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2023
09-22

mRNA技術(shù)應(yīng)用場景之TCR-T細胞療法
一、什么是TCR-T細胞療法?目前，腫瘤免疫治療方興未艾，群雄并起，其中有效的治療策略之一就是過繼細胞轉(zhuǎn)移療法（ACT）。嵌合抗原受體（CAR）和工程化T細胞受體（TCR）是近年來主要的過繼性T細胞免疫療法。TCR（Tcellreceptor）是T細胞表面的特異性受體，其α鏈和β鏈由高質(zhì)量、高親和力的抗原特異性T細胞克隆產(chǎn)生，以非共價鍵與CD3結(jié)合，形成TCR-CD3復合物，通過識別并結(jié)合MHC呈遞的抗原從而激活T細胞，促進T細胞的分裂與分化；其作用機制是向普通T細胞中引入新的基因，使得改造過的
2023
09-21

干貨分享：細胞樣本如何做多色？
“你好，我的樣本是養(yǎng)的細胞，我還能做多色組化嗎？”答案是可以！對于多重熒光免疫組化（mIHC）來說，幾乎不挑剔樣本類型，但需要攻克一個難題——多輪洗脫。傳統(tǒng)的組織樣本經(jīng)過前期處理固定包埋，再加上防脫載玻片的助力，在洗脫過程中，脫片概率相對小，即使有小部分脫落，但影響不至于很大；而細胞樣本，有可能在一張片子上，本身細胞數(shù)量就不多，如果還有脫落，可能最后“顆粒無收”。今天Absin分享的是細胞樣本做多色的方法，其中不能缺少的依舊是我們的“老演員”——抗體洗脫液（abs994）。一、建議操作步驟：1）
2023
09-20

類器官免疫共培養(yǎng)實驗方法
近年來，腫瘤免疫療法在癌癥治療中非?；馃?。腫瘤免疫學治療的目的是激發(fā)或調(diào)動機體的免疫系統(tǒng)，增強腫瘤微環(huán)境抗腫瘤免疫力，從而控制和殺傷腫瘤細胞。隨著免疫治療的興起也推動了腫瘤研究的發(fā)展，但是由于人源化體系的復雜性、免疫系統(tǒng)的部分或無效重組建等問題，致使免疫腫瘤模型面臨著巨大的挑戰(zhàn)，臨床上迫切需要能夠用于個體化驗證療效的體外模型。類器官的出現(xiàn)給腫瘤免疫治療提供了新的契機，然而，現(xiàn)有的類器官中缺乏免疫細胞限制了其發(fā)展。小愛這次給大家介紹一下基本的腫瘤類器官免疫共培養(yǎng)方法，如下：1、類器官準備1）提前一
2023
09-19

腫瘤免疫治療策略（IF 16.6）| 水凝膠微球疫苗，增強消融后抗腫瘤免疫反應(yīng)
胰腺癌對化療或免疫治療的應(yīng)答率較低。雖然微創(chuàng)不可逆電穿孔(IRE)消融術(shù)是治療不可切除胰腺癌的一種選擇，但是這種腫瘤類型的免疫抑制腫瘤微環(huán)境容易導致腫瘤復發(fā)。因此，加強內(nèi)源性適應(yīng)性抗腫瘤免疫是提高消融治療和消融后免疫治療效果的關(guān)鍵。近日，上海交通大學王忠敏教授和崔文國教授在Naturecommunications(IF=16.6)上發(fā)表了題為“Interventionalhydrogelmicrospherevaccineasanimmuneampli?erforactivatedantitum
2023
09-15

間充質(zhì)干細胞鑒定手冊
間充質(zhì)干細胞（mesenchymalstemcells，MSCs）是來源于中胚層的多能成體干細胞，廣泛存在于臍帶、骨髓、脂肪、牙髓、月經(jīng)血等組織，體外培養(yǎng)可分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等多種類型的細胞。圖1TheMesengenicProcess（圖片來源于文獻，僅供學習參考用）MSCs具有自我更新能力和多向分化潛能，能夠釋放出許多具有抗凋亡、免疫調(diào)節(jié)、促血管生成等功能的生物活性因子，可刺激組織器官再生，并且低水平表達主要組織相容性復合體（MHC）Ⅰ類分子，不表達MHC-Ⅱ類分子，不易激活
2023
09-14

