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打開后的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)如何保存和維護(hù)？2022/03/09: 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書中有時(shí)會(huì)規(guī)定“一次性使用”，這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一般不穩(wěn)定或具有較高的量值準(zhǔn)確度，如安瓿瓶分裝的國家1級(jí)溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，在打開包裝后量值易發(fā)生超出不確定度范圍的變化，應(yīng)按照要求盡快移取，不能留存后反復(fù)使用?？梢淮涡灾苽涑芍虚g標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液保存、使用。對(duì)于可多次使用的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，確保標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包裝單元開封后的恰當(dāng)保存和包裝、證書的完整性非常重要，某些情況下，有必要根據(jù)證書要求，對(duì)剩余的物質(zhì)進(jìn)行重新密封包裝。取樣時(shí)應(yīng)采取防止沾污的措施。如何做好標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用環(huán)節(jié)中的維護(hù)常常是用戶困惑的問題。國際通用計(jì)

選擇、購買標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)考慮哪些要素？2022/03/09: 在選擇、購買標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，應(yīng)考慮以下要素：（1）特性量的種類及定值方法：某些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可能只適用某一特定方法或?qū)兕I(lǐng)域的應(yīng)用，某些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的值有特殊規(guī)定，如含結(jié)晶水的值，應(yīng)對(duì)證書中該類說明加以注意，防止誤選誤用；（2）特性量水平：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特性量水平應(yīng)與日常測(cè)量樣品的水平匹配；（3）可接受的不確定度水平：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特性量的相關(guān)不確定度水平應(yīng)與日常測(cè)量中的精密度和正確度限度要求匹配；（4）基體及可能的干擾：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)用于開展方法確認(rèn)、質(zhì)量控制以及一些基體效應(yīng)較為嚴(yán)重的測(cè)量方法的校準(zhǔn)時(shí)，基體應(yīng)與日常測(cè)量樣品

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)期間核查方法2022/03/09: 確定期間核查的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的具體情況和影響因素來確定期間核查的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在使用過程中影響穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性的因素很多,它受化學(xué)、物理和生物等因素的影響。溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)移入儲(chǔ)備瓶后,就受儲(chǔ)備瓶、儲(chǔ)存條件、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)本身的濃度和生物因素等的影響。儲(chǔ)備瓶不潔凈、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)會(huì)被污染變性。瓶塞不密封溶劑揮發(fā),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度就會(huì)改變。有機(jī)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng)有時(shí)會(huì)受霉菌污染,從而影響標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。反復(fù)使用時(shí)操作不嚴(yán)謹(jǐn)吸管會(huì)帶入污染物,也會(huì)影響標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。固體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定

關(guān)于酸式滴定管的使用舉例介紹2022/03/08: 例：若用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉來滴定待測(cè)鹽酸溶液，分析下列操作會(huì)對(duì)滴定結(jié)果產(chǎn)生什么影響：（1）堿式滴定管水洗之后未用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液潤(rùn)洗。分析：不正確操作：未用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液潤(rùn)洗堿式滴定管。直接后果：稀釋了標(biāo)準(zhǔn)堿溶液。對(duì)V（標(biāo)）的影響：使用的標(biāo)準(zhǔn)堿溶液增多，V（標(biāo)）增大。造成的滴定誤差：使最后的結(jié)果偏高。（2）a、滴定前堿式滴定管中未將氣泡趕盡，滴定后氣泡消失。分析：不正確操作：未將滴定管中的氣泡趕盡，滴定后氣泡消失。直接后果：經(jīng)讀數(shù)后計(jì)算出的體積并非實(shí)際滴定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。對(duì)V（標(biāo)）的影響：使V（標(biāo)）增大；造成

核酸電泳（RNA電泳與DNA電泳）了解一下2022/03/08: （一）DNA的凝膠電泳：凝膠電泳是分子克隆的中心技術(shù)之一。瓊脂糖凝膠用于分離大于200～1000bp的片段;操作簡(jiǎn)單、快速，且分離范圍廣，分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝膠用于分離5－500bp的片段;效果好、分辨率*，相差1bp的DNA/片斷就能分開，能容納相對(duì)大量的DNA，用于核苷酸多態(tài)性的分析。瓊脂糖凝膠電泳的基本過程材料：電泳緩沖液（常用TAE或TBE）、電泳級(jí)瓊脂糖、溴化乙錠溶液（核酸顯示劑）、加樣緩沖液（保證核酸不在加樣孔中擴(kuò)散和用于電泳時(shí)間的指示系統(tǒng)）、水平凝膠電泳裝置及制膠系統(tǒng)、直流電

