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2023
12-11

外泌體專題 | 樣本處理問題
外泌體概述：外泌體是由活細(xì)胞分泌的，包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)，直徑在30-150nm的具有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，現(xiàn)在特指直徑40-100nm的盤狀囊泡，主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁等。圖外泌體示意圖外泌體構(gòu)成：外泌體富含膽固醇和鞘磷脂，并攜帶有DNA、mRNA、microRNA、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)以及一些代謝物，目前已經(jīng)通過286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860
2023
12-11

白細(xì)胞減少的原因有哪些？
白細(xì)胞減少臨床分為原因不明性和繼發(fā)性兩種，前者多見，后者多為化學(xué)因素，物理因素，藥物及某些疾病，或可見于各種實(shí)體腫瘤化療后，多種血液病，嚴(yán)重感染及原因不明者等。在我國(guó)白細(xì)胞減少癥和粒細(xì)胞缺乏癥的預(yù)后良好，粒細(xì)胞缺乏癥如果治療不及時(shí)，年齡較大或有其他臟器疾患的病人，病死率仍然較高。1、藥物：a、抗生素主要是氯霉素、合霉素，它們對(duì)骨髓的造血功能有抑制作用；其他如四環(huán)素、多粘菌素類、鏈霉素偶而也可；b、抗腫瘤藥(在腫瘤細(xì)胞被殺傷的同時(shí)，人體正常的組織細(xì)胞也受到損傷)；c、解熱鎮(zhèn)痛藥(氨基比林，安乃近、
2023
12-08

國(guó)自然熱點(diǎn) | 外泌體研究進(jìn)展盤點(diǎn)
外泌體的自我介紹外泌體是由大多數(shù)真核細(xì)胞分泌的微小膜泡，直徑為30~150nm，呈茶托狀，由質(zhì)膜的內(nèi)向褶皺產(chǎn)生，并通過多泡體與質(zhì)膜融合從細(xì)胞中分泌出來(lái)[1]。它們存在于多種不同的生物液體中，如尿液、血液、羊水、母乳、惡性腹水和細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，同時(shí)也存在于組織樣本中。像細(xì)胞一樣，外泌體中含有豐富的內(nèi)容物包括蛋白質(zhì)、脂類、糖類和核酸（如DNA、mRNA、miRNA和lncRNA等）。外泌體的不同來(lái)源決定了其組成的差異，這也反映了宿主細(xì)胞的生理狀態(tài)和功能。大量研究表面外泌體參與神經(jīng)元通訊、抗原呈遞、
2023
12-06

如何解決生物制品中的核酸殘留的痛點(diǎn)問題？
生物制品是指以微生物、細(xì)胞、動(dòng)物或人源組織和體液等為起始原材料，用生物學(xué)技術(shù)制備，用于預(yù)防、治療和診斷人類疾病的制劑。當(dāng)前，隨著越來(lái)越多的生物制品進(jìn)入治療領(lǐng)域，于是生物制品與之俱來(lái)的生物安全性問題被漸漸提上日程，生物制品的質(zhì)量控制也日趨嚴(yán)格。其中宿主細(xì)胞殘留核酸由于可能會(huì)傳遞腫瘤或病毒相關(guān)基因，存在潛在致癌性和感染性風(fēng)險(xiǎn)。各國(guó)藥品監(jiān)督管理機(jī)構(gòu)對(duì)生物制品中宿主細(xì)胞殘留核酸的態(tài)度謹(jǐn)慎且明確，要求各制藥企業(yè)建立詳細(xì)可行、靈敏度高的檢測(cè)方法，用于驗(yàn)證藥品的純化過程可以去除殘留DNA，并對(duì)終產(chǎn)品的放行嚴(yán)格
2023
12-05

生化檢測(cè)試劑盒 | 銅離子檢測(cè)助力腫瘤治療研究
背景介紹：銅濃度檢測(cè)在藥物發(fā)現(xiàn)和環(huán)境監(jiān)測(cè)中得到廣泛應(yīng)用。銅是人體必需的微量元素。銅蛋白酶在鐵和兒茶酚胺代謝，在清除自由基，血紅蛋白，彈性蛋白，膠原等方面扮演著重要角色。銅主要存在于肝臟中的銅藍(lán)蛋白中。銅含量過低會(huì)導(dǎo)致智力低下、色素缺失、貧血、肌肉緊張癥、骨質(zhì)壞血病等疾病。銅離子檢測(cè)在腫瘤研究中的應(yīng)用：歷史研究表明，銅穩(wěn)態(tài)失調(diào)與多種腫瘤有關(guān)，如婦科腫瘤、結(jié)直腸癌等，而癌癥患者血清銅水平的升高與癌癥分級(jí)和化療耐藥性有關(guān)，如果銅的濃度超過一定的閾值，就會(huì)中毒，導(dǎo)致一種新細(xì)胞死亡形式，稱為銅中毒，這種方
2023
12-04

