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人ELISA試劑盒應(yīng)注意的實驗規(guī)則2017/10/30

人ELISA試劑盒應(yīng)注意的實驗規(guī)則：1.要保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。2.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標準品時。3.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。4.實驗時，要使底物避光保存。5.用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。6.吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。7.將液體加到酶標孔中時

小鼠ELISA試劑盒樣本保存注意事項2017/10/27

小鼠ELISA試劑盒樣本保存注意事項一、標本保存不當在冰箱中保存過久的標本，血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性；標本放置時間過長（如一天以上），有時抗原或抗體免疫活性減弱，亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾，ELISA測定的血清標本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5天內(nèi)測定的血清標本可存放于4℃，1周后測定的血清標本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔，不可強烈振蕩。二、標本溶血由

人ELISA試劑盒實驗應(yīng)了解的安全知識2017/10/24

人ELISA試劑盒實驗應(yīng)了解的安全知識：1、不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。2、避免直接接觸終止液和底物A、B，一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。3、實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。4、不用的其它試劑盒應(yīng)包裝好或蓋好，不同批號的試劑盒不要混用，保質(zhì)期前使用。5、應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫，稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。6、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。7、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。實驗中過失的

大鼠ELISA試劑盒標本的采集2017/10/20

大鼠ELISA試劑盒基本原理：①抗原或抗體能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學活性；②抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，仍保持其免疫學和酶學活性；③酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。標本的采集及保存：1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000xg離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

人ELISA試劑盒選擇要點2017/10/18

人ELISA試劑盒操作注意事項（1）實驗室常用離心機套管底部要墊棉花或試管墊。（2）電動離心機如有噪音或機身振動時，應(yīng)立即切斷電源，即時排除故障。（3）離心管必須對稱放入套管中，防止機身振動，若只有一支樣品管另外一支要用等質(zhì)量的水代替。（4）啟動實驗室常用離心機時，應(yīng)蓋上離心機頂蓋后，方可慢慢啟動。（5）分離結(jié)束后，先關(guān)閉離心機，在離心機停止轉(zhuǎn)動后，方可打開離心機蓋，取出樣品，不可用外力強制其停止運動。（6）實驗室常用離心機離心時間一般1～2分鐘，在此期間，實驗者不得離開去做別的事。選擇要點（1

小鼠ELISA試劑盒樣品收集2017/10/16

小鼠ELISA試劑盒檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被骨涎蛋白（BSP）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的骨涎蛋白（BSP）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3

大鼠ELISA試劑盒解決辦法2017/10/13

大鼠ELISA試劑盒解決辦法：1選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)異的檢測試劑，嚴峻按照試劑闡明書進行操作，操作前將elisa試劑盒在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因：1）血清或血漿標本分別欠好即進行加樣；2）手工操作中，加樣板過多構(gòu)成加樣后放入孵箱前等候時間過長；3）加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外。解決辦法：1）標本為血清：將血液先天然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：有必要運用含抗凝劑的血液標本搜集管，采血后有必要當即倒置采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rp

人ELISA試劑盒工作原理2017/10/11

人ELISA試劑盒工作原理本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定樣品中大鼠肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）水平。向預(yù)先包被了肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）單克隆抗體的酶標孔中加入肌酸激酶同工酶MB（CK-MB），溫育；溫育后，加入生物素標記的抗肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）抗體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺與樣品中肌酸激酶同工酶MB（CK-M

大鼠ELISA試劑盒試驗原理2017/10/09

大鼠ELISA試劑盒試驗原理被石蠟包埋的組織切片在二甲苯中脫去石蠟并逐級水化后，進行內(nèi)源性的過氧化物酶淬滅。內(nèi)源性過氧化物酶可以被甲醇或Zymed'sPeroxo-Block（目錄號:00-2015）中的3％的過氧化氫所抑制。說明：非免疫血清用來去除非特異性背景。孵育一抗后，加入二抗，再經(jīng)過一步?jīng)_洗，加入鏈霉親和素過氧化物酶藕聯(lián)物。免疫組化試劑盒特點1.簡易：以簡單的一步反應(yīng)取代常規(guī)法的五個步驟。2.快捷：以1個小時取代常規(guī)法的3-5個小時。3.通用：適合于絕大多數(shù)一級抗體,而且不需要二級抗體反

