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2025
02-14

抗體親和純化填料解決方案
一、背景介紹◆蛋白A是???葡萄球菌的細(xì)胞壁中的表?蛋?，它由折疊成三螺旋束的五個(gè)同源Ig結(jié)合域組成；◆蛋白G是G、C型鏈球菌細(xì)胞壁中的?種蛋?質(zhì)；◆蛋白A/G是重組蛋?A蛋?G融合蛋?，融合了來?蛋?A的5個(gè)Fc結(jié)合域和蛋?G的3個(gè)Fc結(jié)合域；◆蛋白L來源于?消化鏈球菌，并通過L鏈相互作?與免疫球蛋?結(jié)合。圖1抗體與抗體親和配基的作用區(qū)域表1蛋白A、G、L的抗體親和性差異分析蛋白A蛋白G蛋白A/G蛋白L優(yōu)點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)在CH2和CH3結(jié)構(gòu)域之間的Fc區(qū)域，以及?VH3家族的Fab區(qū)內(nèi)的重鏈可以特異
2025
02-13

腸道固有層免疫細(xì)胞分離制備指南
1、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備試劑準(zhǔn)備40%Percoll溶液配制：Percoll細(xì)胞分離液與PBS緩沖液(10×)按體積比9:1混合，配制等滲100%Percoll母液。用100%Percoll母液和RPMI1640/1×PBS按體積比4:6混合，配制40%等滲Percoll溶液。80%Percoll溶液：Percoll細(xì)胞分離液與PBS緩沖液(10×)按體積比9:1混合，配制等滲100%Percoll母液。用100%Percoll母液和RPMI1640/1×PBS按體積比8:2混合，配制80%等滲Perco
2025
02-11

標(biāo)簽蛋白純化填料解決方案
一、背景介紹Ni-IDAPharoseFF是含亞氨基二乙酸(iminodiaceticacid,IDA)基團(tuán)的金屬螯合填料，以瓊脂糖微球?yàn)榛|(zhì)，通過活化偶聯(lián)亞氨基二乙酸(IDA)，再螯合Ni2+。適用于大部分帶組氨酸標(biāo)簽(His-tag)蛋白的親和層析。Ni-NTASepharoseFF是含次氮基三乙酸(NTA)基團(tuán)的金屬螯合填料，以瓊脂糖微球?yàn)榛|(zhì)，通過活化偶聯(lián)次氮基三乙酸(NTA)，再螯合Ni2+。與亞氨基二乙酸(IDA)相比，具有更好的螯合劑、還原劑、堿性的耐受性。主要用于帶組氨酸標(biāo)簽(H
2025
02-10

細(xì)胞ATP發(fā)光檢測(cè)攻略
檢測(cè)原理2DLuminescentCellViabilityAssay借助ATP依賴的熒光素酶催化的熒光素發(fā)光反應(yīng)，通過化學(xué)發(fā)光信號(hào)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ATP含量，從而檢測(cè)細(xì)胞活力或定量檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)目，檢測(cè)線性范圍寬、靈敏度高、穩(wěn)定性好。96孔板中，在100個(gè)至100,000個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，但不同細(xì)胞的檢測(cè)數(shù)量上限會(huì)有不同。此外，操作簡單，試劑盒中提供的檢測(cè)試劑為即用型，讀數(shù)穩(wěn)定，檢測(cè)速度快，完成檢測(cè)僅需約10min，無需洗滌細(xì)胞，也無需更換或去除培養(yǎng)液。相比于其他常見的細(xì)胞活力測(cè)定方法，如
2025
02-07

RNA提取之Trizol法
在分子生物學(xué)研究中，RNA提取是非常重要的基礎(chǔ)步驟，而提取效率和純度直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功。Trizol試劑是一款高效、可靠的核酸提取試劑，為科研人員提供專業(yè)解決方案。Trizol產(chǎn)品特點(diǎn)：1、高效提取RNATrizol試劑基于經(jīng)典的酸性酚-氯仿分離法，可從細(xì)胞、組織、植物等多種樣本中快速提取高純度的RNA。可滿足多種實(shí)驗(yàn)需求，省時(shí)高效。2、高純度提取的RNA具有較高的純度和完整性，A260/280值通常在1.8-2.0，wan全滿足分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的要求。3、適用范圍廣樣本類型：適用于細(xì)胞、組織
2025
02-06