實驗小白來集合！染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)實驗流程與常見問題
染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)的原理是在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復合物，并將其隨機切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過免疫學方法沉淀此復合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。一、細胞交聯(lián)與裂解在裝有20ml生長培養(yǎng)基的150mm培養(yǎng)皿中培養(yǎng)貼壁細胞，長到80%-90%密度，約107個細胞。如有必要，可進行刺激或處理。建議采用1×106個細胞作為一次ChIP的細胞量。1）在20ml培養(yǎng)基中加入終濃度為1%的甲醛，輕輕渦旋培
2023
09-13

冰凍切片如何做mIHC？
一、前言：多重熒光免疫組化(mIHC)主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù)，TSA即酪酰胺信號放大，是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。用這種方法做多重熒光染色是利用二抗上帶有的HRP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素，該熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后進行微波處理，前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉，共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復始。
2023
09-12

膜蛋白研究推薦工具——去垢劑
膜蛋白是結(jié)合或整合在細胞膜或細胞器上的一類蛋白，在各種重要的生理活動中發(fā)揮著重要作用。人類基因組約三分之一的基因都用于編碼膜蛋白[1-2]。作為生物膜功能的主要承擔者，膜蛋白負責細胞內(nèi)外和細胞間的物質(zhì)運輸、能量傳遞和信息傳導等。其功能紊亂常常與人類重大疾病相關(guān)，因此膜蛋白是一類非常重要的藥物靶點。圖1細胞膜結(jié)構(gòu)示意圖去垢劑也稱為表面活性劑，是一類同時具有親水頭部和疏水尾部的分子，能夠使脂膜解體釋放膜蛋白并維持去膜狀態(tài)下膜蛋白結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。去垢劑的雙極性和理化特性如臨界膠束濃度能夠極大影響去
2023
09-07

研究發(fā)現(xiàn)急性腎損傷的調(diào)控新機制
2023年7月17日，武漢大學鄭凌、華中科技大學黃昆及陳紅共同通訊在NatureCommunications發(fā)表題為“ArenalYY1-KIM1-DR5axisregulatestheprogressionofacutekidneyinjury”的研究論文，該研究報道腎小管特異性敲除Kim1可減輕順鉑或缺血/再灌注誘導的雄性小鼠急性腎損傷。在機制上，在AKI上下調(diào)的轉(zhuǎn)錄因子陰陽1(YY1)與KIM1的啟動子結(jié)合并抑制其表達。近年來，腎病作為繼腫瘤、心臟病之后的第三大“殺手”，全球發(fā)病率呈逐年上
2023
09-06

質(zhì)粒提取小課堂，讓你學完不emo
質(zhì)粒小科普質(zhì)粒(Plasmid)是廣泛存在于生物界中的環(huán)狀雙鏈DNA分子。目前在細菌、放線菌、真菌和不少動植物細胞中均發(fā)現(xiàn)有質(zhì)粒的存在，其中細菌質(zhì)粒是研究最深入、應(yīng)用較廣泛的[1]。因為質(zhì)粒分子本身具有復制功能的遺傳結(jié)構(gòu)，可攜帶一些遺傳信息，并且其自我復制能力和攜帶遺傳信息能力非常強大，經(jīng)過基因表達后可使其宿主細胞表現(xiàn)相應(yīng)的性狀，所以質(zhì)粒常被用作基因載體，在分子生物學、生物化學與細胞生物學等學科中得到廣泛的應(yīng)用[2]。圖1大腸桿菌質(zhì)粒分子結(jié)構(gòu)示意圖質(zhì)粒提取方法及原理質(zhì)粒的提取是分子克隆中常用的一
2023
09-05

