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2023
01-19

SH-SY5Y細(xì)胞培養(yǎng)攻略
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SH-SY5Y）是于1970年建自骨瘤轉(zhuǎn)移灶的神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-SH細(xì)胞系經(jīng)3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細(xì)胞的密度可高達(dá)106cells/cm2，具有中等水平的多巴胺β羥化酶的活性。基本形態(tài)上皮樣，多數(shù)貼壁，少數(shù)懸?。粻I養(yǎng)體系：推薦DMEM：F12(abs9561)+10%FBS(abs972)+1%P/S（abs9244）。表1SH-SY5Y細(xì)胞基本信息SH-SY5Y（人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）形態(tài)上皮樣生長特性多數(shù)貼壁，少
2023
01-19

多色文獻(xiàn)解讀：病理性神經(jīng)疼痛調(diào)控新機(jī)制
病理性神經(jīng)（neuropathicpain）是由軀體感覺系統(tǒng)的損害或疾病導(dǎo)致的疼痛，患者的臨床癥狀表現(xiàn)為各種各樣的疼痛。它的成因和發(fā)病機(jī)制都十分復(fù)雜，外傷、感染、中毒、腫瘤、神經(jīng)壓迫、免疫與遺傳等多種病因均可導(dǎo)致神經(jīng)損傷，發(fā)病機(jī)制包括外周敏化、中樞敏化、下行抑制系統(tǒng)的失能、脊髓膠質(zhì)細(xì)胞的活化、離子通道的改變等。近日，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院腦科學(xué)與腦醫(yī)學(xué)學(xué)院高志華團(tuán)隊(duì)聯(lián)合浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院骨科王躍團(tuán)隊(duì)在JCIINSIGHT在線發(fā)表題為“mTOR-neuropeptideYsignalingsens
2023
01-18

類器官實(shí)操大本營——HE staining
1.實(shí)驗(yàn)材料蘇木精染液、伊紅染液、乙醇、二甲苯、中性樹膠、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、眼科鑷、蓋玻片、載玻片、顯微鏡。2.實(shí)驗(yàn)步驟（1）石蠟切片脫蠟至水依次將切片放入二甲苯Ⅰ10min；二甲苯Ⅱ10min；無水乙醇Ⅰ5min；無水乙醇Ⅱ5min；95%酒精5min；90%酒精5min；80%酒精5min；70%酒精5min；蒸餾水洗。（2）蘇木素染細(xì)胞核切片入Harris蘇木素染3-8min，自來水洗。（3）伊紅染細(xì)胞質(zhì)切片入伊紅染液中染色1-3min，自來水洗。（4）脫水封片將切片依次放入95%酒精I(xiàn)5m
2023
01-18

你做的抗原是怎么出現(xiàn)兩條杠的？需要的原材料有哪些？
自2019年新冠大流行以來，我們用三年的時(shí)間習(xí)慣了核酸檢測，在國家嚴(yán)格高效的防控政策下，居民的生命安全得到了保障，但同時(shí)全國經(jīng)濟(jì)也出現(xiàn)了無法避免的停滯，社會(huì)層面生活壓力壓力漸大。目前，突變后病毒毒性降低、癥狀漸輕，國家適時(shí)調(diào)整了疫情防控政策：出行不再落地核酸，不進(jìn)行全面核酸檢測，不再掃碼。但是，對于廣大民眾來說，防護(hù)的壓力反而越來越大了，大部分家庭都面臨著老人及小孩這樣免疫力較弱的成員需要照顧，身邊的感染人群越來越多，不知道身邊誰是陽性。同時(shí)春節(jié)將近，或出現(xiàn)數(shù)以億計(jì)的人員流動(dòng)，感染人數(shù)將呈幾何增
2023
01-13

類器官實(shí)操大本營之——固定包埋
Q1、類器官收集A收集生長至較大尺寸類器官：96孔板，生長密度較大時(shí)，使用移液槍取半孔以上，清洗1至3遍，洗去大部分基質(zhì)膠，離心沉淀，棄除大部分上清。Q2、瓊脂糖固定槽制備（可一次制備一批，溫密閉保存）A1）稱量0.2至0.4g瓊脂糖，加入至燒杯或者小試劑瓶內(nèi)；2）加入10mL左右PBS；3）微波爐高火融化，每隔5s暫停打開，觀察，重復(fù)數(shù)次至瓊脂糖融化；4）取約200uL融化瓊脂糖，加入至600uLEP管內(nèi)；5）在盛有瓊脂糖的小EP管內(nèi)插入一小PCR管，使瓊脂糖形成一圓尖底凹槽，室溫或者4℃冰箱
2023
01-13

