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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中怎樣預(yù)防真菌污染?2022/03/23
1、你若隨便穿戴,我便生死相依你進(jìn)細(xì)胞房時(shí)不換鞋,不戴口罩,不戴手套,雖然感覺呼吸暢快全身輕松,但其實(shí)是進(jìn)細(xì)胞房的最大忌諱!有更嚴(yán)格的細(xì)胞房連帽子都要戴上。這么隨便的就把我?guī)нM(jìn)去見你的細(xì)胞,難怪她會(huì)被你氣死,換鞋就不說了,你應(yīng)該也知道有真菌吧。但你根本不能保證你口腔支原體是不是會(huì)污染細(xì)胞,每當(dāng)你興高采烈地給你的細(xì)胞哈一口氣送溫暖的時(shí)候,細(xì)胞就……狗帶了。不戴手套,根本就清除不掉你手上的細(xì)菌真菌,要不你試試拿火燎一下你的手,焦了才算把我除干凈。2、你想用紫外和酒精擺脫我,卻也無法斬?cái)辔覍?duì)你的情絲雖
真菌毒素檢測(cè)的采樣、取樣和留樣2022/03/23
真菌毒素檢測(cè)的采樣按照正確的步驟進(jìn)行采樣和樣品制備是保證真菌毒素檢測(cè)質(zhì)量的基礎(chǔ)。這是獲得準(zhǔn)確真菌毒素檢測(cè)結(jié)果的最重要也是經(jīng)常被忽視的步驟。如果沒有正確采集和制備樣品,真菌毒素檢測(cè)結(jié)果的不確定性會(huì)很高。第一步是從圍欄里、卡車車廂、儲(chǔ)物箱或喂養(yǎng)動(dòng)物的食槽和水槽中獲得一份具有代表意義的谷物、飼料成品或食物樣品。采樣設(shè)備1.手動(dòng)取樣(1)糧食空心取樣管或?qū)嶒?yàn)者(駁船、箱車、卡車、料斗容器)(2)取樣袋2.抽氣取樣或液壓探針(底部升降梯或加工廠探針)3.機(jī)械取樣系統(tǒng)-分流型(自動(dòng)對(duì)糧食流剖面采樣或截?cái)嗉Z食
M蛋白的檢測(cè)與鑒定了解一下2022/03/22
一、M蛋白的基礎(chǔ)知識(shí)M蛋白是漿細(xì)胞或B淋巴細(xì)胞單克隆大量增殖時(shí)所產(chǎn)生的一種異常免疫球蛋白,其氨基酸組成及排列順序十分均一,空間構(gòu)象、電泳特征也*相同,本質(zhì)為免疫球蛋白或其片段(輕鏈、重鏈等)。由于它產(chǎn)生于單一克隆,又常出現(xiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、惡性淋巴瘤病人的血或尿中,故稱M蛋白。這些M蛋白大多無抗體活性,所以又稱為副蛋白。M蛋白血癥可分為惡性與意義不明的兩大類。惡性M蛋白血癥多見于多發(fā)性骨髓瘤(包括輕鏈?。⒕耷虻鞍籽Y、重鏈病、7SIgM?。⊿olomen-Konkel?。?、半分子病
關(guān)于牛血清白蛋白的作用及常見問題2022/03/22
牛血清白蛋白是牛血清中的一種球蛋白,又稱第五組分。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生物和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白分子量為66.446kDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白多用在生化研究、遺傳工程和醫(yī)藥研究、醫(yī)藥保健食品、調(diào)味品、維持滲透壓、pH緩沖、載體作用等。牛血清白蛋白的作用牛血清白蛋白一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能
檢測(cè)蛋白用WB實(shí)驗(yàn)還是ELISA實(shí)驗(yàn)好?2022/03/22
檢測(cè)蛋白的實(shí)驗(yàn)有很多種,WB實(shí)驗(yàn)和ELISA實(shí)驗(yàn)是比較常用的兩種實(shí)驗(yàn)方法,這兩種方法哪一種的實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可靠呢?有些人說ELISA自己包被抗體的話會(huì)比較麻煩,WB相比更加科學(xué),容易被雜志接納。但是血清中沒有內(nèi)參可以選擇。是不是ELISA實(shí)驗(yàn)操作要簡(jiǎn)單很多,那么又如何來解決這樣的一個(gè)問題呢?今天遠(yuǎn)慕來為您解答這個(gè)疑惑。?一、WB和ELISA的敏感性有所區(qū)別。雖然前者用ECL顯色敏感度可達(dá)pg級(jí),但不同的樣品來源和抗體的質(zhì)量,不能保證每次都到這個(gè)級(jí)別;而ELISA可以達(dá)到ng級(jí)。也就是說ELISA更
微生物菌種的活化操作步驟2022/03/22
菌種活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過程,因?yàn)楸4鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國(guó)際國(guó)內(nèi)常用的菌種保存方法包括:定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結(jié)法、液氮超低溫凍結(jié)法。對(duì)于不同的保存方式活化的方式也不同:1.定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡(jiǎn)單,直接轉(zhuǎn)接即可
