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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第14年
ELISA檢測(cè)試劑盒的優(yōu)點(diǎn)2015/05/06
ELISA檢測(cè)試劑盒的優(yōu)點(diǎn):1、、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型;5、zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)
試劑盒的配制2015/05/05
ELISA試劑盒的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書(shū)中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類(lèi)試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度,建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過(guò)氧
Elisa實(shí)驗(yàn)中牛奶樣本收集方法2015/05/04
ELISA試劑盒技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。ELISA試劑盒用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中
家畜elisa試劑盒被研制2015/04/30
ELISA試劑盒豬瘟病毒E2和E0蛋白在真核表達(dá)系統(tǒng)中成功表達(dá),桿狀病毒表達(dá)抗原的檢出率比原核抗原提高3-5倍,為豬瘟診斷與監(jiān)測(cè)elisa試劑盒的進(jìn)一步大批提供了保障,在9個(gè)省市自治區(qū)推廣應(yīng)用120多個(gè)試劑盒,ELISA試劑盒共檢測(cè)萬(wàn)余份豬血清,豬瘟抗體陽(yáng)性率在12%~56%之間,進(jìn)一步證明了試劑盒具有可操作性強(qiáng)、穩(wěn)定性和重復(fù)性好的特點(diǎn);實(shí)現(xiàn)了豬圓環(huán)病毒2型ORF2基因在巴斯德畢赤酵母中獲得了表達(dá),進(jìn)一步完善了豬日本乙型腦炎診斷ELISA試劑盒、豬圓環(huán)病毒2型感染診斷與監(jiān)測(cè)ELISA試劑盒和豬細(xì)
elisa試劑盒用途2015/04/29
ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。ELISA試劑盒用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢
ELISA檢測(cè)試劑盒步平衡的過(guò)程2015/04/28
在ELISA檢測(cè)試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定ELISA檢測(cè)試劑盒需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液
ELISA檢測(cè)試劑盒溫度2015/04/24
ELISA檢測(cè)試劑盒屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA檢測(cè)試劑盒反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立E
ELISA試劑盒實(shí)踐過(guò)程技巧2015/04/23
1.在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前我們應(yīng)該對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說(shuō)明書(shū)一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,ELISA試劑盒洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流
ELISA相關(guān)試劑盒的分類(lèi)及范圍2015/04/22
1、細(xì)胞因子檢測(cè)elisa試劑盒:如白介素、選擇素、集落刺激因子,腫瘤壞死因子,干擾素,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子,趨化因子,細(xì)胞因子受體,粘附分子,生長(zhǎng)因子,凋亡因子等等2、肝纖維化檢測(cè)elisa試劑盒:如纖維連接蛋白,透明質(zhì)酸,膠原,基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子,基質(zhì)金屬蛋白酶,層粘蛋白等等3、心肌梗塞檢測(cè)elisa試劑盒:如肌鈣蛋白,肌紅蛋白,C-反應(yīng)蛋白等等4、內(nèi)分泌檢測(cè)elisa試劑盒如甲狀腺,胰腺,性激素,孕酮,睪酮,生長(zhǎng)激素,生長(zhǎng)抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,促腎上腺皮質(zhì)激素,促卵泡素,雌二醇
ELISA試劑盒的關(guān)鍵步驟2015/04/21
1、ELISA試劑盒盡量用八道或者十二道移液器加樣。對(duì)于相同的試劑,經(jīng)如二抗,酶,顯色液,終止液等。2、自己的樣品,因?yàn)槊恳豢椎臉悠凡灰粯?,用排槍加有些麻煩,如果一次的樣品比較少,而自己加樣又比較快,可以一個(gè)孔一個(gè)孔的加,但如果想一次把96或者48T的做完,可以先擺好一些PCR管或者準(zhǔn)備一個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板。將自己的樣品先加到PCR管或者培養(yǎng)板中(此板間距與酶板板相同)。ELISA試劑盒記得加一定的余量,如一次加樣是50ul,可以先加70ul。加完后再用排槍加樣,這樣可以縮短加樣時(shí)間,減小每個(gè)孔
實(shí)驗(yàn)儀器保養(yǎng)2015/04/20
1、儀器的接地:ELISA試劑盒接地的問(wèn)題除對(duì)儀器的性能、可靠性有影響外,還對(duì)使用者的人身安全關(guān)系重大,因此所有接入市電電網(wǎng)的儀器必須接可靠的地線(xiàn)。2、電源電壓:由于市電電壓波動(dòng)比較大,常常超出要求的范圍,為確保供電電源的穩(wěn)定,必須配用交流穩(wěn)壓電源。要求高的儀器單獨(dú)配備穩(wěn)壓電源。另外應(yīng)注意,插頭中的電線(xiàn)連接應(yīng)良好,ELISA試劑盒使用時(shí)切莫把插孔位置搞錯(cuò),導(dǎo)致儀器損壞。3、儀器工作環(huán)境:環(huán)境對(duì)精密檢測(cè)儀器的性能、可靠性、測(cè)量結(jié)果和壽命都有很大影響,為此對(duì)它有以下幾方面的要求:防塵,防潮,防熱,防
ELISA試劑盒保存方法2015/04/17
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類(lèi)似過(guò)氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA試劑盒測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;ELISA試劑盒二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離,
