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上海信帆生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第13年
PCR擴(kuò)增反應(yīng)三部曲以及DNA（靶序列）的制備的步驟2015/08/18
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReactionPCR)是一種體外擴(kuò)增特異性DNA片段的技術(shù)。它可以在體外特異地對目的基因進(jìn)行大量擴(kuò)增，其巧妙之處在預(yù)先設(shè)計(jì)合成二段分別與待測目的基因二端互補(bǔ)的引物，以起到指向定點(diǎn)的作用；再借助于DNA聚合酶催化的若干次擴(kuò)增反應(yīng)后，即可使特定的基因片段成百萬倍的擴(kuò)增。擴(kuò)增反應(yīng)分三步：①變性：當(dāng)通過加熱使DNA雙螺旋的氫鍵斷裂，雙鏈解離形成單鏈DNA。②褪火：當(dāng)溫度突然降低時(shí)由于模板分子結(jié)構(gòu)較引物要復(fù)雜得多，而且反應(yīng)體系中引物DNA量大大多于模板DNA
上海信帆：PCR實(shí)驗(yàn)的靈敏度和特異性2015/08/12
上海信帆生物代做PCR實(shí)驗(yàn)，包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR，電泳PCR等，歡迎。什么是PCR實(shí)驗(yàn)的靈敏度?靈敏度指的是PCR擴(kuò)增反應(yīng)能夠檢測到目的基因的zui小值。研究結(jié)果表明，影響PCR擴(kuò)增效率的因素，如模板的復(fù)雜程度與完整性、引物的純度及其與模板的結(jié)合效率、反應(yīng)溫度、DNA聚合酶的熱穩(wěn)定性與擴(kuò)增性能、反應(yīng)緩沖液的離子組成（主要指陽離子）、反應(yīng)優(yōu)化劑等等，都決定了PCR實(shí)驗(yàn)的檢測靈敏度。在*的擴(kuò)增條件下，常規(guī)PCR反應(yīng)能夠檢測到的pg(10-12g)數(shù)量級(jí)的目的基因。對于一個(gè)特定的目的基因而言，模板與
丙酮酸脫氫酶（PDH）試劑盒的測定步驟，注意事項(xiàng)以及計(jì)算方法2015/08/10
上海信帆生物代理銷售“丙酮酸脫氫酶（PDH）試劑盒”，現(xiàn)貨供應(yīng)，提供技術(shù)指導(dǎo)和售后服務(wù)，歡迎。測定步驟調(diào)零用蒸餾水于605nm處調(diào)零。樣本測定（1）取900μL工作液加入1mL玻璃比色皿，在37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）中孵育5min。（2）取出比色皿，加入50μL酶液，混勻；立即記錄605nm處初始吸光值A(chǔ)1，37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）中準(zhǔn)確反應(yīng)1min，記錄605nm處1min后的吸光值A(chǔ)2，計(jì)算ΔA=A1-A2。丙酮酸脫氫酶（PDH）試劑盒注意事項(xiàng)1、測定過程中所有試劑
ELISA實(shí)驗(yàn)中不同樣本的處理方法大全2015/08/04
上海信帆生物告訴大家：ELISA實(shí)驗(yàn)過程中各種樣本不同的處理方法在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根
乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒的試劑組成以及操作列表2015/07/27
上海信帆生物代理銷售“乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒”，現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎大家。乳酸脫氫酶（LactateDehydrogenase，LDH）試劑盒測定意義：LDH（EC1.1.1.27）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著NAD+/NADH之間互變。測定原理：LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步與2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。需自備的儀器和用品：可見分光光度計(jì)
上海信帆：通用RT-PCR試劑盒（AMV）試劑盒構(gòu)成2015/07/23
通用RT-PCR試劑盒(AMV)本試劑盒適用于各種RNA制品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)以及隨后的PCR擴(kuò)增。它采用AMV進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，能夠獲得更長的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。同時(shí)，在20ul反轉(zhuǎn)錄體系和50ulPCR反應(yīng)體系中，還可以一次性得到足夠量的PCR產(chǎn)物用于后續(xù)的克隆實(shí)驗(yàn)。本試劑盒中配置的酶均為進(jìn)口的酶。RT酶采用進(jìn)口的AMV，所以cDNA更長，基因的信息保留得更完整！反轉(zhuǎn)錄過程中特異的RNase抑制劑可有效降低由于外源RNase污染而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗的風(fēng)險(xiǎn)。本試劑盒使用方便、快捷，可廣泛用于cDNA克隆及目的基因檢
TGF ELISA試劑盒詳細(xì)操作步驟知多少，信帆生物為您解答2015/07/21