HUVEC細(xì)胞培養(yǎng)攻略
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HumanUmbilicalVeinEndothelialCells，HUVEC）是臍靜脈的重要構(gòu)成細(xì)胞之一。當(dāng)進(jìn)行血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)，通常使用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，而非靜脈內(nèi)皮細(xì)胞或動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。永生化的HUVEC會(huì)通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶RFP基因或GFP基因。表1HUVEC細(xì)胞基本信息名稱HUVEC（人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞）形態(tài)上皮樣生長特性貼壁接種密度8.0x103-3.0x104viablecells/cm2傳代比率1:2-1:3圖1HUVEC（人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞）首先要討論的是
2023
01-12

新發(fā)現(xiàn)！CDK抑制劑有望被用作抗SARS-CoV-2藥物
SARS-CoV-2感染從2019年底爆發(fā)至今仍在全球肆虐，給人類身體健康帶來極大損害。隨著SARS-CoV-2的大規(guī)模流行，新的病毒突變株不斷出現(xiàn)（Alpha、Beta、Gamma、Delta、Omicron等），其中一些突變株具有更強(qiáng)的感染能力或更強(qiáng)免疫逃逸能力。由于病毒的變異能力強(qiáng)，給現(xiàn)有的疫苗帶來壓力和挑戰(zhàn)。確定SARS-CoV-2RNA復(fù)制所必需的關(guān)鍵宿主因子有望找到細(xì)胞的作用靶標(biāo)，以開發(fā)廣譜抗病藥物。圖片來源于百科星圖2022年12月27日，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院&北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院岑山等研究團(tuán)
2023
01-11

qPCR反應(yīng)之你問我答
實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)（real-timePCR）也叫qPCR（QuantitavePCR），是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號累積實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過特定數(shù)學(xué)原理對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。它是一項(xiàng)臨床上非常成熟的技術(shù)，目前在分子生物學(xué)領(lǐng)域，qPCR核酸定量好方法。目前仍在全球肆虐的SARS-CoV-2鑒定的“金標(biāo)準(zhǔn)”——核酸檢測就是通過qPCR原理進(jìn)行的。圖1qPCR技術(shù)原理簡圖（圖片來自henrik'slab）那么拿到一個(gè)樣本，需要經(jīng)過以下多項(xiàng)操作流程才能定量檢測到
2023
01-10

RAW 264.7細(xì)胞培養(yǎng)攻略
RAW264.7細(xì)胞源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；在正常培養(yǎng)中，細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)多邊形和不規(guī)則形狀，并伴有許多偽足的生成，細(xì)胞貼壁能力很強(qiáng)。RAW264.7細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。呈不規(guī)則形，貼壁；細(xì)胞生長速度快，2-3天即可傳一代；營養(yǎng)體系是DMEM+10%FBS。表1RAW264.7細(xì)胞基本信息名稱RAW264.7（小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞）形態(tài)不規(guī)則形生長特性貼壁；細(xì)胞生長速度快，2-3天即可傳一代營養(yǎng)體系DMEM（abs948
2023
01-06

新冠不是大號流感，警惕肺靜脈栓塞！
2022年的最后一個(gè)月，奧密克戎以迅雷不及掩耳之勢席卷了我國各地，來得快走得也快，大多數(shù)患者挨過一禮拜就活蹦亂跳，一時(shí)之間人人自封大俠——“陽過”、“陽康”。然而，就是這樣看似已經(jīng)不足為懼的病毒，依舊奪去了許多老弱患者的生命，如果新冠在體質(zhì)虛弱的人身上，沒有得到有效控制，就容易轉(zhuǎn)變成重癥。2022年4月，來自瑞典等國家研究機(jī)構(gòu)在頂級醫(yī)學(xué)期刊BritishMedicalJournal（BMJ）上發(fā)表了一項(xiàng)研究稱，感染SARS-CoV-2的人在感染后數(shù)月內(nèi)深靜脈血栓形成和肺栓塞的風(fēng)險(xiǎn)明顯增加。而SA
2023
01-03

植物提取物抗SARS-CoV-2研究進(jìn)展
植物提取物是以植物為原料，通過物理化學(xué)等方式獲取植物中的某一種或多種有效成分所形成的天然產(chǎn)品。其應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛，包括食品、醫(yī)藥、飼料、化妝品等，植物提取物的分類見表1。表1植物提取物分類按照有效成分分類按照形態(tài)分類按照有效成分的含量分類按照用途分類多酚植物油有效單體提取物天然色素制品類多糖浸膏標(biāo)準(zhǔn)提取物中藥提取物制品酸粉狀比率提取物提取物制品類萜類晶狀體濃縮制品類甙黃酮生物堿由于天然植物提取物具有較強(qiáng)的生物活性，如免疫調(diào)節(jié)、抗感染、增強(qiáng)抗氧化能力、抗炎等作用[1]，對其藥用價(jià)值的探究也一直受到
2022
12-30