微生物實(shí)驗(yàn)室菌種管理相制度2022/03/08: 微生物實(shí)驗(yàn)室如果從事致病菌檢測(cè)、培養(yǎng)基質(zhì)控驗(yàn)收、方法驗(yàn)證等相關(guān)工作，就應(yīng)該備有質(zhì)控菌株。實(shí)驗(yàn)室需對(duì)使用的質(zhì)控菌株進(jìn)行規(guī)范性管理，以便有效地、安全地使用，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。首先、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定菌種管理制度內(nèi)容包括菌種申購、保管、領(lǐng)用、使用、傳代、存儲(chǔ)等方面的內(nèi)容，質(zhì)控菌種申購應(yīng)由專人申購，保管由專人雙人雙鎖管理，領(lǐng)用及使用應(yīng)填寫記錄，使用時(shí)應(yīng)對(duì)菌種進(jìn)行純度及生化特性進(jìn)行菌種核查驗(yàn)證并記錄，存儲(chǔ)應(yīng)有專門的冰箱、超低溫冰箱進(jìn)行存儲(chǔ)，使用完的菌株應(yīng)按要求銷毀處理。第二、實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)需求購買相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)菌

微生物菌種的活化步驟你知道嗎2022/03/08: 菌種活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物，即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過程，因?yàn)楸４鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同，所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國際國內(nèi)常用的菌種保存方法包括：定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結(jié)法、液氮超低溫凍結(jié)法。對(duì)于不同的保存方式活化的方式也不同：1.定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡(jiǎn)單，直接轉(zhuǎn)接即可

培養(yǎng)基處理消毒的詳細(xì)方法你知道嗎2022/03/07: 培養(yǎng)基的種類繁多，市場(chǎng)中的商品更是參差不齊，價(jià)格不一。而在產(chǎn)品的使用中，滅菌消毒是一個(gè)重要步驟，而方法更是多種多樣，那么給培養(yǎng)基處理消毒的詳細(xì)方法您會(huì)操作嗎？1.通常采用高壓濕熱滅菌法121℃滅菌15分鐘，特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進(jìn)行滅菌。2.部分培養(yǎng)基，只能煮沸滅菌。3.對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質(zhì)，應(yīng)采用膜過濾方法進(jìn)行過濾除菌。4.即用型試劑不需滅菌，應(yīng)參見相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或供應(yīng)商使用說明，直接使用。器具和設(shè)備消毒處理方法1.濕熱滅菌：采用高壓滅菌器，121℃滅菌20分鐘，適用于玻璃器皿、移液器吸

微生物檢測(cè)選擇合適的培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間2022/03/07: 微生物EM（環(huán)境監(jiān)測(cè)）檢測(cè)中最常遇到的問題之一與培養(yǎng)策略和培養(yǎng)基的選擇有關(guān)。使用一種培養(yǎng)基（TSA）或者兩種培養(yǎng)基（TSA和SDA），使用單個(gè)溫度、兩個(gè)溫度，是否從低溫到高溫，還是高溫到低溫。影響微生物回收率的因素有：結(jié)果觀察時(shí)間(單一溫度通常比兩個(gè)溫度早)、成本(只用TSA比使用TSA+SDA便宜)以及微生物回收率的高低。很少有研究報(bào)告回收率相關(guān)的培養(yǎng)條件選擇，但是，已有報(bào)告單一溫度條件30-35℃培養(yǎng)對(duì)于霉菌回收的不如兩個(gè)溫度培養(yǎng)的好。下面的數(shù)據(jù)總結(jié)了在我們實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的一項(xiàng)小研究。采用標(biāo)準(zhǔn)T

液體培養(yǎng)基如何接種？遠(yuǎn)慕為您解答2022/03/07: 液體培養(yǎng)基接種是用接種環(huán)、移液器或吸管等工具，將菌體或菌液移至試管、三角瓶等容器中的液體培養(yǎng)基中的一種接種方法。其操作與前面斜面接種基本相同，但應(yīng)注意：液體培養(yǎng)基試管管口或三角瓶瓶口略向上以免培養(yǎng)液流出；加入菌體時(shí)，應(yīng)使接種環(huán)與管內(nèi)壁輕輕研磨，使菌體擦下，塞好棉塞后，將試管在手掌心中輕輕敲打或輕輕搖晃三角瓶，使菌體混合均勻。試管液體接種試管液體接種是將一定體積的樣品混懸液加入到盛有指/定液體培養(yǎng)基的試管內(nèi)，或?qū)⒁欢w積、按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定條件下培養(yǎng)過的培養(yǎng)液接入盛有指/定液體培養(yǎng)基的試管內(nèi)（有時(shí)是指接種