HaCaT細胞培養(yǎng)攻略
HaCaT細胞是人類永生化表皮細胞，由角質(zhì)形成細胞培育而來的，保留了角質(zhì)形成細胞分化能力，是非腫瘤來源的人正常皮膚永生化角質(zhì)形成細胞株，與正常人角質(zhì)形成細胞分化特性相似，可以繁殖150代以上，但不是腫瘤細胞，不具有腫瘤特性。細胞名稱HaCaT（人永生化角質(zhì)形成細胞）細胞來源一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚形態(tài)上皮細胞樣生長特性貼壁生長營養(yǎng)體系89%MEM(abs9503)+10%胎牛血清優(yōu)級(abs972)+1%雙抗(abs9244)+0.2%牛腦垂體提取物(abs9119)傳代1:
2023
09-01

產(chǎn)品專題——低密度脂蛋白及其應(yīng)用
低密度脂蛋白（LowDensityLipoprotein，簡稱為LDL）是血液中五種常見脂蛋白之一，由極低密度脂蛋白(VLDL)通過脂蛋白脂肪酶(LPL)的作用使其喪失部分甘油三酯轉(zhuǎn)化而來。LDL是主要的膽固醇和膽固醇酯轉(zhuǎn)運體，占血漿脂蛋白總量的一半以上，其通過低密度脂蛋白受體(LDLR)介導的內(nèi)吞作用被肝臟和其他組織吸收。研究表明低密度脂蛋白在動脈壁內(nèi)的異常蓄積及其誘發(fā)復雜免疫炎癥反應(yīng)過程，不僅是動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)發(fā)生的始動環(huán)節(jié)，更是最終導致動脈粥樣硬化血栓形
2023
08-31

【IF分享】再也不用羨慕別人的圖片好看了
一、免疫熒光的原理免疫熒光(Immunofluorescence，IF)技術(shù)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗體再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢測組織或細胞內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）。在組織或細胞內(nèi)形成的抗原抗體復合物上含有標記的熒光素，利用熒光顯微鏡觀察標本，熒光素受外來激發(fā)光的照射而發(fā)生明亮的熒光（黃綠色或橘紅色），可以看見熒光所在的組織細胞，從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位，以及利用定量技術(shù)測定含量。二、IF分類中文全稱縮寫中文全程實驗樣本細胞免疫熒光IF
2023
08-31

細胞凍存液使用需要注意哪些
細胞凍存液(科研級)是愛必信生物研發(fā)的一款無血清、無需程序降溫的細胞凍存液，本產(chǎn)品適用細胞類型更廣，尤其對干細胞以及原代細胞有很好凍存效果。生產(chǎn)過程嚴格執(zhí)行cGMP操作標準。特點：1、是一種通用型的細胞凍存液，可用于凍存人和各種動物細胞株；2、凍存液配方，即開即用，方便快捷；3、非程序降溫，-80℃低溫冰箱長期凍存，也可液氮凍存；4、特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力；5、不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全；6、可孔板
2023
08-30

外泌體miRNA可通過細胞衰老途徑參與結(jié)腸炎發(fā)生？
外泌體是直徑為30-200nm的小囊泡，幾乎來自所有細胞[1]。外泌體中包裹了RNA、DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，通過在不同細胞之間的傳遞，介導多種生理和病理過程。作為小的非編碼單鏈RNA，microRNAs(miRNAs)通過轉(zhuǎn)錄后抑制基因表達，顯著調(diào)節(jié)細胞生長和代謝，可以被包裝在外泌體中以防止RNase的消化并進入循環(huán)，可作為潛在的疾病生物標志物[2]。圖1外泌體miRNA分泌機制2023年8月7日，武漢大學人民醫(yī)院董衛(wèi)國教授團隊在國際學術(shù)期刊GutMicrobes在線發(fā)表了題為“Exosomal
2023
08-29

