模式包括：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法因受操作時差所引起的bu公平競爭等因素的影響，結果重復性較差，質量較難控制。2.ELISA試劑的準備不同批次的試劑在制作過程中很難保證質量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程，并且能夠保證結果的穩(wěn)定性；對

單克隆抗體與多克隆抗體的區(qū)別2021/09/02

克?。褐笩o性繁殖細胞系，是由單一的祖先細胞分裂繁殖而形成的一簇細胞純系。在這個家族的所有成員中，如無突變發(fā)生，基因是*相同的。單克隆抗體（monoclonalantibodies,mAb）：由一個識別一種抗原表位的B細胞克隆產生的同源抗體。高度均一、特異性強、效價高、少或無交叉反應性。多克隆抗體（polyclonalantibody,pAb）：用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物，可刺激機體多個B細胞克隆產生針對多種抗原表位的不同抗體。所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。多克隆抗體與

培養(yǎng)基制備常用的8個步驟過程2021/08/25

培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實際需要，添加一些自身無法合成的化合物，即生長因子。培養(yǎng)基的制備程序不同類型培養(yǎng)基制備的程序也不盡相同。但一般培養(yǎng)基的程序主要可分為：配料、溶化、矯正pH、澄清過濾、分裝、滅菌及檢定等8個步驟。1，配料：按培養(yǎng)基處方準確稱取各種成分，先在三角燒瓶中加入少量蒸餾水，再加入各種成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水沖洗瓶壁。

?ATCC菌種四種的保存方法2021/08/19

1、傳代保存法有些微生物當遇到冷凍或干燥等處理時，會很快死亡，因此在這種情況下，只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進行ATCC菌種轉接、培養(yǎng)后再保存，它是基本的微生物保存法，例如酸奶等常用菌種的保存。傳代保存時，培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產酸ATCC菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。一般地，大多數(shù)菌種的保藏溫度以5℃為好，像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物菌種則可以使用3

血清的五大主要功能2021/08/03

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素，基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子

流式抗體保存注意事項2021/07/28

1.流式抗體應該如何保存？流式抗體一般都是直接帶熒光標記的，一般情況下4°C避光可以保存一年，勿-20°C保存，熒光基團在反復凍融之后會從抗體上脫落。2.流式抗體過了一年還能用嗎？一般來說，流式抗體還是比較穩(wěn)定的，如果說明書上寫4°C避光可以保存一年，大部分情況下，過了一年還是可以使用的，有些流式抗體甚至可以4°C避光保存2-3年。3.不能及時檢測的樣本應該如何保存？流式實驗建議是用新鮮細胞做，樣本如果不能及時上機檢測，可以在得到單細胞懸液后就立即放到4°C冰箱中，到第二天早上做流式，或嘗試抗體

介紹按用途分類的三種培養(yǎng)基2021/07/21

根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分，可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。一、選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養(yǎng)基，稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長；而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長；結晶紫能抑制革蘭氏陽性細菌的生長等。二、增殖培養(yǎng)基在自然界中，不同種的微生物常生活在一起，為了分離我們所需要的微生物，在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質，以增加這種微生物的繁殖速度，逐漸淘汰其它微生物，這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基，這種培養(yǎng)基

生物素標記實驗指南2021/07/14

生物素標記反應原理：NH2-ReactiveBiotin專一的與伯胺反應（N-末端及賴氨酸殘基側鏈）形成穩(wěn)定的酰胺鍵一、實驗前準備：仔細閱讀使用說明書。計算待使用NH2-ReactiveBiotin的量。1.提前20min從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫（注：不需要用到的NH2-ReactiveBiotin繼續(xù)放置冰箱中）。2.溶解NH2-ReactiveBiotin：加入30μLDMF至NH2-ReactiveBiotin瓶中，靜置10min，待其充分溶解，此時生物素的濃度為10mM。二、操作步

牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實驗說明2021/07/07

牛源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實驗說明需要自備的器材：1．方法儀器：分析天平、離心機、熒光PCR擴增儀、組織研磨器、-20℃冰箱、可調移液器（2µL、20µL、200µL、1000µL）。2．耗材：熒光PCR專用反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5mL經焦碳酸二乙酯（DEPC）水處理的滅菌離心管、吸頭（10µL、200µL、1000µL）、滅菌雙蒸水。樣本采集、存放及運輸：1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存

介紹生物素親和素ELISA系統(tǒng)2021/07/01

生物素親和素(又稱抗生物素)系統(tǒng)(biotinavidinsystem,BAS)標記抗體的技術是20世紀70年代后期發(fā)展起來的一種新的免疫檢測方法。由于親和素與生物素間的親和力*，結合迅速，且極其穩(wěn)定，生物素標記抗體和酶的標記率高，又不影響蛋白的活性，使BAS標記技術比常規(guī)酶聯(lián)免疫、放射免疫及熒光免疫技術有著更高的靈敏度，為微量抗原、抗體的檢測開辟了新的途徑。近年來，在BAS檢測中多用鏈霉親和素“streptavidin,SA”，它是鏈霉菌培養(yǎng)過程中的分泌物，完整的鏈霉親和素和從卵白中提取的親和