肺纖維化造?！蛩岵┤R霉素
產(chǎn)品信息名稱：硫酸博萊霉素外觀：白色至淡黃色粉末純度：≥98%分子結(jié)構(gòu)圖如下圖所示：肺纖維化造模博來霉素（bleomycin，BLM）是由輪枝鏈霉菌產(chǎn)生的堿性糖肽類物質(zhì)的多組份復(fù)合抗生素，具有抗腫瘤作用，其毒副作用之一是引起肺纖維化。其誘導(dǎo)肺纖維化的機(jī)制，普遍認(rèn)為是BLM誘導(dǎo)DNA的斷裂，產(chǎn)生自由基，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)，引起細(xì)胞凋亡或壞死，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)和纖維化。由于病理組織學(xué)改變與人類肺纖維化最為接近，加上博來霉素價(jià)格低廉，容易獲取且重現(xiàn)性好，在過去幾十年中，博來霉素誘導(dǎo)的肺纖維化動(dòng)物模型是應(yīng)用普
2022
12-29

免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)·基礎(chǔ)篇
WhatisCo-IP？Co-IP全稱Co-Immunoprecipitation，中文學(xué)名免疫共沉淀，是一種以抗體和抗原識別專一性為基礎(chǔ)，用于研究蛋白質(zhì)之間相互作用的經(jīng)典方法。通俗點(diǎn)來說，假設(shè)我們需要研究樣品中A蛋白和B蛋白之間是否存在一些相互作用，首先我們通過合適的方法處理樣本，將蛋白提取出來（同時(shí)不能破壞蛋白之間的相互作用），然后用預(yù)先結(jié)合了瓊脂糖珠或者磁珠的A蛋白抗體捕獲樣本中的A蛋白，那么與A蛋白結(jié)合的B蛋白也能一起沉淀下來。再將蛋白從珠子上裂解下來，對B蛋白進(jìn)行檢測，能檢測到，說明B
2022
12-19

三氟甲基分子砌塊助力新藥研發(fā)
分子砌塊是指一類用于合成具有特定活性的復(fù)雜化合物的基本單元。在化學(xué)領(lǐng)域，砌塊或分子砌塊是具有活性官能團(tuán)的虛擬分子片段或真實(shí)分子。砌塊可用于特性分子結(jié)構(gòu)“自下而上”的組裝。在新藥研發(fā)最開始的階段，研究人員使用并組合不同的分子砌塊對化合物進(jìn)行篩選和評估，從而找到一個(gè)各個(gè)方面都符合要求的化合物作為臨床候選物。分子砌塊是整個(gè)小分子藥物的最上游，是化學(xué)藥物研發(fā)的起點(diǎn)，同時(shí)也伴隨藥物研發(fā)的全流程。新藥研發(fā)前期藥企或研究機(jī)構(gòu)需要種類豐富、結(jié)構(gòu)新穎的分子砌塊來合成并篩選臨床候選物，隨后在分子或細(xì)胞水平加以驗(yàn)證，
2022
12-17

如何將自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象運(yùn)用到報(bào)告基因中？
對于自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象，大家應(yīng)該都是比較熟悉的，其廣泛存在于海洋生物、微生物和陸生生物中。生物發(fā)光現(xiàn)象其實(shí)是在生物體內(nèi)由于生命過程中由化學(xué)反應(yīng)介導(dǎo)的將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能所產(chǎn)生的，這其中起到主要作用的是一種叫熒光素酶的物質(zhì)。熒光素酶是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱，具有代表性的是螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶，被廣泛應(yīng)用到生物學(xué)的報(bào)告基因中——一類可以編碼熒光蛋白或酶，從而將看不見的底物轉(zhuǎn)化為發(fā)光或彩色產(chǎn)物的一類基因報(bào)告系統(tǒng)，光信號可通過發(fā)光檢測儀或CCD相機(jī)進(jìn)行檢測，是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域基礎(chǔ)研究的
2022
12-17