植物組織培養(yǎng)基所需的五類成分2022/03/07: 1、無機(jī)營(yíng)養(yǎng)物無機(jī)營(yíng)養(yǎng)物主要由大量元素和微量元素兩部分組成。大量元素中，氮源通常有硝態(tài)氮或銨態(tài)氮，但在培養(yǎng)基中用硝態(tài)氮的較多，也有將硝態(tài)氮和銨態(tài)氮混合使用的。磷和硫則常用磷酸鹽和硫酸鹽來提供。鉀是培養(yǎng)基中主要的陽離子，在近代的培養(yǎng)基中，其數(shù)量有逐漸提高的趨勢(shì)。而鈣、鈉、鎂的需要?jiǎng)t較少。培養(yǎng)基所需的鈉和氯化物，由鈣鹽、磷酸鹽或微量營(yíng)養(yǎng)物提供。微量元素包括碘、錳、鋅、鉬、銅、鈷和鐵。培養(yǎng)基中的鐵離子，大多以螯合鐵的形式存在，即FeSO4與Na2—EDTA（螯合劑）的混合。2、碳源培養(yǎng)的植物組織或細(xì)胞

這三種生物技術(shù)常用實(shí)驗(yàn)?zāi)氵€不會(huì)操作？2022/03/04: 一、總RNA的提?。═rizol法提?。┰谑占缴锊牧现?，最好能即刻進(jìn)行RNA制備工作。若需暫時(shí)儲(chǔ)存，則應(yīng)以液氮將生物材料急速冷凍后，儲(chǔ)存于-80℃冷凍柜。在制備RNA時(shí)，將儲(chǔ)存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細(xì)胞，不可以先行解凍，以避免RNase的作用。1.提取組織RNA時(shí)，每50～100mg組織用1mlTrizol試劑對(duì)組織進(jìn)行裂解；提取細(xì)胞RNA時(shí)，先離心沉淀細(xì)胞，每5-10╳106個(gè)細(xì)胞加1mlTrizol后，反復(fù)用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細(xì)胞；2.將上述組織或細(xì)胞的T

RNA提取時(shí)RNA降解原因2022/03/04: 1)新鮮細(xì)胞：裂解液的量不足，使得裂解不充分。2)新鮮組織：某些含有內(nèi)源性核酸酶的樣品，很難避免RNA酶的降解，建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎，并且，勻漿時(shí)采用更多的裂解液。3)冷凍樣品：樣品取材后應(yīng)該迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放。如果未經(jīng)液氮速冷直接轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放，會(huì)造成RNA緩慢降解。樣品研磨后，在液氮?jiǎng)倓倱]發(fā)完時(shí)，將樣品迅速轉(zhuǎn)移到含裂解液的容器中，立即混勻勻漿。4)外源RNA酶的污染：試劑、器械等實(shí)驗(yàn)用品應(yīng)該采用DEPC水滅菌處理。5)內(nèi)源RNA酶的污

核酸濃度測(cè)定的五種方法分享2022/03/04: 1、定磷法核糖核酸（RNA）含磷量約為9.5%，脫氧核糖核酸（DNA）含磷量約為9.2%，采用定磷法可準(zhǔn)確測(cè)出磷含量，進(jìn)而折算出樣品中核酸含量。原理：在酸性條件下，定磷試劑中的鉬酸銨以鉬酸形式與樣品中的磷酸反應(yīng)生成磷鉬酸，當(dāng)還原劑存在時(shí)磷鉬酸立即轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色的還原產(chǎn)物——鉬藍(lán)；鉬藍(lán)最大的剛吸收在650-660nm波長(zhǎng)處，根據(jù)吸光值制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而確定核酸的濃度。測(cè)定范圍在1-10μg優(yōu)缺點(diǎn)：簡(jiǎn)單、快速；但易受蛋白與核苷酸的影響。2、定糖法原理：核糖中的戊糖可在濃鹽酸或者濃硫酸作用下脫水生成醛類化

核酸分離與純化的原則、操作步驟2022/03/04: 磁珠提核酸磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸，從而將核酸和蛋白質(zhì)等其細(xì)胞中其他物質(zhì)分離。本文主要概述了核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟、磁珠法純化DNA原理。核酸分離與純化的原則核酸在細(xì)胞中總是與各種蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的。核酸的分離主要是指將核酸與蛋白質(zhì)、多糖、脂肪等生物大分子物質(zhì)分開。在分離核酸時(shí)應(yīng)遵循以下原則：保證核酸分子一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性；排除其他分子污染。核酸分離與純化的步驟大多數(shù)核酸分離與純化的方法一般都包括了細(xì)胞裂解、酶處理、核酸與其他生物大分子物質(zhì)分離、核酸純