干貨 | iPS誘導(dǎo)腦類器官培養(yǎng)攻略
腦類器官概述：11月末，小愛曾為大家講述了3D類器官培養(yǎng)，相信大家對(duì)“類器官”及“3D培養(yǎng)”已不陌生?，F(xiàn)階段，類器官的培養(yǎng)有多種不同的方法，而不同類器官的培養(yǎng)亦存在一定的差異，包括：視網(wǎng)膜、腸、甲狀腺、肝、垂體、大腦...等。以人腦為例，因其具有高度復(fù)雜性，現(xiàn)如今，很多腦部疾病的研究很難在生物模型中開展，故體外模擬技術(shù)成為現(xiàn)在類器官培養(yǎng)領(lǐng)域的一項(xiàng)前沿技術(shù)。通常，研究人員可在體外環(huán)境中對(duì)大腦組織進(jìn)行培育，模擬大腦發(fā)育過程，進(jìn)而能夠觀察到人腦變化，為更深層次的腦部研究開拓思路。接下來(lái)，小愛將為大家送
2023
12-01

基質(zhì)膠的“怪脾氣”？帶你一起了解
大家都知道基質(zhì)膠用途廣泛，無(wú)論在成瘤、成管、干細(xì)胞包被，還是類器官培養(yǎng)中，都需要基質(zhì)膠這個(gè)得力助手。但基質(zhì)膠也是有“怪脾氣”的，稍有懈怠，它就凝給我們看，還死倔死倔地“不干活”嘞，所以咱們聊一聊基質(zhì)膠有哪些“怪脾氣”！1、融化時(shí)間非常短，對(duì)高溫過度“敏感”有小伙伴，是把基質(zhì)膠放在冰盒上融化的，冰盒是放在超凈臺(tái)上的，發(fā)現(xiàn)過了半小時(shí)基質(zhì)膠凝了。是的，為啥呢？基質(zhì)膠如果不是全部插在冰里，一半暴露在空氣中，其融化時(shí)間很短，通常在冰上不超過30min就基本液化了，尤其是在炎熱的夏天，暴露在空氣中的一半很快
2023
11-30

免疫細(xì)胞專題 | NK細(xì)胞
NK細(xì)胞概述：自然殺傷（naturekiller，NK）細(xì)胞屬于天然淋巴樣細(xì)胞家族，在人類中通常被定義為CD3-CD56+細(xì)胞，占循環(huán)淋巴細(xì)胞的5%～15%。NK細(xì)胞是抵御病毒感染和細(xì)胞突變的第一道防線，無(wú)需預(yù)先致敏就能殺死威脅宿主的癌細(xì)胞、異體細(xì)胞和外來(lái)病原體感染的細(xì)胞，被認(rèn)為是癌癥免疫監(jiān)測(cè)、移植排斥和早期病毒免疫的關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞。圖NK細(xì)胞（黃）和癌細(xì)胞（紅）NK細(xì)胞免疫療法：CAT免疫療法的成功激發(fā)了研究者們利用其他免疫細(xì)胞進(jìn)行癌癥治療的興趣，簡(jiǎn)單的說(shuō)細(xì)胞免疫療法就是采集人體自身免疫細(xì)胞，經(jīng)
2023
11-29

生物制品質(zhì)量控制
生物制品是指以微生物、寄生蟲、動(dòng)物毒素、生物組織作為起始材料，采用生物學(xué)工藝或分離純化技術(shù)制備，并以生物學(xué)技術(shù)和分析技術(shù)控制中間產(chǎn)物和成品質(zhì)量制成的生物活性制劑，包括菌苗、疫苗、毒素、類毒素、免疫血清、血液制品、免疫球蛋白、抗原、細(xì)胞因子、激素、酶、發(fā)酵產(chǎn)品、單克隆抗體、DNA重組產(chǎn)品、體外免疫診斷制品等。由于其特殊的性質(zhì)，生物制品的質(zhì)量控制至關(guān)重要，國(guó)家規(guī)定應(yīng)當(dāng)對(duì)生物制品的生產(chǎn)過程和中間產(chǎn)品的檢驗(yàn)進(jìn)行特殊控制，為響應(yīng)這一要求，一系列生物制品生產(chǎn)研發(fā)過程中相關(guān)雜質(zhì)的檢測(cè)試劑盒誕生，大致可分為兩大
2023
11-27

