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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第14年
小鼠ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu)2017/08/16
小鼠ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu):1、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心23分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心60分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘,取上清液。5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆
人ELISA試劑盒操作的通用的規(guī)矩2017/08/14
人ELISA試劑盒操作的通用的規(guī)矩1.在運(yùn)用微量加樣器時(shí),羅致不一樣瓶子中液體后要更換槍頭,即使羅致標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2.羅致液體時(shí)速度不易太快,避免產(chǎn)生氣泡,羅致的量不可準(zhǔn)確。3.要保證微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以運(yùn)用蒸餾水和電子天平進(jìn)行判定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%支配時(shí),lmL的水可以看作是lg、200L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)當(dāng)將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行判定。4.將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會(huì)天然流下去。吸
小鼠ELISA試劑盒抗體的結(jié)構(gòu)2017/08/11
小鼠ELISA試劑盒抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測(cè)定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個(gè)輕鏈(L)和兩個(gè)重鏈(H)的單體組成。Ig的輕鏈?zhǔn)窍嗤?,有κ(kappa)和λ(Lambda)兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同,這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(gamma)鏈和μ(mu)鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異,稱為可變區(qū),分別用V
大鼠ELISA試劑盒處理方法2017/08/09
大鼠ELISA試劑盒處理方法1、血清血清是zui常用于ELISA檢測(cè)的一類樣本,處理也比較簡(jiǎn)單。用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃1000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。采血過程中應(yīng)避免溶血,因?yàn)榧t細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測(cè)中會(huì)有非特異性的顯色,而導(dǎo)致檢測(cè)的
大鼠ELISA試劑盒測(cè)定步驟2017/08/07
大鼠ELISA試劑盒測(cè)定步驟使用前將所有IL-6ELISA試劑盒和樣本平衡至室溫。推薦所有的樣本、標(biāo)準(zhǔn)和對(duì)照測(cè)定雙份。1.準(zhǔn)備所有的試劑和工作標(biāo)準(zhǔn)品。2.取下多余的微量培養(yǎng)板條,放回裝有干燥劑的錫箔袋中,重新密封。3.每孔加入100ulAssayDiluentRD1W。4.每孔依次加入100ul標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和對(duì)照。用橡皮條密封。室溫孵化2小時(shí)。記錄測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)和樣本的分布。5.吸棄孔內(nèi)液體,每孔400ul洗滌液,充分洗滌后*去除液體。在干凈的紙上拍干。反復(fù)洗滌4次。6.每孔加入200ulIL-6Co
人ELISA試劑盒樣本處理的具體方法2017/08/04
人ELISA試劑盒樣本處理的具體方法1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.
小鼠ELISA試劑盒處理方式2017/08/02
小鼠ELISA試劑盒處理方式1、采集血漿時(shí)一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽),采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?.1、血液包括血漿和血清,它們的主要區(qū)別就是:血清凝血而血漿不凝血,所以它們的處理方式也就不一樣1.2、如要采集血清,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時(shí)后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,但是一般飯后半小時(shí)內(nèi)不易采集,因?yàn)閯傔M(jìn)食
大鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)簡(jiǎn)介2017/08/02
大鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)簡(jiǎn)介收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)試
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟2017/07/31
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟1、收集蛋白樣品(Proteinsamplepreparation)可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品。對(duì)于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白,例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等,可以參考相關(guān)文獻(xiàn)提取這些亞細(xì)胞組份蛋白,也可以使用試劑盒進(jìn)行抽提。收集完蛋白樣品后,為確保每個(gè)蛋白樣品的上樣量一致,需要測(cè)定每個(gè)蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同,需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y(cè)定方法。因?yàn)椴煌牡鞍诐舛葴y(cè)定方法對(duì)于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。2、
人ELISA試劑盒標(biāo)本及采集2017/07/28
人ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素:(1)ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠嚴(yán)重溶血,以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性;(2)混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;(3)如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng);(4)標(biāo)本凝固不全,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;(5)采
大鼠ELISA試劑盒基本原理2017/07/26
大鼠ELISA試劑盒基本原理①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根
人ELISA試劑盒驟進(jìn)行操作2017/07/24
人ELISA試劑盒驟進(jìn)行操作:可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品。對(duì)于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白,例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等,可以參考相關(guān)文獻(xiàn)提取這些亞細(xì)胞組份蛋白,也可以使用試劑盒進(jìn)行抽提。收集完蛋白樣品后,為確保每個(gè)蛋白樣品的上樣量一致,需要測(cè)定每個(gè)蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同,需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y(cè)定方法。因?yàn)椴煌牡鞍诐舛葴y(cè)定方法對(duì)于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。(1)、SDS-PAGE凝膠配制SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻(xiàn)資
人ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存2017/07/21
人ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此
小鼠ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存2017/07/21
小鼠ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此
人ELISA試劑盒基本原理2017/07/19
人ELISA試劑盒基本原理①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)
大鼠ELISA試劑盒操作要點(diǎn)2017/07/19
大鼠ELISA試劑盒操作要點(diǎn)1.仔細(xì)閱讀說明書,確定胰島素ELISA試劑盒在有效期內(nèi)。按說明書確定所有試劑齊全,以及所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。2.標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存。3.按胰島素ELISA試劑盒說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。4.選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)。若選擇兩個(gè)單抗,必須識(shí)別不同表位的抗體,從同一家公司選擇抗體。5.一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍
人ELISA試劑盒注意事項(xiàng)2017/07/14
人ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(0.1-200ng/ml范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。6
人ELISA試劑盒操作方法及步驟2017/07/10
人ELISA試劑盒操作方法及步驟:操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。120ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空
小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法2017/07/07
小鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4.加
小鼠ELISA試劑盒檢測(cè)中的應(yīng)用2017/07/03
小鼠ELISA試劑盒檢測(cè)中的應(yīng)用結(jié)核菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在:1.區(qū)分TB與其它分枝桿菌;2.檢測(cè)TB耐藥基因;3.提高TB的陽性檢出率。PCR技術(shù)在HBV檢測(cè)中的應(yīng)用1、了解乙肝病毒在體內(nèi)存在的數(shù)量。2、是否傳染,傳染性有多強(qiáng)。3、是否復(fù)制。4、是否有必要服藥。5、肝功能異常改變是否由病毒引起。6、判斷病人是適合用哪類抗病毒的藥物。7、判斷藥物治療的療效。PCR技術(shù)在HCV檢測(cè)中的應(yīng)用HCV是引起輸血后肝炎的主要致病因子,因其在血中的含量極低,僅為HBV的1%,其免疫學(xué)標(biāo)志只有抗-HCV一項(xiàng)
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