核酸檢測(cè)流程你知道嗎2022/03/03: HIV核酸定性檢測(cè)技術(shù)，其檢測(cè)過程分為核酸提取、逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA、PCR擴(kuò)增反應(yīng)、擴(kuò)增產(chǎn)物定性分和結(jié)果判定和完成報(bào)告單。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)具體步驟如下：1.核酸提取使用硅膠柱離心、磁性硅膠顆粒分離方法以及自動(dòng)化儀器等商品化試劑或設(shè)備并按說明書操作。提取RNA時(shí)應(yīng)注意防止RNA降解。DNA應(yīng)置于-20℃保存，RNA和需長(zhǎng)期保存的DNA應(yīng)置于-80℃保存。2.逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA合成反應(yīng)需使用逆轉(zhuǎn)錄引物、dNTPs、逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、DTT、緩沖液和適量無RNA/DNA酶的超純水以及R

淺談細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)及其吸收系統(tǒng)2022/03/03: 1．細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及作用細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是指能滿足細(xì)菌生命活動(dòng)所需的物質(zhì)，一般包括水分、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子，它參與細(xì)菌的細(xì)胞組成、構(gòu)成酶的活性成分和提供細(xì)菌各種生命活動(dòng)所需的能量。（1）碳源和氮源是常量營(yíng)養(yǎng)物，細(xì)菌需求量大。不同營(yíng)養(yǎng)類型細(xì)菌利用不同碳源，大多數(shù)細(xì)菌利用它們組建新的細(xì)胞組分并提供了細(xì)胞的能量。氮源作為菌體的成分如蛋白質(zhì)、核酸等合成的主要原料，一般不作為能源。（2）無機(jī)鹽作為各種酶的激活因子或輔助因子維持酶的活性，構(gòu)成菌體成分，參與細(xì)胞膜的物質(zhì)運(yùn)輸和蛋白質(zhì)合成與菌體內(nèi)外的滲透

如何選擇符合實(shí)驗(yàn)要求的核酸染料？2022/03/03: 核酸染料是一種靈敏、穩(wěn)定和相對(duì)安全的熒光核酸染色試劑，是生物實(shí)驗(yàn)中*的一分子，尤其是在核酸檢測(cè)相關(guān)試驗(yàn)中，所以核酸染料對(duì)于分子生物學(xué)相關(guān)專業(yè)的學(xué)生來說并不陌生，該如何選擇適合自己使用的核酸染料呢？以下從幾個(gè)方面來說明：1、安全性：如果選擇EB替代染料，那么染料的安全性就是一個(gè)非常重要的指標(biāo)。安全性評(píng)估主要的檢測(cè)有Ames測(cè)試、細(xì)胞滲透性實(shí)驗(yàn)、染色體畸變和正向突變分析、口服毒性分析等。在安全性方面，具有較多檢測(cè)項(xiàng)目和機(jī)構(gòu)出具檢測(cè)報(bào)告的核酸染料，安全性可能會(huì)更高；另外在一些報(bào)道或?qū)Ρ葦?shù)據(jù)中，我們也可

關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)基的五大基本要求2022/03/03: 現(xiàn)代生物技術(shù)均通過細(xì)胞作為載體來進(jìn)行，無論是基因治療、干細(xì)胞、克隆技術(shù)都在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的。細(xì)胞的生長(zhǎng)需要一定的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，用于維持細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基，即指所有用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存細(xì)胞用的物質(zhì)，就其本意上講為人工模擬體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，使細(xì)胞在此環(huán)境中有生長(zhǎng)和繁殖的能力。它是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。細(xì)胞培養(yǎng)基其組成成分主要有：水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)離子及其他一些入核酸降解物、激素等。細(xì)胞培養(yǎng)基的基本要求體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿

什么樣的試劑才能做基準(zhǔn)試劑？2022/03/02: 基準(zhǔn)試劑可直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的化學(xué)物質(zhì)，也可用于標(biāo)定其他非基準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，實(shí)驗(yàn)室暫無儲(chǔ)備時(shí)，一般可由優(yōu)級(jí)純?cè)噭?dān)當(dāng)?！緱l件】基準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)該符合以下要求：①組成與它的化學(xué)式嚴(yán)格相符。②純度足夠高，級(jí)別一般在優(yōu)級(jí)純以上。③應(yīng)該很穩(wěn)定，可以長(zhǎng)期保存。④參加反應(yīng)時(shí)，按反應(yīng)式定量地進(jìn)行，不發(fā)生副反應(yīng)。⑤有較大的分子量，在配制標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)可以減少稱量誤差。【常見物質(zhì)】一般常用的基準(zhǔn)試劑有：三氧化/二砷、金屬銅、氨基磺酸、重鉻酸鉀、鄰苯二甲酸氫鉀、碘酸鉀、氯化鈉、碳酸鈉、草酸鈉、氟化鈉、金屬鋅、草酸、硝酸銀等。

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