多色文獻分享：腎小球壁層上皮細胞的生物學特性與多樣性
腎小球壁層上皮細胞(parietalepithelialcells，PECs)是內(nèi)襯于鮑曼囊（腎小球囊）的一層扁平上皮，與足細胞來源于同一細胞譜系，在成熟腎中兩者解剖關(guān)系鄰近，是備受關(guān)注的具備向足細胞分化潛能的“前體細胞”。在過往的大量研究中，人們發(fā)現(xiàn)PECs與新月體腎炎的形成密切相關(guān)，2023年4月23日，北京中醫(yī)藥大學徐安龍教授團隊在腎臟病期刊KidneyInternational上在線發(fā)表了題為“Singlecelllandscapeofparietalepithelialcellsinh
2023
08-25

類器官crispr-cas9基因編輯及慢病毒轉(zhuǎn)染實驗方法
近幾年，類器官研究十分火熱，在信號通路機制，藥篩藥敏等研究中對類器官模型需求激增，其中利用crispr-cas9基因編輯技術(shù)對類器官進行敲低或敲減來造模是個不錯的實驗方法，今天小愛帶大家來了解crispr-cas9基因編輯技術(shù)及慢病毒轉(zhuǎn)染方法。crispr基因編輯技術(shù)中有三個最為重要的組成部分：crRNA、sgRNA和Cas9蛋白。crRNA與Cas9蛋白形成復合物，sgRNA指引（crRNA/cas9）復合物靶向目的DNA區(qū)域定向切割DNA，從而達到基因編輯的目的。圖1crispr-cas9基
2023
08-24

細胞養(yǎng)得好，血清有門道
血清是細胞培養(yǎng)的必要成分之一，胎牛/新生牛/小牛/成牛種類繁多，加上市場上各種品牌，讓細胞小白挑花了眼，小愛圍繞以下問題帶您一站式了解。?血清為何對細胞狀態(tài)影響如此之大？?血清到底如何挑選？?絮狀物、沉淀、過濾、滅活等使用常見問題？?細胞出現(xiàn)問題如何判斷是否與血清有關(guān)？一、血清為何對細胞狀態(tài)影響如此之大？血清中含有多種已知和未知的成分，主要包括：蛋白質(zhì)和多態(tài)、多種因子、氨基酸、激素、其他微量元素及不確定成分。其中生長因子促進細胞增值，附著因子促進細胞貼壁并具有抗胰酶活性，各種蛋白質(zhì)可提供細胞生長
2023
08-23

抗體文獻分享：我國科學家在鹿角中發(fā)現(xiàn)具有強大再生潛力的干細胞群
2023年2月24日西北工業(yè)大學生態(tài)環(huán)境學院邱強教授和王文教授團隊、空軍軍醫(yī)大學西京醫(yī)院黃景輝教授團隊、長春科技學院李春義教授團隊與吉林農(nóng)業(yè)大學李志鵬教授團隊等在SCIENCE上發(fā)表了題為“Apopulationofstemcellswithstrongregenerativepotentialdiscoveredindeerantlers”的研究論文。該研究發(fā)現(xiàn)鹿角芽基祖細胞(deerantlerblastemaprogenitorcell)是高等脊椎動物中保守的再生性細胞的可能來源。研究指出
2023
08-21

(IF 29.4)│腫瘤靶向細菌鞭毛觸發(fā)局部出血重編程TAMs以改善抗腫瘤治療
腫瘤相關(guān)巨噬細胞(tumor-associatedmacrophages，TAMs)是腫瘤微環(huán)境中一種可塑性異質(zhì)細胞群體，占某些實體腫瘤的50%，TAMs通常表現(xiàn)出免疫抑制M2表型，導致預后不良。TAMs通過刺激血管生成，增加腫瘤細胞的遷移和侵襲，抑制抗腫瘤免疫引起惡性發(fā)展。由于TAMs的高度可塑性，將抗炎巨噬細胞極化為促炎巨噬細胞是一種很有前途的抗腫瘤方法。目前常用的策略是通過局部或全身給藥來輸送外源性物質(zhì)，如免疫因子、單抗和免疫激動劑。然而，在不影響正常凝血的情況下，精確誘導腫瘤出血的新材料

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