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2023
11-06

類器官疑難問題知多少？一起來看看
Q1：轉(zhuǎn)移性的癌類器官，是用轉(zhuǎn)移部位的癌類器官培養(yǎng)基還是原發(fā)部位的癌類器官培養(yǎng)基比較好？答：我們查閱大量文獻，構建原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移癌的類器官都是用的適合原發(fā)腫瘤的類器官培養(yǎng)基，比如腸癌的原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶，乳腺癌的原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶，所以用原發(fā)部位的癌類器官培養(yǎng)基比較好。Q2：轉(zhuǎn)移性的類器官形態(tài)和轉(zhuǎn)移部位的癌類器官長得像還是和原發(fā)部位的癌類器官長得像？答：轉(zhuǎn)移性的類器官形態(tài)和原發(fā)性的比較像。Q3：做胰腺癌類器官藥篩，對于加藥時，類器官的大小有推薦嗎？或者說鋪板幾天后加藥比較好呢？答：類器官長的比較大的話，
2023
11-03

類器官免疫熒光整體染色法
一、類器官收集及洗滌1、類器官收集移液器吸去培養(yǎng)基，每孔添加1-2mL左右4℃類器官傳代培養(yǎng)緩沖液(abs9730)，輕柔吹打基質(zhì)膠，收集在15mL離心管中（24孔板，每5孔為一組），加類器官傳代緩沖液定容至10mL（緩沖液越多，基質(zhì)膠被稀釋的越充分，越容易去除），4℃靜置10min或-20℃放置5min（目的是使基質(zhì)膠軟化，如果冰箱保溫效果強，冷凍3min），300g4℃，離心5min棄上清。2、類器官清洗添加1mL類器官傳代培養(yǎng)緩沖液重懸，300g4℃，離心5min棄上清。二、類器官免疫熒光
2023
11-01

生物活性小分子在疾病研究中的應用
小分子化合物是指分子量小于1000Da（尤其小于500Da），具有生物學活性的化合物。其與細胞因子和蛋白不同，小分子化合物可以透過細胞膜進入細胞，發(fā)揮相應的生物學功能。小分子化合物的作用靶點眾多，已廣泛應用于腫瘤學、免疫學、神經(jīng)生物學、表觀遺傳學、干細胞、類器官、細胞凋亡、離子通道和信號轉(zhuǎn)導等生命科學諸多重要的研究領域。小分子化合物主要通過調(diào)節(jié)其蛋白靶點的活性發(fā)揮作用。目前小分子化合物的蛋白靶點主要包括酶、離子通道和受體三大類。表1小分子化合物的分類及作用機制分類作用機制酶的抑制劑(Enzyme
2023
10-31

細胞房除菌方案
微生物污染是一直是細胞培養(yǎng)的一個主要問題，大到諸如細胞間、層流室這種實驗室的設計布局，小到每一次試劑外包裝的消毒，都是在為了細胞免受外源微生物的侵害。應各位老師們的要求，今天這篇文章主要講解細胞房的除菌方案，順便討論一下常見的無菌操作漏洞。當您和同門的細胞頻繁出現(xiàn)污染，更換試劑之后仍然不能改善，細胞丟棄一波又一波，建議為細胞間來場消毒吧。無論是紫外線照射（物理方法）還是甲醛加高錳酸鉀熏蒸，都是為了盡可能的殺滅空氣中的微生物。圖1細胞室一、紫外線照射法紫外線按照波長劃分為四個波段：長波UVA、中波
2023
10-27

探究環(huán)狀RNA在疾病治療中的應用前景
環(huán)狀(circRNA)是一類特殊的共價閉環(huán)RNA分子，在調(diào)控生理和病理進程中，通過不同的機理發(fā)揮著重要作用。傳統(tǒng)上，circRNA被認為是一種非編碼RNA(ncRNA)。2014年，在北卡羅來納大學報導了環(huán)形RNA在細胞內(nèi)可通過非帽依賴的機理來翻譯蛋白，人們認識到circRNA也具有編碼與表達蛋白的能力。此后，隨著體外環(huán)化技術的發(fā)展，比線性mRNA穩(wěn)定性更強的合成circRNA成為mRNA治療領域備受關注的新技術，有望以mRNA藥物相似的遞送方法，實現(xiàn)疾病的治療。圖1環(huán)狀RNA結(jié)構一、circR
2023
10-25

