国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

各種常見的血清不同點比較2023/12/11

血清是血漿凝固后分離出來的液體。當血漿在離心過程中凝固后，血漿中的凝血因子會被消耗掉，形成透明液體的血清。因此，血清中不含凝血因子，但含有血漿中其他的成分，如蛋白質(zhì)、電解質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)等。常見的血清有胎牛血清、新生牛血清與小牛血清等，下面分它們的不同點：1.血清類別牛血清類別胎齡胎牛血清（FBS)胎兒(母牛懷孕3-8個月)新生牛血清(NCS)出生10日內(nèi)小牛血清（BCS）16-22周供體血清成年牛2.采血方式不同胎牛血清：母牛懷孕3-8個月時，采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血

各種常見種類PCR概述介紹2023/12/04

PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)（PolymeraseChainReaction）的簡稱，是一種體外擴增特定DNA片段的分子生物學技術(shù)。PCR的常見種類分述如下：1、普通PCR普通PCR即一代PCR，使用普通PCR擴增儀擴增靶基因，并通過瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進行定性分析。2、實時熒光定量PCR（QuantitativeReal-timePCR,qPCR）實時熒光定量PCR，也叫Real-TimePCR，即二代PCR，是指在PCR擴增反應(yīng)體系中加入熒光染料或者熒光基團，在整個PCR過程中通過收集熒光信號實時

抗體的科學保存條件分享2023/11/28

抗體的科學保存條件：1、抗體濃度抗體濃度過低（2、多克隆抗體多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而，一旦抗體被純化后，儲存在50%的甘油中于-20℃保存，即使沒有凍融，其活性的損失也可以觀察到，盡管其進程仍然非常緩慢。即使沒有甘油，只要你不經(jīng)常凍融，抗體也可以存儲在-20℃幾年甚至幾十年。另一個重要的事情是，該抗體濃度應(yīng)高于1毫克/毫升，因為稀的抗體容易失去活性而且容易造成物理吸附導(dǎo)致的損失。3、單克隆抗體單克隆抗體可以保存在50％的甘油存放于-20℃。也可以將其保存在飽和硫酸

ELISA實驗檢測方法的優(yōu)缺點2023/11/20

ELISA實驗檢測方法的優(yōu)缺點：1、直接法（directELISA）將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢：操作手續(xù)簡略，因無須運用二抗可防止交互反響。缺陷：實驗中的一抗都得用酶符號，但不是每種抗體都適合做符號，費用相對進步。2.間接法（indirectELISA）此測定辦法與直接法相似，不一樣在于一級抗體沒有酶符號，改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。優(yōu)勢：二抗能夠加強信號，并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號

傳代培養(yǎng)操作步驟及注意事項2023/11/13

原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的最大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。細胞株也是可以購買的。1、操作步驟：（1）、吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。（2）、向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜。（3）、置37

微生物培養(yǎng)基的操作步驟與注意事項2023/11/06

培養(yǎng)基(culturemedium)是人工配制的，適合微生物生長、分離鑒別的營養(yǎng)基礎(chǔ)。一般基礎(chǔ)培養(yǎng)基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營養(yǎng)物質(zhì)。微生物培養(yǎng)基應(yīng)用范圍很廣。例如，無菌試驗培養(yǎng)基可檢查藥品、生物制品是否污染細菌，它直接關(guān)系到人民用藥安全；在臨床及食品衛(wèi)生檢驗中常用選擇、鑒別培養(yǎng)基，此類培養(yǎng)基中根據(jù)用途不同，需要加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑，以利于特定細菌的分離與鑒別，需要使細菌大量生長、繁殖的各類培養(yǎng)基；病毒培養(yǎng)及疫苗中則需用組織細胞培養(yǎng)液，主要成分為多種氨基

ELISA實驗出現(xiàn)“花板”結(jié)果原因與解決辦法2023/10/30

酶聯(lián)免疫吸附試驗(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay，ELISA)原理是抗原或抗體的固相化及抗原抗體的酶標記。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，由此進行定性或定量分析。該實驗因其靈敏度較高，特異性較好，操作較簡單，可大批量操作而廣泛應(yīng)用于多種傳染性疾病的篩查工作中。然而，“花板”現(xiàn)象的出現(xiàn)，往往會給實驗者判讀結(jié)果帶來麻煩。所謂“花板”，就是空白、陰性、陽性對照及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標本孔的OD值卻偏高，弱陽性結(jié)果較多。