氨基黑10B染色液(0.5%)說明書2022/03/21
簡(jiǎn)介:氨基黑10B可用于檢測(cè)印跡膜上的蛋白,轉(zhuǎn)移的蛋白大于50ng/條帶時(shí),在淡藍(lán)色的背景上可呈現(xiàn)深藍(lán)色的條帶,在測(cè)定內(nèi)部序列時(shí),對(duì)于蛋白質(zhì)測(cè)序和蛋白質(zhì)原位切割,氨基黑是最/常用的染色劑氨基黑10B染色液(0.5%)主要由氨基黑10B、弱酸、去離子水等組成,適用于PVDF膜、硝酸纖維素膜、尼龍膜,其優(yōu)點(diǎn)是溫和的條件使蛋白提取降到最/低。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。產(chǎn)品組成:名稱規(guī)格Storage氨基黑10B染色液(0.5%)100mlRT避光使用說明書1份自備材料:蒸餾水或
遠(yuǎn)慕技術(shù):質(zhì)粒純度不高怎么辦?2022/03/21
1.混有蛋白:不要使用過多菌體。經(jīng)溶液P1、P2、P3處理,離心后溶液應(yīng)為澄清的,如果還混有微小蛋白懸浮物可再次離心去除后再進(jìn)行下一步驟。2.混有RNA:RNaseA處理不*,請(qǐng)減少菌體用量或加入溶液P3之后室溫放置一段時(shí)間。如果溶液P1已保存6個(gè)月以上,請(qǐng)?jiān)谌芤篜1中添加RNaseA。3.混有基因組DNA:加入溶液P2和P3后應(yīng)溫和混勻,如果劇烈振蕩,可能把基因組DNA剪切成碎片從而混雜在質(zhì)粒中。如果加入溶液P2后過于粘稠,無法溫和混勻,請(qǐng)減少菌體用量。細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞和DNA的降解
質(zhì)粒提取試劑盒中各溶液配方及作用2022/03/21
提質(zhì)粒是分子生物學(xué)中基本,easy的實(shí)驗(yàn)。*不需要借助大腦,直接照著提取試劑盒中的操作說明傻瓜操作即可(其實(shí)應(yīng)該由機(jī)器人在實(shí)驗(yàn)室中操作這些簡(jiǎn)單卻耗時(shí)的實(shí)驗(yàn))。盡管操作簡(jiǎn)單,提質(zhì)粒卻也是一個(gè)比較重要的步驟,提出質(zhì)粒的質(zhì)量和數(shù)量將直接決定著后續(xù)實(shí)驗(yàn)室的成敗。當(dāng)我們按照試劑盒中操作說明進(jìn)行操作時(shí),我們會(huì)看到P1,P2,N3,PE,EB等不同的溶液(不同試劑盒可能標(biāo)識(shí)不同)。那么大家是否知道每瓶溶液中裝的什么?它們?cè)谫|(zhì)粒提取過程中的作用又是怎樣的?質(zhì)粒提取采用的是強(qiáng)堿裂解法(alkalinelysis)
細(xì)胞一直被污染,細(xì)胞間無菌技術(shù)知多少?2022/03/21
養(yǎng)細(xì)胞真的是磨練人性格的一項(xiàng)工作。細(xì)菌真菌支原體各種污染都經(jīng)歷過了,能把癌癥細(xì)胞養(yǎng)到絕種也是很無奈。生活的閱歷就是最大的智慧,所以今天跟大家匯總了細(xì)胞間常用的無菌技術(shù)操作指南如下:1、我們要挑選了一個(gè)平時(shí)很少有人用的實(shí)驗(yàn)室作為無菌室,超凈臺(tái)不能放在靠近門口和窗戶的位置,這個(gè)區(qū)域要保持干凈無灰塵。為保證超凈臺(tái)工作面的無菌,使用前需用75%的乙醇擦拭工作面。2、每天實(shí)驗(yàn)開始時(shí)候,超凈臺(tái)/實(shí)驗(yàn)間照20分鐘紫外是不錯(cuò)的選擇。拿培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)液時(shí)候請(qǐng)托下面拿,切忌不要拿瓶頸部位。3、工作前和工作后,都要對(duì)超
細(xì)胞支原體污染原因、來源及預(yù)防措施2022/03/21
細(xì)胞株若受到細(xì)菌、真菌、支原體、或是特定病毒等之污染時(shí),會(huì)嚴(yán)重的影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。而細(xì)菌、真菌等之微生物污染時(shí),較易自培養(yǎng)基等的外觀變化察覺。但是若受到支原體之污染時(shí),細(xì)胞之外觀較無明顯變化,但是其污染會(huì)造成細(xì)胞之生長(zhǎng)速率緩慢、細(xì)胞產(chǎn)生病變之型態(tài)改變等等變化。各國(guó)細(xì)胞庫(kù)支原體污染的統(tǒng)計(jì)表,如下:國(guó)家受支原體污染(%)報(bào)告年度USA-FDA151993(past30years)USA-ATCC15-201992Japan-(IFO,RIKEN,JCR80~30~2219811987-19931998
BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度原理2022/03/18
BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度原理:BCA與二價(jià)銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠,即BCA工作試劑。在堿性條件下,BCA與蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí),蛋白質(zhì)將Cu2+還原為Cu+,工作試劑由原來的蘋果綠色變?yōu)樽仙珡?fù)合物。562nm下其光吸收強(qiáng)度與蛋白質(zhì)濃度成正比。BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒,遠(yuǎn)慕的蛋白質(zhì)定量試劑盒(BCA法)提供一個(gè)簡(jiǎn)單,快捷,兼容去污劑的方法,準(zhǔn)確定量總蛋白。成分:試劑A,100mL試劑B,2mL標(biāo)準(zhǔn)蛋白(BSA)1mL×2,1mg/mL保存條件運(yùn)輸溫度:室溫(標(biāo)準(zhǔn)蛋白4~8℃運(yùn)
遠(yuǎn)慕解析蛋白質(zhì)的鹽溶、鹽析和變性2022/03/18
在中學(xué)化學(xué)教學(xué)中,在講到油脂、蛋白質(zhì)以及膠體時(shí),經(jīng)常要解釋油脂皂化反應(yīng)后高級(jí)脂肪酸鈉與甘油的分離,為何要加細(xì)小食鹽顆粒?食鹽是如何使高級(jí)脂肪酸鈉從溶液中析出的?在蛋白質(zhì)溶液中為何加少量的硫酸銨能促進(jìn)蛋白質(zhì)的溶解,而加高濃度的硫酸銨卻會(huì)使蛋白質(zhì)析出呢?而硫酸銅溶液同樣是鹽溶液卻使析出的蛋白質(zhì)不像前者那樣可溶于水呢?為此我們必須明確鹽溶、鹽析和變性的概念.一、鹽溶在蛋白質(zhì)水溶液中,加入少量的中性鹽,如硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等,會(huì)增加蛋白質(zhì)分子表面的電荷,增強(qiáng)蛋白質(zhì)分子與水分子的作用,從而使蛋白質(zhì)在水
無菌檢查和微生物限度檢查的區(qū)別2022/03/18
無菌檢查和微生物限度檢查的區(qū)別1、檢驗(yàn)方法不同(1)無菌檢查是指對(duì)藥典規(guī)定的藥品、敷料、縫線、無菌器具等品種進(jìn)行無菌檢查的方法。(2)微生物限度檢查是檢查非處方殺菌劑及其原料、輔料的微生物污染程度的一種方法。2、檢驗(yàn)要求環(huán)境不同(1)無菌檢查是在潔凈的A/級(jí)單向流通空氣區(qū)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行的。整個(gè)過程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,防止微生物污染。必須驗(yàn)證單向氣流區(qū)域和工作臺(tái)的清潔度。生物制品的無菌檢驗(yàn)按照《中國(guó)生物制品規(guī)程》中有關(guān)無菌檢驗(yàn)的規(guī)定執(zhí)行。(2)微生物限度檢查:微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度1000
pH值對(duì)微生物發(fā)酵的影響及其控制2022/03/18
一、pH值對(duì)發(fā)酵的影響發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值,對(duì)微生物生長(zhǎng)具有非常明顯的影響,也是影響發(fā)酵過程中各種酶活的重要因素。pH值對(duì)微生物的生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物合成的影響有以下幾個(gè)方面:①影響酶的活性,當(dāng)pH值抑制菌體中某些酶的活性時(shí),會(huì)阻礙菌體的新陳代謝;②影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷的狀態(tài),改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄;③影響培養(yǎng)基中某些組分的解離,進(jìn)而微生物對(duì)這些成分的吸收;④pH值不同,往往引起菌體代謝過程的不同,使代謝產(chǎn)物的質(zhì)量和比例發(fā)生改變。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝,是引起
蛋白質(zhì)與水的相互作用你了解嗎2022/03/17
水和蛋白質(zhì)是構(gòu)成一切生命的基礎(chǔ)材料。對(duì)人體來說,我們需要有二十種氨基酸才能保證細(xì)胞的正常工作。其中,有八種氨基酸是人體無法自行合成,必須由食物中攝取,稱作“必需氨基酸”,又稱作*蛋白。資料表明:這八種中如果缺少任何一種,其他則毫無用處。另外十二種是人體可以自行合成的,稱作“非必需氨基酸”。人體可以由碳水化合物、脂肪和其他氨基酸合成這些非必需氨基酸,滿足身體的需求,不一定要從食物中攝取。蛋白質(zhì)約占人體體重的16%,用來制造肌肉、血液、皮膚和許多其他的身體器官。每一克蛋白質(zhì)提供4千卡的熱量,每日攝取