漲知識！原來鑒別真菌污染這么簡單
承接上一期的細(xì)菌污染，這一期帶大家了解真菌污染。真菌主要分為酵母菌、霉菌和蕈。霉菌又主要分為青霉、根霉和曲霉。對于即將踏入細(xì)胞房的師弟師妹們，怎樣才能更好地規(guī)避師兄師姐們曾經(jīng)遇到的真菌污染問題呢？今天帶大家了解主要的真菌污染類型和預(yù)防措施吧。真菌污染特征1）肉眼下：?真菌污染最短3天才能長出橢圓形的霉斑。?霉斑往往會(huì)漂浮在培養(yǎng)液表面，隨著時(shí)間逐步擴(kuò)大。2）顯微鏡下：?有些真菌呈類似棉花絮狀的漂浮物。?若是念珠菌會(huì)呈卵圓狀，在細(xì)胞周邊生長。?早期并不會(huì)使得培養(yǎng)基變黃變渾濁，但在顯微鏡下可觀察到菌絲
2022
12-15

BD單細(xì)胞測序聯(lián)合Absin多色，共同探索腦部腫瘤微環(huán)境
腦惡性腫瘤又常稱為腦癌，分原發(fā)性和繼發(fā)性兩大類：原發(fā)性腦惡性腫瘤以腦膠質(zhì)瘤最多，是一種起源于腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的腫瘤；繼發(fā)性腫瘤主要是指其他部位的腫瘤轉(zhuǎn)移到腦內(nèi)形成的腦轉(zhuǎn)移性腫瘤，其發(fā)病率約是原發(fā)腫瘤的10倍，肺癌就是常見的原發(fā)癌種之一。2022年11月6日，復(fù)旦大學(xué)腫瘤醫(yī)院金偉教授和曹依群教授團(tuán)隊(duì)在Clin.Transl.Med（IF=8.554）上發(fā)表了題為“Single-cellRNAsequencingrevealscellularａndmolecularreprograminglandsc
2022
12-15

Absin腫瘤類器官培養(yǎng)基——明場圖展示
類器官顧名思義就是一種類似器官但又不是器官的3D細(xì)胞團(tuán)結(jié)構(gòu)。通過在體外培養(yǎng)胚胎或成體干細(xì)胞，讓其增殖分化形成具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能的類似于器官的3D細(xì)胞團(tuán)結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞結(jié)構(gòu)雖然不是真正意義上的人類器官，但能在某些結(jié)構(gòu)和功能上模擬真實(shí)器官，因此，把這些微型人造器官命名為：類器官（organoids）。類器官的研究熱點(diǎn)主要是病人來源的類器官(Patient-DerivedOrganoids,PDOs)，因?yàn)橥ǔＳ糜谀[瘤患者的疾病建模、研究與藥物篩選，常常被稱為腫瘤類器官。腫瘤類器官的發(fā)展開始于201
2022
12-08

重磅！熊去氧膽酸可能是新冠感染結(jié)束者
SARS-CoV-2從2019年底爆發(fā)至今仍在全球肆虐，對世界經(jīng)濟(jì)和人類身體健康帶來極大危害。全球新冠疫情爆發(fā)以來，我國科研工作者立即著手開展抗SARS-CoV-2藥物的研發(fā)工作。據(jù)英國劍橋大學(xué)TeresaBrevini等［1］的最近報(bào)道，他們得出一種比較樂觀的結(jié)論：熊去氧膽酸（UrsodeoxycholicAcid，UDCA）可能成為我們對抗新冠的重要產(chǎn)品。什么是熊去氧膽酸呢？熊去氧膽酸（UrsodeoxycholicAcid，UDCA）屬于有機(jī)化合物，分子式為C24H40O4，化學(xué)名稱為3a
2022
12-08

手把手教您識別細(xì)菌污染
細(xì)菌污染似乎是每一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)員過來人的“洗禮”。對于即將踏入細(xì)胞房的師弟師妹們，怎樣才能更好地規(guī)避師兄師姐們曾經(jīng)遇到的細(xì)胞污染問題呢？今天帶大家了解主要的細(xì)菌污染類型和預(yù)防措施吧。細(xì)菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)基大約在4-6小時(shí)呈現(xiàn)混濁有時(shí)稍加震蕩，會(huì)有很多混濁物漂起在顯微鏡下呈黑色細(xì)沙狀，或背景有大量黑點(diǎn)可能造成細(xì)胞增殖緩慢或形態(tài)上的改變（多角、多核等），胞質(zhì)中產(chǎn)生空泡、細(xì)胞漂浮凋亡了解了細(xì)菌污染的這些特征以后，同學(xué)們又有疑問了，那么細(xì)菌菌體能在顯微鏡下看到嗎？答案是部分細(xì)菌可以在顯微鏡下看到具體形態(tài)。因

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