Caspase依賴的細(xì)胞凋亡一覽
Caspase家族簡介：Caspase家族是一組存在于細(xì)胞質(zhì)中的蛋白酶，它們?cè)诔绦蛐约?xì)胞死亡（如細(xì)胞凋亡）和炎癥過程中扮演重要角色。Caspase是“含半胱氨酸的天冬氨酸特異性蛋白酶”（Cysteine-dependentAspartate-directedproteASEs）的縮寫，其活性位點(diǎn)含有半胱氨酸，并能特異性地切割靶蛋白天冬氨酸殘基后的肽鍵。Caspase家族Caspase家族成員：Caspases根據(jù)其功能可以分為炎癥caspase和凋亡caspase：炎癥caspase：包括Cas
2025
01-23

CD44與CD62L對(duì)腫瘤細(xì)胞和T細(xì)胞的標(biāo)記意義
CD44與CD62L系T細(xì)胞表面的兩類分子標(biāo)識(shí)，于T細(xì)胞活化、遷移及功能的調(diào)控進(jìn)程中占據(jù)關(guān)鍵地位。今天小愛帶您來看看這兩個(gè)指標(biāo)對(duì)腫瘤細(xì)胞和T細(xì)胞種的標(biāo)記作用。CD44是一種跨膜糖蛋白，屬于整合素家族。它廣泛表達(dá)于多種細(xì)胞類型，包括白細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。細(xì)胞黏附和遷移：CD44通過與透明質(zhì)酸(HA)結(jié)合，參與細(xì)胞的黏附、遷移和信號(hào)傳導(dǎo)。在免疫細(xì)胞中，CD44有助于T細(xì)胞和B細(xì)胞在淋巴組織中的定位和遷移。腫瘤生物學(xué)：CD44是腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)志物之一，參與腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵
2025
01-22

RCR、RT-PCR、qPCR、RT-qRCR傻傻分不清？
聚合酶鏈反應(yīng)(PCR，PolymeraseChainReaction)由KaryMullis博士于20世紀(jì)80年代開發(fā)。該技術(shù)因其識(shí)別特定DNA序列并快速準(zhǔn)確地合成大量副本的能力而被比作“分子復(fù)印機(jī)”。目前開發(fā)了各種基于原始PCR方法的衍生技術(shù)。實(shí)時(shí)PCR，也稱為定量PCR(qPCR)，將PCR放大和檢測(cè)結(jié)合在一步中。另一種稱為逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)的技術(shù)使用RNA作為核酸起始模板?！馪CR：包含DNA模板、DNA聚合酶、引物和dNTPs的反應(yīng)混合物的重復(fù)加熱和冷卻循環(huán)。[1]每個(gè)循
2025
01-20

WB實(shí)際條帶與預(yù)期不符？可算捋順了
1、目的蛋白以其他形式存在，最常見的情況●翻譯后修飾：如糖基化，常見接受糖基化的氨基酸是絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)、天冬酰胺(Asn)和羥賴氨酸(Hydroxylysine)，例如CD2，根據(jù)uniprot顯示，其預(yù)測(cè)分子量應(yīng)該在39kda左右，但是表觀分子量一般在45kDa左右，這是由于CD2多個(gè)位點(diǎn)存在糖基化修飾，實(shí)際實(shí)驗(yàn)中，如果想探究分子量差異是否是由糖基化引起的，可以加入糖苷酶PNGaseF切去糖基后，進(jìn)行WB，而除了糖基化以外，還存在磷酸化，泛素化、甲基化、乙?；榷喾N翻譯后修
2025
01-16

動(dòng)物腦類器官培養(yǎng)全攻略
流程類器官原代培養(yǎng)流程原代一、準(zhǔn)備工作1、儀器設(shè)備CO2培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、臺(tái)式冷凍離心機(jī)、水浴鍋(abs72023)或水浴搖床，醫(yī)用冰箱、-80℃冰箱、移液器（一套）、眼科剪、眼科鑷2、試劑耗材（以腸癌為例）動(dòng)物腦類器官培養(yǎng)基試劑盒(abs90050)，基質(zhì)膠（低因子、無酚紅）(abs9495)，60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿(abs7005)，100μm濾篩(abs7009)，15mL離心管(abs7102)，1.5mLEP管若干(abs7119)，24孔細(xì)胞培養(yǎng)板(abs7035)、金
2025
01-14