生化試劑的主要成分和功能2022/03/17
生化試劑(Biochemicalreagent)是指有關(guān)生命科學(xué)研究的生物材料或有機(jī)化合物,以及臨床診斷、醫(yī)學(xué)研究用的試劑。主要有電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標(biāo)記試劑、組織化學(xué)試劑、透變劑和致癌物質(zhì)、殺蟲劑、培養(yǎng)基、緩沖劑、電鏡試劑、蛋白質(zhì)和核酸沉淀劑、縮合劑、超濾膜、臨床診斷試劑、染色劑、抗氧化劑、防霉劑、去垢劑和表面活性劑、生化標(biāo)準(zhǔn)品試劑、生化質(zhì)控品試劑、分離材料等等。(1)免疫試劑:包括抗體及抗血清、正常血清及補(bǔ)體、抗原、免疫組織化學(xué)研究用試劑、細(xì)胞培養(yǎng)用試劑、細(xì)胞分離試劑
什么是生物蛋白,如何保持生物蛋白的活性?2022/03/17
生物蛋白,也稱生物活性蛋白,活性蛋白肽,是蛋白質(zhì)中25個(gè)天然氨基酸以不同組成和排列方式構(gòu)成的從二肽到復(fù)雜的線性、環(huán)形結(jié)構(gòu)的不同肽類的總稱,是源于蛋白質(zhì)的多功能化合物?;钚噪木哂卸喾N人體代謝和生理調(diào)節(jié)功能,易消化吸收,有促進(jìn)免疫、激素調(diào)節(jié)、抗菌、抗病毒、降血壓、降血脂等作用,食用安全性*,是當(dāng)前國(guó)際食品界熱門的研究課題和ji具發(fā)展前景的功能因子。1、如何保持活性生物活性蛋白對(duì)環(huán)境的要求很高,高濃度的生物活性蛋白在常溫下保存很容易失去活性,為了確保這些珍/稀成分的特殊活性與功能,只能采取生物凍干工藝
生化試劑常見問題的幾點(diǎn)解決辦法2022/03/17
生化試劑常見問題的解決辦法1.樣品信息樣品的溶血、脂血、黃疸等會(huì)對(duì)測(cè)定成果發(fā)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此,應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)的檢測(cè)形式,并在成果核算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。2.試劑空白試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的目標(biāo)。每種試劑都有必定的空白吸光度規(guī)模,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì);有些試劑久置后變渾濁。這些狀況均可使空白吸光度升高。往往需要加大用量,才使“表觀”吸光度上升,將就過試劑空白核對(duì)的“關(guān)”,其成果為如下狀況:①線
有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與其它標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有哪些區(qū)別?2022/03/16
有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與其它標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有哪些使用區(qū)別?標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是一種物質(zhì)或物質(zhì),其屬性值已被很好地確定,并且足夠一致。認(rèn)證的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是一種有證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),其中一個(gè)或多個(gè)屬性值是通過追溯程序確定的,以準(zhǔn)確地實(shí)現(xiàn)用于表示屬性值的測(cè)量單位。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)值都帶有一個(gè)給定置信水平的不確定性。那么,已認(rèn)證的對(duì)照品和其他正在使用的對(duì)照品有什么區(qū)別呢?下面遠(yuǎn)慕給大家詳細(xì)介紹一下。首先應(yīng)明確,只有有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)提供的認(rèn)定值或標(biāo)準(zhǔn)值才能夠用于校準(zhǔn)、為其他物質(zhì)賦值以及測(cè)量正確度確認(rèn),并可通過其使用來聲明測(cè)量結(jié)果的計(jì)量溯源性。在我們的
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