上海信帆生物代理銷售‘人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)?試劑盒’，試劑盒采用進(jìn)口材料生物試劑，專業(yè)的酶免專家，提供免費(fèi)代測，數(shù)據(jù)分析，技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品遠(yuǎn)銷全國各地。人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)?試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui
基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/9明膠酶譜法試劑盒操作原理2015/07/17
基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/9明膠酶譜法試劑盒采用酶譜法(zymography)檢測MMP-2、MMP-9活性。Zymography是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法，其靈敏度可達(dá)1nM，高于ELISA。其基本原理和程序是：制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠，含蛋白酶的樣品在此凝膠中進(jìn)行電泳，電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer孵育，凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被
關(guān)于Elisa試劑盒的發(fā)展方向2015/07/10
關(guān)于Elisa試劑盒的發(fā)展方向研究測定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展，而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生物試劑技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用。目前，分子生物學(xué)正在并zui終肯定會(huì)讓我們對整個(gè)生命科學(xué)有一個(gè)全面而*的認(rèn)識(shí)，其對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的，它使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質(zhì)的測定變得輕而易舉，并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.9
ELISA實(shí)驗(yàn)操作過程中：溫育的溫度和方式有哪些2015/07/03
ELISA實(shí)驗(yàn)操作過程中：溫育的溫度和方式有哪些以及注意事項(xiàng)，上海信帆生物給你全面的解答。溫育的溫度：育常采用的溫度有43、37℃、室溫或4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的溫育溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的zui適反應(yīng)溫度?？乖贵w反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2h產(chǎn)物的生成可達(dá)，為加速反應(yīng)，可在一定范圍內(nèi)提高反應(yīng)的溫度并在反應(yīng)過程中連續(xù)振蕩來增加抗原抗體接觸的概率?？乖贵w反應(yīng)在4℃更為*，形成的產(chǎn)物更多、更穩(wěn)定，但因所需時(shí)間太長，在ELISA檢測中一般不予采用。溫育的方式：溫育方式常采用溫箱法、微波輻射
上海信帆為大家提供：ELISA試劑盒的詳細(xì)操作步驟2015/06/30
上海信帆生物代理銷售ELISA試劑盒，現(xiàn)在我們就把ELISA的操作步驟詳細(xì)的向大家介紹一下，希望對大家有所幫助。操作步驟:1.包被過程(注意設(shè)置空白對照,陰性對照):將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當(dāng)濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?2.封閉酶標(biāo)反應(yīng)孔:5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時(shí)將封閉液加滿各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉
基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/9活性檢測試劑盒,明膠酶譜法注意事項(xiàng)2015/06/23
基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/9活性檢測試劑盒,明膠酶譜法注意事項(xiàng)上海信帆生物代理銷售“基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/9活性檢測試劑盒?”，咨詢！我們在做明膠酶譜法實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，總是會(huì)遇到很多這樣那樣的問題，那么這個(gè)基本原理是什么，我們操作過程中應(yīng)該注意哪些問題呢，上海信帆生物為您答疑。酶譜法的基本過程是先將樣品進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1％明膠）電泳分離，然后在有二價(jià)金屬離子存在的緩沖系統(tǒng)中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復(fù)活性，在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠，zui后用考馬斯亮藍(lán)
ELISA實(shí)驗(yàn)中，顯色和比色的注意事項(xiàng)2015/06/12