細(xì)胞活性研究常用熒光探針大全
熒光探針是潛在的熒光團(tuán)，可根據(jù)生物微環(huán)境變化、與被分析物相互作用或特定化學(xué)反應(yīng)顯示熒光信號(hào)。由于其具有操作簡(jiǎn)單、選擇性好、靈敏度高、檢測(cè)范圍廣、響應(yīng)速度快以及對(duì)樣品損傷小等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被成功應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)及環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。鈣離子熒光探針：鈣（Calcium）是一種重要的且普遍存在的第二信使，參與調(diào)控各種各樣的細(xì)胞過程，包括細(xì)胞增殖、基因轉(zhuǎn)錄、肌肉收縮和胞吞作用。響應(yīng)于大量的刺激物，鈣離子（Ca2+）從胞內(nèi)的儲(chǔ)存池釋放出來(lái)，而胞內(nèi)Ca2+濃度的增加會(huì)引起細(xì)胞功能的活化、調(diào)節(jié)和終止。許多泵和
2023
11-24

本期分子小課堂 | 常規(guī)PCR技術(shù)介紹
PCR技術(shù)的前世今生科學(xué)家對(duì)核酸的研究已有100多年歷史，20世紀(jì)70年代初人們就致力于研究基因的分離技術(shù)。Khorana等于1971年最早提出核酸體外擴(kuò)增理念：DNA變性解鏈后與相應(yīng)引物雜交，用DNA聚合酶延伸，重復(fù)該過程便可以克隆基因[1]。因?yàn)楫?dāng)時(shí)的技術(shù)尚未成熟，該設(shè)想一直未被證實(shí)。直到在1985年，Mullis等用大腸桿菌DNA聚合酶體外擴(kuò)增哺乳動(dòng)物單拷貝基因成功（發(fā)明人KaryBanksMulis也因此榮獲了后期的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)）。1988年Saiki等將耐熱DNA聚合酶（Taq酶）引入
2023
11-21

抗體/蛋白標(biāo)記常用熒光染料選擇指南
近年來(lái)，生物大分子標(biāo)記技術(shù)受到很大重視并取得了迅速進(jìn)展，此技術(shù)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的檢測(cè)、核酸雜交測(cè)序以及疾病診斷等諸多方面?？贵w/蛋白的標(biāo)記原理是標(biāo)記試劑與抗體/蛋白所帶的巰基、氨基及羧基等基團(tuán)發(fā)生置換或縮合反應(yīng)連接在一起。抗體標(biāo)記技術(shù)被廣泛用于醫(yī)學(xué)病理學(xué)、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域。本期小愛主要介紹3種常見的抗體標(biāo)記技術(shù)：熒光素（FITC、PE、APC等）標(biāo)記法、酶（辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）標(biāo)記法和生物素（Biotin）標(biāo)記法?？贵w/蛋白的異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記法異硫氰酸
2023
11-17

分子實(shí)驗(yàn)之如何保證樣本核酸穩(wěn)定？
科研狗起早摸黑做了幾天分子克隆實(shí)驗(yàn)，本想著拖了好幾個(gè)星期的實(shí)驗(yàn)終于要做完啦！瞬間覺得自己棒棒噠！但是最后看實(shí)驗(yàn)結(jié)果?。?！原地裂開排查實(shí)驗(yàn)試劑，沒問題！排查實(shí)驗(yàn)操作，沒問題！排查儀器，沒問題！那么問題到底出在哪呢？其實(shí)問題有可能出現(xiàn)在樣本保存與前處理步驟中哦。生物樣本中的核酸(DNA/RNA)會(huì)因?yàn)楹怂崦?、溫度、pH值、微生物、自身化學(xué)性質(zhì)等因素而發(fā)生被動(dòng)或主動(dòng)降解，從而導(dǎo)致分子實(shí)驗(yàn)結(jié)果不盡人意。目前針對(duì)不同科研的需求，更多的樣本保存方式也相繼問世，小愛為大家匯總了各類樣本保存的步驟、注意事項(xiàng)、以
2023
11-16

國(guó)自然熱點(diǎn)│自噬相關(guān)信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白及研究策略
自噬的研究背景關(guān)于自噬的研究曾獲得過兩次諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。是比利時(shí)科學(xué)家克里斯汀·德·迪夫(ChristiandeDuve)因發(fā)現(xiàn)了在細(xì)胞自噬機(jī)制中起到重要作用的溶酶體，獲得1974年諾貝爾獎(jiǎng)；其次是日本大隅良典團(tuán)隊(duì)因探明了細(xì)胞自噬的啟動(dòng)機(jī)制，獲得2016年諾貝爾獎(jiǎng)。2023年，國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)揭曉的今年國(guó)自然評(píng)審結(jié)果，自噬相關(guān)研究的中標(biāo)數(shù)量超500項(xiàng)（來(lái)源：ZCOOL國(guó)自然項(xiàng)目查詢系統(tǒng)）！圖1自噬研究進(jìn)程什么是自噬？自噬是細(xì)胞在相關(guān)基因(autophagyrelatedgene，At
2023
11-15