文獻解析 | SMC4表達下調(diào)誘導的滯育樣CRC細胞具有低增殖和化療不敏感的特點
滯育(diapause)是動物受環(huán)境條件的誘導所產(chǎn)生的靜止狀態(tài)的一種類型。它常發(fā)生于一定的發(fā)育階段，比較穩(wěn)定，不僅表現(xiàn)為形態(tài)發(fā)生的停頓和生理活動的降低，而且一經(jīng)開始必須渡過一定階段或經(jīng)某種生理變化后才能結(jié)束。動物通過滯育及與之相似但較不穩(wěn)定的休眠現(xiàn)象來調(diào)節(jié)生長發(fā)育和繁殖的時間，以適應所在地區(qū)的季節(jié)性變化。2021年1月7日，加拿大的研究人員在Cell雜志發(fā)表了題為：ColorectalCancerCellsEnteraDiapause-likeDTPStatetoSurviveChemother
2023
10-23

3T3-L1細胞培養(yǎng)及經(jīng)典“雞尾酒”誘導攻略
流行性肥胖是近幾年的一大健康挑戰(zhàn)，肥胖促使一些心血管疾病如高血壓、血栓等發(fā)病率增高，糖尿病則是以高血糖為特征的代謝性疾病，長期存在可導致各種組織，特別是眼、腎、心臟、血管、神經(jīng)的慢性損害、功能障礙。3T3-L1細胞——小鼠胚胎成纖維細胞（前脂肪細胞）系具有向脂肪細胞分化的特性，被廣泛用于研究糖尿病，肥胖癥等。圖13T3-L1細胞形態(tài)表13T3-L1基礎培養(yǎng)信息細胞名稱3T3-L1（小鼠胚胎成纖維細胞）來源18天左右胎齡的Swiss小鼠胚胎生長方式貼壁生長細胞形態(tài)成纖維細胞樣培養(yǎng)條件95%空氣、5
2023
10-20

抗體偶聯(lián)藥物(ADC) | 精準靶向癌癥的“智能生物missile”
什么是抗體偶聯(lián)藥物(ADC)？提起ADC，總是繞不開抗體藥，對于抗體藥可能大家已經(jīng)不陌生，是一種由抗體物質(zhì)組成的藥物，其靶向性強，相較于傳統(tǒng)化藥具有更小的副作用，而ADC簡單點來說就是在抗體的基礎上，再偶聯(lián)上有細胞毒性的小分子藥物，從而使得這種藥物在精準靶向腫瘤細胞的同時還具有更大的細胞殺傷性，使得療效更強。圖1ADC的三種組成部分—單克隆抗體、細胞毒性藥物和連接子抗體偶聯(lián)藥物(ADC)的作用機制ADC就像一枚精確制導的missile，先找到需要摧毀的位點，最后發(fā)射missile炸毀。ADC中的
2023
10-19

類器官RNA和蛋白提取方法
很多老師咨詢類器官RNA和蛋白如何提取，其實類器官可以按微小組織進行RNA和蛋白提取，今天小愛給大家講一講提取方法。類器官蛋白提取方法一、試劑準備（細胞漿、細胞核及細胞膜蛋白抽提試劑盒(abs9346)）1、準備溶液1）室溫融解試劑盒中的各種溶液，溶解后除結(jié)構蛋白提取液外，其他試劑立即置于冰上；2）結(jié)構蛋白提取液溶解后，可放置于37℃水浴中溫浴至透明后，常溫放置。2、蛋白提取工作液的準備1）胞漿蛋白提取工作液的準備：臨用前，根據(jù)處理樣品的量估算實驗時胞漿蛋白提取液的需要量，并分別按照1:50比例
2023
10-18

延續(xù)傳奇 | 司美格魯肽再報對慢性腎病療效優(yōu)異
司美格魯肽（Sermaglutide）是一種由30個氨基酸組成的多肽，其結(jié)構與天然的人胰高血糖素樣肽-1(glucagon-likepeptide-1，GLP-1)相似，具有94%的同源性。最初開發(fā)用于治療II型糖尿病，后來被證明在減輕體重方面有顯著效果，因此在2021年6月被美國FDA批準每周1次皮下注射2.4mg用于減重[1]。其可通過減少食欲和饑餓感、減少能量攝入、增加飽腹感、改變食物偏好、延緩胃排空等機制起到減重的作用。此后，關于司美格魯肽在治療多種疾病方面的研究不斷報出新進展。司美格魯
2023
10-17