大家在做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，難免遇到顯色和比色的問題，上海信帆生物為大家詳細(xì)講解顯色和比色的問題。TMB經(jīng)HRP作用后，約40分鐘顯色達(dá)，隨即逐漸減弱，至2小時(shí)后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時(shí)間(12-24小時(shí))不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。酶標(biāo)比色儀簡稱酶標(biāo)儀，通常指于測讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。酶標(biāo)儀的
上海信帆生物：談?wù)劮琶獯鷾y服務(wù)的種類2015/06/10
談?wù)劮琶獯鷾y服務(wù)的種類放免代測服務(wù)就是放射，免疫試劑盒的簡稱,它的主要分類有以下幾種：1.細(xì)胞因子類2.性腺類3.心血管類4.糖尿病類5.腫瘤類6.甲狀腺類7.骨鈣代謝類8.腎功能類
ELISA試驗(yàn)操作中，溫育和洗板的注意事項(xiàng)2015/06/09
因?yàn)镋LISA試劑盒靈敏度高，操作簡單等特點(diǎn)，被大家所認(rèn)可。但是在做ELISA試驗(yàn)的時(shí)候，難免會(huì)遇到一些問題，今天我們就溫育和洗板的問題，給大家講解一下需要注意的事項(xiàng)。溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合，必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。溫育所需時(shí)間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時(shí)間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃
上海信帆告訴大家：醫(yī)療的概念2015/06/02
隨著人類基因組測序技術(shù)的革新、生物醫(yī)學(xué)分析技術(shù)的進(jìn)步、以及大數(shù)據(jù)分析工具的出現(xiàn)，醫(yī)療的時(shí)代已經(jīng)到來，它將為樣本提供更、、安全的診斷及治療。中美等主要國家都在此概念基礎(chǔ)上進(jìn)一步提出了各自的醫(yī)療計(jì)劃，系統(tǒng)性地開展相關(guān)研究來向研究實(shí)踐提供醫(yī)療的科學(xué)依據(jù)。中國各大醫(yī)院的院長也敏銳地看到了醫(yī)療的未來，在醫(yī)院的管理、規(guī)劃布局、科研等多方面提前布局。“無論未來疾病往哪個(gè)方向發(fā)展，無論疾病的發(fā)病率高了或者低了，醫(yī)療的判斷不會(huì)過時(shí)，未來一定會(huì)需要?！北贝?醫(yī)院院長劉玉村說道。醫(yī)療就是基因測序嗎？基因測序是醫(yī)療判斷
上海信帆生物:從瘋牛病到老年癡呆癥的共同敵人2015/05/30
阿爾茲海默癥、帕金森綜合癥、亨廷頓病等常見的神經(jīng)退行性疾病對人類健康構(gòu)成極大威脅，其發(fā)病機(jī)理和治療手段也讓科學(xué)家困惑多年。研究發(fā)現(xiàn)，所有的神經(jīng)退行性疾病和瘋牛病一樣，有特定的變性蛋白纖維（或顆粒）形成。由此，變性蛋白將看起來毫不相關(guān)的疾病在一起，它暗示科學(xué)家可以借此去尋找這些疾病共同的治療靶點(diǎn)。鐘貞（英國醫(yī)學(xué)研究中心分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室）1瘋牛病的起源瘋牛病(“madcow”disease)學(xué)名為“牛海綿狀腦病”(BovineSpongiformEncephalopathy,BSE)，是一種發(fā)生在牛
上海信帆生物：草莓專家揭開致癌農(nóng)殘的真相2015/05/23
4月26日，央視財(cái)經(jīng)記者隨機(jī)在北京新發(fā)地農(nóng)產(chǎn)品批發(fā)市場、美廉美超市、昌平采摘園以及路邊的草莓?dāng)?，購買了8份草莓樣品，送到北京農(nóng)學(xué)院進(jìn)行檢測。初步檢測結(jié)果顯示，百菌清含量zui高的是在新發(fā)地購買的4號(hào)草莓樣品；乙草胺zui高的是1號(hào)樣品，殘留量為0.367毫克每公斤，如果參照歐盟標(biāo)準(zhǔn)0.05毫克每公斤計(jì)算，該樣品超標(biāo)7倍多。節(jié)目引用專家觀點(diǎn)稱，如果長期攝入乙草胺含量較高的食物，有可能造成中毒，甚至具有致癌性。專家：草莓檢出乙草胺很奇怪此次檢測中，一個(gè)并不為人熟知的專業(yè)詞匯躍入人們視野——乙草胺。北
上海信帆生物-明膠酶譜法試劑盒檢測步驟2015/05/20
明膠酶譜法試劑盒檢測步驟1.制備含MMP底物蛋白的SDS-PAGE凝膠：推薦分離膠濃度為8%。按照標(biāo)準(zhǔn)程序制備SDSPAGE凝膠。將10×substrateG融化，并90oC加熱5分鐘。分別在濃縮膠和分離膠中額外加入10×substrateG并使之稀釋10倍，混勻后加入過硫酸銨和TEMED，等待凝膠聚合。2.待測樣品1:1稀釋于2×SDS-PAGEnon-reducingbuffer（用完后可自行配制：4%SDS,100mMTris-ClpH6.8,20%glycerol,0.02%bromop
上海信帆生物:提高肝癌患者生活質(zhì)量，關(guān)注放射治療技術(shù)2015/05/19
肝癌放療技術(shù)研究已有多年歷史，由于正常肝組織放射耐受性的限制，使所給劑量達(dá)不到腫瘤的*劑量，治療效果難以令人滿意，以致長期以來不為人所接受。肝癌手術(shù)切除是zui有效的治療方法，但肝癌發(fā)病隱匿，研究上大部分樣本就診時(shí)已失去手術(shù)治療機(jī)會(huì)。肝癌的放療研究已有多年的歷史，然而由于正常肝組織放射耐受性的限制，使所給劑量達(dá)不到腫瘤的*劑量，治療效果難以令人滿意，以致長期以來不為人所接受。西安蘭州*323醫(yī)院的吳發(fā)偉與第四軍醫(yī)大學(xué)遺傳與發(fā)育教研室的馮蕾對肝癌的放射治療研究進(jìn)行總結(jié)，研究文章刊登在漢斯出版社《世
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