免疫熒光技術實驗說明2021/06/23

免疫熒光技術（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發(fā)展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。一、傳統(tǒng)的免疫熒光實驗步驟1、實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒：多聚甲醛、70%甲醇、丙酮、PBS、Triton、BSA、DAPI染液、DABCO、Tris、甘油儀器、耗材：玻片2、實驗步驟細胞爬片免疫熒光實驗步驟：第一

標記基因和報告基因的區(qū)別與關聯(lián)2021/06/17

標記基因和報告基因的概念標記基因(markergene)，是一種已知功能或已知序列的基因，能夠起著特異性標記的作用。標記基因是選擇標記基因的簡稱，是指其編碼產物能夠使轉化的細胞、組織具有對抗生素等的抗性，或者使轉化細胞、組織具有代謝的*性。在培養(yǎng)基中加入抗生素等選擇試劑的條件下，非轉化的細胞死亡或生長受到抑制，而轉化的細胞能夠繼續(xù)存活，從而將轉化的細胞、組織從大量的細胞或組織中篩選出來的一類基因。在基因工程意義上來說，它是重組DNA載體的重要標記，通常用來檢驗轉化成功與否；在基因定位意義上來說，

細胞培養(yǎng)的操作步驟2021/06/09

一、準備工作準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調試等。二、取材在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞，經過一定的處理后接入培養(yǎng)器血中，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的第一次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用于培養(yǎng)，實際上幼體組織比成年個體的組織容易培養(yǎng)，分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng)，腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng)。取材后應立即處理，盡

如何正確溶解與稀釋ELISA標準品？2021/05/26

ELISA標準曲線是結果計算的尺子，標準品是ELISA實驗成功與否的關鍵點。怎樣正確溶解、稀釋標準品呢？1.粉末標準品短暫離心，讓因運輸沾到管蓋、管壁的標準品沉到管底。2.根據(jù)瓶標簽加入一定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震蕩，室溫靜置溶解10-30min，讓粉末*溶解。注意：加水后暫不用移液槍吹吸，避免蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。3.標準品梯度稀釋:（1）標準品稀釋液的選擇：若血清、血漿、組織勻漿樣本，用試劑盒中的標準品稀釋液，梯度稀釋標準品。若細胞上清樣本，建議

用鑒定試劑盒做微生物生化鑒定操作流程與注意事項2021/05/17

生化鑒定試劑盒HiBio-ID™，試劑盒包含生化鑒定卡、輔助試劑、結果詮釋表和標準菌種表。一個生化鑒定卡上集成了12種或24種生化試驗，將反應后的顯色結果與《結果詮釋表》、《菌種標準表》比對后，從而對菌種作出鑒定。操作流程：1，準備接種液①待測菌株需要先分離純化。只有純化的菌株才能用于檢測。可用普通培養(yǎng)基如營養(yǎng)瓊脂（#M001）或適合的鑒別培養(yǎng)基分離菌株。（具體培養(yǎng)基以說明書為準）②挑取單個菌落，接種到5ml腦心浸出液肉湯，在35-37℃培養(yǎng)4-6小時，直到菌液濁度達到產品說明書上的要求。一些苛

人ELISA試劑盒實驗步驟及優(yōu)點2021/05/11

人ELISA試劑盒實驗步驟:1.以稀釋液將待檢標本做適當稀釋（預試中確定）加入包被有已知抗原的酶標板中（50ul/孔），加封口膠帶于37℃作用30min。2.棄反應液，以沖洗液連續(xù)洗板5次并于吸水紙上拍干。3.加入酶標抗體（濃度在預試中確定）。加封口膠帶后于37℃作用30min。4.重復第2步。5.加底物（濃度在預試中確定），加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60min，其間不時觀察，顯色滿意后加終止液50ul/孔。6.于酶標儀測定OD值，OPD用492nm測定，TMB用450nm測定。人ELIS

熒光核酸試劑儲存條件及探針法2021/04/28

熒光核酸試劑儲存條件：14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻

標準品儲存及使用方法2021/04/27

標準物質》技術規(guī)范，隨機抽取分裝后的樣品，采用高效液相色譜法（DAD檢測器）對純度進行均勻性檢驗、穩(wěn)定性考察。檢驗結果表明均勻性和穩(wěn)定性良好。本標準物質zui小取樣量為5mg。經標準物質穩(wěn)定性跟蹤考察，有效期為自定值日期起2年。研制單位將繼續(xù)監(jiān)測該標準物質的穩(wěn)定性，有效期內如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時通知用戶。包裝、儲存及使用1、包裝：本標準物質采用螺口小玻璃瓶包裝，每瓶不少于500mg。2、儲存及使用：冷藏、避光、干燥條件下保存。使用前，在P2O5干燥器中干燥48小時以上，以除去水分。3、本標準物質

人ELISA試劑盒操作步驟事項2021/04/22

人Elisa試劑盒操作步驟：1．用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；3．在距離紫外燈直射范圍內20-30厘米處照射2-3小時；4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；5．將人Elisa試劑盒培養(yǎng)板在5%CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快