人ELISA試劑盒說明書實驗過程必知小知識2017/10/06

人ELISA試劑盒實驗過程必知小知識：①建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。②若顯色過淺，可適當延長底物溫育時。③實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。④酶標包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。⑤標本宜在新鮮時檢測，如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)，保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。⑥凍結(jié)標本溶解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻

大鼠ELISA試劑盒標本處理2017/09/29

大鼠ELISA試劑盒標本處理：（1）細胞培養(yǎng)上清液根據(jù)需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。（2）腦脊液根據(jù)需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。（3）血漿①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲存在零下80℃直到使用。②用試劑盒中的標準稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測，按照說明書方法檢測。液體類標本：包括血清、血漿、尿液、

小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法使用說明書2017/09/27

小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。3.加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。4

大鼠ELISA試劑盒檢測原理2017/09/25

大鼠ELISA試劑盒檢測原理本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標準品、待測樣本加入到預(yù)先包被VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)透明酶標包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)濃度呈正相關(guān)，450nm波長下測定OD值，根據(jù)標準品和樣品的OD值，計算樣本中

人ELISA試劑盒實驗過程必知小知識2017/09/22

人ELISA試劑盒實驗過程必知小知識：①建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。②若顯色過淺，可適當延長底物溫育時。③實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。④酶標包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。⑤標本宜在新鮮時檢測，如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)，保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。⑥凍結(jié)標本溶解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻

小鼠ELISA試劑盒樣本處理及要求說明書2017/09/18

小鼠ELISA試劑盒樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.

人ELISA試劑盒操作方法2017/09/13

人ELISA試劑盒操作方法試管中加入CRP稀釋液0.5ml，然后加血清1滴（50ul）?；靹颍偌覥RP試劑10ul，混勻離心（3000轉(zhuǎn)/分）1min，用顯微鏡觀察結(jié)果。有清晰凝集者為陽性；不凝集者為陰性。（1）試劑可放于4～25℃，但不可冰凍，用時搖勻。應(yīng)嚴格操作，盡量防止污染。具體可參考試劑盒說明書。（2）適用于血清、胸、腹水、腦脊液等體液測定，但標本切忌用草酸鹽抗凝劑抗凝。（3）該試劑zui大優(yōu)點是快速、簡便，試劑穩(wěn)定也容易保存，且血清不需滅活，也不受RF干擾。操作步驟：標準品的稀釋：本

小鼠ELISA試劑盒檢測原理2017/09/06

小鼠ELISA試劑盒檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa（GP/ⅡbⅢa）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa（GP/ⅡbⅢa）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的

人ELISA試劑盒處理方法2017/09/04

人ELISA試劑盒處理方法：1.水溶性廢棄物只有那些無害的、中性的、無味道的一些水溶性物質(zhì)可以直接倒入水槽流入下水道，強酸性或強堿性物質(zhì)在丟棄之前應(yīng)被中和，并且用大量水沖洗干凈，任何能夠與稀酸或稀堿反應(yīng)的物質(zhì)，都不能隨便倒入下水道。2.固體廢棄物除非固體是有害性的或極易回收的，一般都是放入的盛放沒有危險的廢棄物的容器里。廢棄物應(yīng)與放入有特別標志的容器里，一些特殊的化學試劑在丟棄前應(yīng)當經(jīng)過適當。3.有機溶劑廢棄的有機溶劑應(yīng)倒入貼有合適標簽的容器，然后將這些容器運出實驗室，在合適的地方將這些溶劑點燃

人ELISA試劑盒基本原理說明書2017/08/28

人ELISA試劑盒基本原理①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本（測定其中的抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)

大鼠ELISA試劑盒標本的采集及保存2017/08/23

大鼠ELISA試劑盒標本的采集及保存：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。3.尿液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照