國自然熱點 | 巨噬細胞基礎知識點
2023年國自然中標熱點已經(jīng)發(fā)布，800+立項數(shù)使巨噬細胞在生物領域掀起一波熱浪，接下來小愛帶大家了解一下巨噬細胞。圖12023年巨噬細胞研究熱點巨噬細胞目前已知的來源包括：1）從骨髓中的造血干細胞→祖細胞，遷移至外周血，分化為常駐單核細胞和炎癥性單核細胞，在穩(wěn)定狀態(tài)或炎癥刺激下遷移至特定組織，分化為巨噬細胞；2）胚胎發(fā)育過程中在胎肝、卵黃囊或背主動脈附近的胚胎區(qū)域生成。機體大部分組織都存在巨噬細胞，如骨巨噬細胞（破骨細胞）、中樞神經(jīng)系統(tǒng)（小膠質(zhì)細胞）、肺泡巨噬細胞（噬塵細胞）、肝臟（庫普弗細胞
2023
10-11

如何選擇合適的細胞培養(yǎng)板？
細胞培養(yǎng)是一種基本的生命科學研究技術，已成為現(xiàn)代生物醫(yī)學研究的重要手段。細胞培養(yǎng)板是細胞培養(yǎng)實驗中常用和重要的實驗室耗材，選擇合適的細胞培養(yǎng)板對細胞的生長和實驗結(jié)果的準確性有至關重要的影響。細胞培養(yǎng)板根據(jù)底部形狀的不同可分為平底、圓底（U型）和V底（V型）；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等；表面處理方式有TC處理和超低吸附處理；顏色有透明色、白色、黑色等。那么如何從這么多的規(guī)格中選擇適合實驗的細胞培養(yǎng)板呢？跟小愛去瞅瞅怎么選擇吧。一、孔數(shù)的選擇細胞培養(yǎng)板的孔數(shù)包含6
2023
10-10

多色文獻分享 | TAMs靶向MS4A4A恢復CD8+T細胞介導的抗腫瘤免疫
結(jié)直腸癌(colorectalcancer，CRC)是起源于結(jié)直腸黏膜上皮的惡性腫瘤，是臨床最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中僅次于胃癌、食管癌和原發(fā)性肝癌。盡管目前已經(jīng)是“免疫治療已經(jīng)成為早期和晚期惡性腫瘤的重要治療模式”的新紀元，在結(jié)直腸癌患者中實現(xiàn)免疫療法的益處仍是一個尚未得到滿足的臨床需求。2023年7月，南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院普外科李國新、鄧教授團隊在國際的胃腸病學期刊GUT上在線發(fā)表了題為“TargetingMS4A4Aontumor-associatedmac
2023
10-10

重見黎明！伏蟄下的mRNA技術斬獲諾貝爾獎！
據(jù)新華社報道：2023年10月2日北京時間17點45分，2023年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎由mRNA技術的兩位奠基人—卡塔林·卡里科（KatalinKarikó）和德魯·魏斯曼（DrewWeissman）獲得。諾貝爾獎頒獎詞介紹：兩名獲獎者的發(fā)現(xiàn)對于研發(fā)有效的mRNAxinguan疫苗至關重要，為疫苗的研發(fā)速度做出了貢獻。這兩位科學家自2021年起，陸續(xù)獲得包括拉斯克獎在內(nèi)的5項“諾獎風向標”大獎。可以說，本次獲得諾貝爾獎是眾望所歸，祝賀兩位科學家！獲獎科學家介紹：卡塔林·卡里科（KatalinKa
2023
10-07

一分鐘掌握動物活體成像實驗全流程
動物活體成像技術主要包括生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術。生物發(fā)光是利用熒光素酶基因標記DNA，通過基因表達產(chǎn)生的蛋白酶與相應底物發(fā)生化學反應產(chǎn)生光信號（圖1）。熒光發(fā)光采用熒光物質(zhì)或熒光物質(zhì)標記的抗體、納米材料、藥物等導入到活體體內(nèi)，通過外界激發(fā)光源激發(fā)獲取成像。圖1生物發(fā)光活體成像檢測原理通過活體成像技術可以觀測活體動物體內(nèi)腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移、炎癥的發(fā)生、特定基因的表達和藥物作用效果等生物學過程。前期小愛介紹了兩種活體發(fā)光成像技術在科學研究中的應用案例，我們可以根據(jù)自己的實驗需求結(jié)合技術的優(yōu)缺點（表
2023
09-28