針對?PCR擴增無目的條帶現(xiàn)象分析2023/10/23

聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)是在體外進行的由引物介導(dǎo)的酶促DNA擴增反應(yīng)。PCR反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)：①模板核酸的制備；②引物的質(zhì)量與特異性；③酶的質(zhì)量；④PCR條件。尋找原因亦應(yīng)針對上述環(huán)節(jié)進行分析檢測。1、模板a．模板質(zhì)量不佳，含有雜蛋白質(zhì)，特別是染色體中的組蛋白；模板核酸變性不夠；提取制備模板時丟失過多，或吸入酚。建議選擇質(zhì)量可靠的提取試劑，重新提取高純度基因組模板；若模板為cDNA，需要檢查逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)及其所用RNA的純度及完整度。b．模板中含有尿嘧啶抑制高保真酶的活性，或含有Taq酶抑制劑。c．

有關(guān)RT-PCR詳細闡述2023/10/16

RT-PCR是指將逆轉(zhuǎn)錄(ReverseTranscription；RT)反應(yīng)和PCR(PolymeraseChainReaction)反應(yīng)組合在一起的方法。1、RT-PCR的原理RT-PCR將以RNA為模板的cDNA合成同PCR結(jié)合在一起，提供了一種分析基因表達的快速靈敏的方法。RT-PCR用于對表達信息進行檢測或定量。另外，這項技術(shù)還可以用來檢測基因表達差異或不必構(gòu)建cDNA文庫克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印跡、RNase保護分析、原位雜交及S1核酸酶分析在內(nèi)的RNA

抗原抗體反應(yīng)的主要四特性解析2023/10/08

抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機體內(nèi)進行，也可以在機體外進行?？乖贵w反應(yīng)的過程是經(jīng)過一系列的化學和物理變化，包括抗原抗體特異性結(jié)合和非特異性促凝聚兩個階段，以及由親水膠體轉(zhuǎn)為疏水膠體的變化?？乖贵w反應(yīng)的特點主要有四性：即特異性、比例性、可逆性，階段性。一、特異性抗原表位與抗體超變區(qū)結(jié)合的特異性，是兩者在化學結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補關(guān)系所決定的。這一特性，是應(yīng)用于臨床診斷的基礎(chǔ)。但某些天然抗原具有多種抗原表位，與另一物質(zhì)可能有共同抗原表位，對檢驗結(jié)果產(chǎn)生

常用的熒光素特性2023/10/03

熒光素發(fā)光原理：熒光實際上是一種發(fā)光類型，其中光子最初被吸收，導(dǎo)致原子處于激發(fā)狀態(tài)單線態(tài)。當電子回落到基態(tài)時，會發(fā)射出較低能量的光子。常用的熒光素特性：1、異硫氰酸熒光素（fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC）為黃色或橙黃色結(jié)晶粉，吸收光490~495nm，發(fā)射光520~530nm，明亮的黃綠色熒光。2、四乙基羅丹明（rhodamine，RIB200）為橘紅色粉末，吸收光570nm，發(fā)射光595~600nm，橘紅色熒光。3、四甲基異硫氰酸羅丹明（tetramethylrh

有關(guān)抗體和重組蛋白重點解讀2023/09/21

重組蛋白（recombinantprotein）是指應(yīng)用重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。重組蛋白工程先應(yīng)用基因克隆或化學合成技術(shù)獲得目的基因（geneofinterest，GOI），連接到適合的表達載體，導(dǎo)入到特定的宿主細胞，利用宿主細胞的遺傳系統(tǒng)，表達出有功能的蛋白質(zhì)分子。抗體的本質(zhì)是免疫球蛋白（immunoglobulins），指具有抗體（Ab）活性或化學結(jié)構(gòu)，與抗體分子相似的球蛋白。無論是保存還是運輸，請避免反復(fù)凍融。反復(fù)凍融，冰晶會破壞抗體和重組蛋白的空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致蛋白變性形成

細胞培養(yǎng)的一般過程科普2023/09/11

細胞培養(yǎng)（cellculture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術(shù)，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術(shù)。細胞培養(yǎng)的一般過程如下：一、準備工作準備工作對開展細胞培養(yǎng)異常重要，工作量也較大，應(yīng)給予足夠的重視，推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實驗失敗或無法進行。準備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。

介紹洗滌ELISA平板的技巧2023/09/08

優(yōu)化ELISA的重點之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號，從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結(jié)合事件被保留，在最后一步產(chǎn)生信號。而不充分的洗滌會導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來不理想的結(jié)果。下面介紹一些利用自動洗板機來洗滌ELISA平板的技巧。1、洗滌參數(shù)：第一個主要的參數(shù)是洗滌量。自動洗板機會分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景，那么不要猶豫，將洗滌量調(diào)為高，最好是比包被體積更高。太少的洗滌液會讓一部分分析表面洗滌不到，從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。