ELISA試劑盒產(chǎn)生的反應(yīng)2015/04/13
DH2+H202HRPD+2H2O上式中DH2為供氫體(即底物),H2O2為受氫體。HRP對(duì)受氫體的專(zhuān)一性很高,除H2O2外,僅作用于小分子醇和尿素的過(guò)氧化物。HRP的底物有多種,在ELISA試劑盒中常用的有:鄰苯二胺(orthophenylenediamine,OPD),四甲基聯(lián)苯胺(3,3,5,5-tetramethyl-benzidine,TMB)和2,2,-連氮基-雙-3-乙基苯噻唑啉磺酸鹽[2,2,-azino-bisc(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-
ELISA試劑盒小分子能防止關(guān)節(jié)炎2015/04/10
ELISA試劑盒研究所系統(tǒng)發(fā)生和再生醫(yī)學(xué)研究部主任淺原弘嗣等研究人員注意到,人類(lèi)和實(shí)驗(yàn)鼠的軟骨細(xì)胞中富含“miR140"分子,這是一種微型核糖核酸,也即長(zhǎng)約22個(gè)核苷酸的小分子非編碼核糖核酸。研究人員通過(guò)基因操作,培育出幾乎不含“miR140"分子的實(shí)驗(yàn)鼠,并人為使它們患上關(guān)節(jié)炎。結(jié)果,與普通實(shí)驗(yàn)鼠相比,不含“miR140"分子的實(shí)驗(yàn)鼠軟骨的損傷程度要嚴(yán)重得多。反之,通過(guò)基因操作令實(shí)驗(yàn)鼠體內(nèi)的“miR140"分子增加,那么在同樣罹患關(guān)節(jié)炎的情況下,這些實(shí)驗(yàn)鼠軟骨的狀態(tài)則非常良好。ELISA試劑盒
ELISA試劑盒操作方法2015/04/09
(1)ELISA試劑盒將抗原結(jié)合在酶標(biāo)板上。取標(biāo)準(zhǔn)IgG(10mg/mL)用碳酸鹽緩沖溶液稀釋?zhuān)玫綕舛葹?.1μg/mL的包被液,每孔加人100μL抗原包被液,并以不加標(biāo)準(zhǔn)抗原的兩孔為對(duì)照,為反應(yīng)的0%值,將反應(yīng)板于4℃放置一夜(8個(gè)樣品,分3個(gè)平行,4個(gè)100%值孔;共28+2孔)。(2)標(biāo)準(zhǔn)牛IgG與初級(jí)抗體一兔抗牛血清的反應(yīng)。將標(biāo)準(zhǔn)IgG(10mg/mL)用稀釋液作二倍稀釋得到一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)牛IgG(4μg/mL至0.325μg/mL)各200μL,加到入32倍稀釋好的200μL的
ELISA試劑盒可以檢測(cè)血清嗎2015/04/08
*:ELISA試劑盒如沒(méi)有提供專(zhuān)門(mén)用于血清血漿樣本的緩沖液,只是有一個(gè)籠統(tǒng)的或統(tǒng)一的稀釋液,那么只要用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入所測(cè)種屬的血清直接加樣和用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入提供的統(tǒng)一的緩沖液中同時(shí)檢測(cè),也可得出該ELISA試劑盒是否可直接用來(lái)檢測(cè)血清血漿樣本。第二:如沒(méi)有提供專(zhuān)門(mén)用于血清血漿樣本的緩沖液,那么只要用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入所測(cè)種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入PBS緩沖液中同時(shí)檢測(cè)對(duì)比,這一點(diǎn)是上海邦景重點(diǎn)說(shuō)明的,即可知道該試劑盒是否可以直接用來(lái)測(cè)血清
ELISA試劑盒延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間2015/04/07
ELISA試劑盒約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類(lèi)終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24小時(shí))不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類(lèi)酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中顯色是ELISA試劑盒中的zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無(wú)色,而陽(yáng)
家畜疾病系列elisa試劑盒被研制2015/04/03
獻(xiàn)血者抗-HCV酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng),但負(fù)面的NAT和RIBA不一定是*遞延,他們可能會(huì)重新接納這些捐助者作出了巨大的貢獻(xiàn),作為它答應(yīng)按期寶貴的念頭捐助者,其血液中已被證實(shí)是安全的。863計(jì)劃現(xiàn)代農(nóng)業(yè)專(zhuān)題在動(dòng)植物無(wú)特定疫害關(guān)鍵技術(shù)創(chuàng)新上取得重要突破,完善了系列重要豬病診斷的elisa試劑盒,對(duì)進(jìn)一步提高我國(guó)豬病的診斷水平將起到積極作用。豬繁殖與呼吸綜合征診斷與監(jiān)測(cè)elisa試劑盒、偽狂犬病gE鑒別elisa試劑盒、偽狂犬病gG鑒別elisa試劑盒診斷試劑盒的留存期試驗(yàn)表明,的3批試劑盒均可以在2~8
Elisa試劑盒是一次性用完嗎2015/04/02
Elisa試劑盒的規(guī)格分為96T和48T。這兩種規(guī)格的區(qū)別,簡(jiǎn)單明了的說(shuō)96T就是可以做84次實(shí)驗(yàn),48T可以做42次實(shí)驗(yàn)。前幾天看到這么一個(gè)回答說(shuō):“試劑盒建議只能用一次,不能用第二次。"當(dāng)時(shí)我就在想如果只能用一次,為什么還要48T和96T可以多次使用的量呢?這不是坑人嗎?試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年,如果你使用好了按照Elisa試劑盒要求保存,就不會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題。至于你要用幾次根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求來(lái),正常情況都是分兩到三次用完的。在實(shí)驗(yàn)時(shí)沒(méi)有一次性用完Elisa試劑盒,正確保存,可以下次再用。小鼠3-
elisa檢測(cè)中操作技術(shù)的影響2015/04/01
⑴ELISA試劑盒嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。⑵加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,ELISA試劑盒這些異物在洗板的過(guò)
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