產(chǎn)品專題——聚凝胺(Polybrene)，基因轉(zhuǎn)染增強劑
產(chǎn)品介紹聚凝胺（Polybrene），也稱海美溴銨（HexadimethrineBromide），是一種多聚陽離子聚合物。聚凝胺目前廣泛用于逆轉(zhuǎn)錄病毒及慢病毒介導的基因轉(zhuǎn)染，作用機理可能是通過中和細胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥從而促進吸附作用。聚凝胺也常用于哺乳動物細胞的DNA轉(zhuǎn)染實驗以增強脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染效率。其也是一種有名的抗肝素劑（肝素拮抗劑），用來生產(chǎn)非特異性凝集的紅細胞。另外，由于少量的聚凝胺在自動測序分析中可以增加多肽的降解現(xiàn)象，因此聚凝胺也多用于蛋白測序。使用方法本品為無菌溶液
2023
09-27

細胞培養(yǎng)背景有“顆?！?？全面解析！
近期很多老師發(fā)圖咨詢細胞培養(yǎng)時背景的“顆?！笔遣皇俏廴荆绾稳コ?？今天這篇文章小編帶大家全面解析細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的“顆粒”問題。細胞培養(yǎng)中常見的“顆?！笨煞譃榘麅?nèi)和胞外兩種，下面兩張圖可以直觀地向大家展示：很多老師因為不清除這些“顆?！钡膩碓?，害怕污染而將細胞丟棄，不僅浪費心力，還耽誤實驗進度，接下來我們逐步分析這些“顆?！碑a(chǎn)生的原因。1、細菌或真菌污染圖3污染的細胞真菌污染相對來說比較好鑒別，一般肉眼可見培養(yǎng)基上層漂浮的霉斑或顯微鏡下可見菌體，細菌的菌體相對較小，顯微鏡下呈棒狀、球狀或者桿狀，由
2023
09-26

造模新方向—CRISPR-Cas9基因編輯類器官模型
約翰霍普金斯大學StephenJMeltzer于2022年11月30日發(fā)表在SCIENCETRANSLATIONALMEDICINE（19.319/Q1）上題為“GenerationａndmultiomicprofilingofaTP53/CDKN2Adouble-knockoutgastroesophagealjunctionorganoidmodel”的文章，TP53和CDKN2A的失活發(fā)生在賁門（GEJ）腫瘤發(fā)生早期，但前期缺少賁門向賁門癌轉(zhuǎn)化的模型，本研究通過類器官和基因編輯相結(jié)合，在正
2023
09-25

無血清細胞凍存液使用注意事項
細胞凍存液(科研級)是愛必信生物研發(fā)的一款無血清、無需程序降溫的細胞凍存液，本產(chǎn)品適用細胞類型更廣，尤其對干細胞以及原代細胞有很好凍存效果。生產(chǎn)過程嚴格執(zhí)行cGMP操作標準。無血清細胞凍存液其特點有以下幾個方面：1、不含動物源成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。2、成分明確，無批次差異。3、可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經(jīng)過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)。4、配方能夠有效地提高細胞凍存存活率及復蘇率。5、即用型，無需現(xiàn)配，即開即用。6、通用型，
2023
09-25

外周血單個核細胞攻略
外周血單個核細胞（PeripheralBloodMononuclearCells，PBMC）是外周血（即除骨髓以外的血液）中具有單個核的細胞的混合細胞群體，包括自然殺傷細胞（naturalkillercell，NK）、T淋巴細胞（70%-90%）、B淋巴細胞。能夠進一步分離純化，是免疫細胞的主要來源。表1PBMC組分及占比組分占比單核細胞10-30%淋巴細胞70-90%T淋巴細胞（CD3+)45-70%CD4+T淋巴細胞CD3+T淋巴細胞的25-60%CD8+T淋巴細胞CD3+T淋巴細胞的5-3

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