標準溶液作為基準物質(zhì)的要求2023/08/28

標準溶液是指已知準確濃度的溶液，它是滴定分析中進行定量計算的依據(jù)之一。不論采用何種滴定方法，都離不開標準溶液。因此，正確地配制標準溶液，確定其準確濃度，妥善地貯存標準溶液，都關(guān)系到滴定分析結(jié)果的準確性。配制標準溶液的直接配制法一般如下：用分析天平準確地稱取一定量的物質(zhì)，溶于適量水后定量轉(zhuǎn)入容量瓶中，稀釋至標線，定容并搖勻。根據(jù)溶質(zhì)的質(zhì)量和容量瓶的體積計算該溶液的準確濃度。能用于直接配制標準溶液的物質(zhì)，稱為基準物質(zhì)或基準試劑，它也是用來確定某一溶液準確濃度的標準物質(zhì)。作為基準物質(zhì)必須符合下列要求：

培養(yǎng)基滅菌效果取決因素解讀2023/08/21

培養(yǎng)基滅菌，影響因素很多，除了培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的種類和數(shù)量，滅菌溫度的高低，時間長短外，還取決于：1.營養(yǎng)成分的保持濕熱滅菌時，微生物被殺死的同時，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng)，造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化，因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。2.微生物的耐熱性細菌芽孢的熱阻較大，滅菌所需要的時間取決于把細菌芽孢減少

細胞因子生物學特點及功能2023/08/16

細胞因子（CK）是由活化免疫細胞和非免疫細胞（如某些基質(zhì)細胞）合成分泌的能調(diào)節(jié)細胞生理功能、參與免疫應(yīng)答和介導(dǎo)炎癥反應(yīng)等多種生物學效應(yīng)的小分子多肽或糖蛋白，是不同于免疫球蛋白和補體的又一類免疫分子。根據(jù)來源zui初將活化淋巴細胞產(chǎn)生的細胞因子稱為淋巴因子（LK），將單核-吞噬細胞產(chǎn)生的細胞因子稱為單核因子（MK）。目前根據(jù)功能，細胞因子大致分為以下六類：白細胞介素；干擾素（IFN）；腫瘤壞死因子（TNF）；集落刺激因子（CSF）；生長因子和趨化因子。細胞因子生物學功能：1.介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答2.

熒光定量PCR中各個環(huán)節(jié)的對照2023/08/07

對照的目的是對檢測的各個環(huán)節(jié)進行監(jiān)控，因此我們按照檢測的流程對對照進行梳理。常規(guī)熒光定量PCR的流程是：樣品采集-運輸-樣品處理-核酸提取-反轉(zhuǎn)錄（RNA病毒）-擴增-結(jié)果讀取。下面看看各個環(huán)節(jié)都可以使用哪些對照？1.陽性對照和陰性對照陽性對照和陰性對照是指在相同的處理條件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進行了提取和擴增最終獲得了陽性結(jié)果和陰性結(jié)果。陰陽性對照強調(diào)處理過程與樣品一致，并且有明確的預(yù)期結(jié)果。2.擴增對照我們通常說的陽性對照和陰性對照指的是擴增試劑盒中附帶的不需要

血清使用實驗人必看注意事項2023/08/01

細胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等，其中牛血清是zui常用的血清，分為胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清，價格昂貴。新生小牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清，如廠家能做到這一點，新生小牛血清的質(zhì)量與胎牛血清的質(zhì)量相差不大。如小牛出生后已哺乳，從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質(zhì)，其質(zhì)量明顯不如前兩種。血清的質(zhì)量，種類及使用的濃度都有可能影響細胞的生長，而不同批次的血清支持細胞生長的能力也不同，尤其是對克隆細胞的生長，某些

胎牛血清和小牛血清不同表現(xiàn)2023/07/24

小牛血清(或新生牛血清)是從出生2周左右牛齡的小牛中獲得的，是一種經(jīng)濟有效的胎牛血清替代品。血清通常用作細胞生長的添加物，擁有多種功能和用途，如：富含大分子蛋白，低分子量的營養(yǎng)素，作為氨基酸、碳水化合物、維生素的額外來源;提高介質(zhì)的緩沖能力;可結(jié)合或中和有毒成分;減少細胞氧化應(yīng)激，減少細胞凋亡;提供促進生長的因子，有助細胞適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。小牛血清提供許多與胎牛血清相同的營養(yǎng)物質(zhì)，蛋白質(zhì)和免疫球蛋白水平稍高，但生長因子較少，適合培養(yǎng)容易培養(yǎng)或?qū)ε囵B(yǎng)環(huán)境要求低的細胞。胎牛血清是應(yīng)用廣泛的細胞培養(yǎng)添加物