GeneScope | 探索熒光原位雜交技術(shù)的起源
在分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的研究中，熒光原位雜交(FluorescenceInSituHybridization,FISH)技術(shù)是一項(xiàng)革命性的進(jìn)展。它不僅為我們提供了一種強(qiáng)大的工具來研究基因的結(jié)構(gòu)和功能，還幫助我們深入理解染色體異常與疾病之間的關(guān)系。本文將帶您穿越時(shí)間的長河，探索FISH技術(shù)的起源，以及它是如何發(fā)展成為現(xiàn)代分子生物學(xué)中重要的一部分。一、原位雜交技術(shù)的誕生原位雜交(InSituHybridization,ISH)技術(shù)的概念最早可以追溯到20世紀(jì)60年代。1969年，科學(xué)家們初次報(bào)道了使用
2025
01-13

TILs（腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞）提取培養(yǎng)全攻略
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備TILs提取培養(yǎng)試劑盒（abs90045）產(chǎn)品組成規(guī)格儲(chǔ)存條件及周期1TIL細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基A100mL4℃,3months或者-20℃,1年2TIL細(xì)胞激活培養(yǎng)基B30mL4/-20℃,2年3組織消化液C50mL4/-20℃,1年4分離液D20mL常溫5分離液E40mL常溫6細(xì)胞濾篩100μm常溫7組織緩沖液F2x250mL4/-20℃,2年8組織保存液G5x8mL4/-20℃,1年9凍存液H30mL4/-20℃,1年需要額外準(zhǔn)備的試劑及耗材貨號(hào)品名規(guī)格儲(chǔ)存條件及周期1abs7005
2025
01-09

剪刀手：CRISPR/Cas9
CRISPR/Cas系統(tǒng)是細(xì)菌獲得性免疫的重要組成部分，由Cas核酸酶和兩種單獨(dú)的RNA成分組成，即可編程crRNA（CRISPRRNA）和固定的TracRNA（反式激活crRNA）。2012年，JenniferDoudna和EmmanuelleCharpentier發(fā)現(xiàn)Cas9可以當(dāng)作DNA切割工具，CRISPR/Cas9技術(shù)才真正開始受到廣泛關(guān)注。CRISPR/Cas9調(diào)控機(jī)制1、CRISPR的轉(zhuǎn)錄：CRISPR被轉(zhuǎn)錄成一條長RNA(pre-crRNA)，包含了重復(fù)序列和間隔序列。2、tra
2025
01-07

脾臟單細(xì)胞懸液制備指南（酶解法）
小鼠脾臟是一個(gè)重要的免疫器官，位于小鼠左側(cè)腹腔中，靠近胃的左側(cè)，呈長橢圓形狀。大小會(huì)根據(jù)小鼠的品種和健康狀況有所不同，一般來說，成年小鼠的脾臟長度大約在1.5厘米到2.5厘米之間。脾臟的顏色和質(zhì)地可能會(huì)因?yàn)樾∈蟮钠贩N和健康狀況而有所變化，通常呈現(xiàn)出類似葉片的形態(tài)，顏色暗紅。在實(shí)驗(yàn)研究中，小鼠脾臟細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和計(jì)數(shù)是免疫學(xué)研究的重要方法，也是流式細(xì)胞術(shù)分析的前提。一、耗材與試劑表1小鼠脾臟解離部分試劑耗材參考表材料試劑設(shè)備15/50mL離心管1xPBS緩沖液水平恒溫?fù)u床10cm培養(yǎng)皿RPMI1
2025
01-02

外泌體提取與純化：試劑盒的優(yōu)化與創(chuàng)新
外泌體作為細(xì)胞間通訊的重要載體，在生物醫(yī)學(xué)研究中扮演著至關(guān)重要的角色。近年來，隨著外泌體研究的不斷深入，外泌體提取與純化試劑盒的優(yōu)化與創(chuàng)新也日益受到關(guān)注。傳統(tǒng)的外泌體提取方法，如超速離心法、密度梯度離心法等，雖然在一定程度上能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的提取，但操作繁瑣、耗時(shí)較長，且提取效率和純度有限。為了克服這些缺點(diǎn)，研究人員不斷探索新的提取方法和材料，以優(yōu)化外泌體提取試劑盒的性能。其中，一些試劑盒采用了多聚物沉淀法，通過減少離心管、移液槍頭等耗材材料表面的親水性或疏水性等基團(tuán)、表面電荷對(duì)外泌體產(chǎn)生的吸附作
2024
12-24