文獻(xiàn)解析 | m6A修飾去甲基化酶FTO與潰瘍性結(jié)腸炎
FTO（fatmassａndobesity-associatedprotein）蛋白是一個(gè)m6A修飾去甲基化酶，位于細(xì)胞核內(nèi)，其主要功能是通過氧化脫甲基酶活性降低m6A水平，F(xiàn)TO針對(duì)單鏈RNA中的m6A發(fā)揮去甲基化活性。目前已有各項(xiàng)研究表明m6A修飾參與了潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病機(jī)制。2023年9月21日，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院洪潔、陳豪燕團(tuán)隊(duì)與附屬瑞金醫(yī)院劉瑞欣團(tuán)隊(duì)在雜志GUT上聯(lián)合發(fā)表題為DisruptionofCerS6-MediatedSphingolipidMetabolismby
2023
11-14

神經(jīng)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)指南——B27
概念——Mckay于1997年在《Science》雜志上將神經(jīng)干細(xì)胞（neuralstemcells，NSCs）的概念總結(jié)為：具有分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力，能自我更新并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞，神經(jīng)干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)打破了神經(jīng)細(xì)胞不能再生的傳統(tǒng)理論。圖1第3、5、7代神經(jīng)球巢蛋白免疫熒光染色(×400)免疫熒光染色陽(yáng)性圖片特點(diǎn)——通過對(duì)稱分裂和不對(duì)稱分裂兩種分裂方式完成自我更新，NSCs具有多向分化潛能，且不表達(dá)成熟抗原，不被免疫系統(tǒng)所識(shí)別，能通過血腦屏障，可以與宿主的神經(jīng)組
2023
11-10

猴痘病毒不用怕，mRNA疫苗助你打造抵抗
猴痘(Monkeypox，MPX)是由猴痘病毒(Monkeypoxvirus,MPXV)引起的一種病毒性人畜共患病，其屬于正痘類病毒，癥狀表現(xiàn)類似于天花，常見癥狀表現(xiàn)為發(fā)燒（通常在38.5℃到40.5℃之間）、頭痛、肌肉酸痛、淋巴結(jié)腫大及皮疹等[1]。自1970年報(bào)告了第一例患者以來(lái)，猴痘主要在非洲地區(qū)流行。但2022年5月，猴痘開始了全球范圍的大流行，已有113個(gè)國(guó)家（地區(qū)）報(bào)告了89000多例猴痘確診病例，包含152例死亡病例。2023年6月，我國(guó)多個(gè)省份先后報(bào)告多例猴痘病例。最新消息202
2023
11-09

細(xì)胞凋亡試劑盒選擇指南
一、概念：細(xì)胞凋亡：由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡，是高度調(diào)控的過程，故又稱為細(xì)胞的程序性死亡。二、特征：細(xì)胞壞死是病理狀態(tài)下由損傷因子誘導(dǎo)產(chǎn)生的自溶現(xiàn)象，表現(xiàn)為：細(xì)胞皺縮變小、質(zhì)膜起泡、染色體凝縮、細(xì)胞核碎裂、DNA片段化以及吞噬體最終吞噬細(xì)胞。圖1細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死過程三、檢測(cè)試劑盒1、AnnexinV/PI檢測(cè)試劑盒根據(jù)細(xì)胞凋亡過程中的變化，可以通過多種途徑對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，目前市面上常用的試劑盒包括一下幾種：AnnexinV-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（abs50001）正常細(xì)胞中，
2023
11-09

細(xì)胞凍存技術(shù)要點(diǎn)
細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。細(xì)胞凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min。我們常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘----20℃60分鐘----80℃過夜---液氮罐。
2023
11-07

科普介紹：免疫學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)與過氧化物酶鏈霉親和素
什么是過氧化物酶鏈霉親和素(PeroxidaseStreptavidin,SA-HRP)？鏈霉親和素（Streptavidin，簡(jiǎn)稱SA）是從細(xì)菌阿維丁鏈霉菌中純化出的一種60kDa的蛋白質(zhì)。鏈霉親和素同源四聚體對(duì)生物素（即維生素B7）具有很高的親和力。而過氧化物酶鏈霉親和素就是將過氧化物酶（HorseradishPeroxidase，縮寫為HRP）偶聯(lián)在鏈霉親和素上形成，可與Biotin標(biāo)記的各種親和純化抗體或者Biotin標(biāo)記的色譜級(jí)蛋白聯(lián)用進(jìn)行各種免疫檢測(cè)。SA-HRP在免疫學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)中的

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