Absin多色試劑盒助力宮頸癌研究
發(fā)表于CancerCommunications的這篇文章《InteractionsofIndoleamine2,3-dioxygenase-expressingLAMP3+dendriticcellswithCD4+regulatoryTcellsａndCD8+exhaustedTcells:synergisticallyremodelingoftheimmunosuppressivemicroenvironmentincervicalcancerａndtherapeuticimplicatio
2024
12-20

分子互作研究
ChIP技術(shù)染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)（ChromatinImmunoprecipitation,ChIP）是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于研究蛋白質(zhì)與DNA的相互作用。利用已知蛋白的特異性抗體，將與蛋白相互作用的DNA從復(fù)合物中分離出來，常見用于確定特定轉(zhuǎn)錄因子或其他染色質(zhì)結(jié)合蛋白在基因組上的結(jié)合位點(diǎn)，以及這些蛋白如何調(diào)控基因表達(dá)。貨號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格abs50034染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)試劑盒22T案例分享：Interleukin-34-orchestratedtumor-associatedmacr
2024
12-18

流式細(xì)胞術(shù)從零開始說
流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometery)是利用流式細(xì)胞儀(flowcytometer)對(duì)快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的單列細(xì)胞或生物顆粒等進(jìn)行逐個(gè)、多參數(shù)、快速的定性、定量分析或分選的技術(shù)，具有檢測(cè)速度快、測(cè)量參數(shù)多、采集數(shù)據(jù)量大、分析信息全面、分選純度高、方法靈活等特點(diǎn)，可用于細(xì)胞大小、細(xì)胞顆粒度、DNA及RNA含量、蛋白質(zhì)含量、細(xì)胞特異抗原、細(xì)胞活性、胞內(nèi)PH值、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞功能分析等的檢測(cè)。通過流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞凋亡分析abs50001AnnexinV-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
2024
12-17

類器官&腫瘤球&細(xì)胞增殖、活力、毒性檢測(cè)全攻略
一、概述在生物醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中，細(xì)胞活性檢測(cè)扮演著至關(guān)重要的角色。它不僅幫助科學(xué)家們?cè)u(píng)估細(xì)胞的生存狀態(tài)，還能深入了解細(xì)胞對(duì)藥物、環(huán)境變化或病理過程的響應(yīng)。類器官/腫瘤球/細(xì)胞活性檢測(cè)通常包括測(cè)量細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和細(xì)胞死亡等方面。今天，小愛向大家介紹器官/腫瘤球/細(xì)胞活性檢測(cè)的六大常用方法：細(xì)胞代謝檢測(cè)方法、DNA合成檢測(cè)方法、細(xì)胞ATP檢測(cè)方法、熒光染料檢測(cè)方法、細(xì)胞膜通透性檢測(cè)方法、細(xì)胞LDH檢測(cè)方法。細(xì)胞增殖、活力、毒性檢測(cè)方法大全二、檢測(cè)方法1、細(xì)胞代謝檢測(cè)方法基于細(xì)胞代謝物進(jìn)行的檢
2024
12-16

多色熒光免疫組化和多色流式傻傻分不清？
在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，多色熒光免疫組化(mIHC)和多色流式(FCM)是兩種重要的技術(shù)，它們?cè)跈z測(cè)和分析生物樣本方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。盡管它們都涉及到熒光標(biāo)記和多色分析，但它們的原理、樣本選擇、應(yīng)用和優(yōu)勢(shì)卻有著明顯的區(qū)別。本文將為您詳細(xì)解析這兩種技術(shù)的不同之處。原理與特點(diǎn)多色熒光免疫組化技術(shù)(mIHC)，也稱為酪氨酸信號(hào)放大(TSA)技術(shù)，是一種基于酪胺信號(hào)放大的多重順次免疫染色技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)利用辣根過氧化酶(HRP)對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記，允許同時(shí)檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞或組織樣本上的多個(gè)目標(biāo)靶點(diǎn)。

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