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用紫外分光光度法測蛋白質(zhì)含量幾種紫外吸收法2023/09/06

280nm的光吸收法:用標準曲線法進行測定。標準蛋白質(zhì)溶液配制的濃度為1.0mg/mL。常用的標準蛋白質(zhì)為牛血清清蛋白(BSA)。標準曲線的測定:取6支試管，按下表編號并加入BSA(1.0mg/mL)0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，用蒸餾水補體積至5.0mL;測定A280:用第1管為空白對照，各管溶液混勻后在紫外分光光度計上測定吸光度A280，以A280為縱坐標，各管的蛋白質(zhì)濃度或蛋白質(zhì)量(mg)為橫坐標作圖，標準曲線應為直線。利用此標準曲線，根據(jù)測出的未知樣品的A280值，即可

常見滴定分析法2023/09/04

酸堿滴定法：滴定分析法中，酸堿滴定最基本。中心問題：“酸堿平衡”，本質(zhì)是酸堿之間的質(zhì)子傳遞。配位滴定法：主要是：EDTA的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、配位平衡、穩(wěn)定常數(shù)、滴定曲線、指示劑的選擇及消除干擾的方法。重點：配位平衡。在配位滴定中,除主反應外,還有各種副反應干擾主反應的進行,反應條件對配位平衡有很大的影響。氧化還原滴定法：氧化還原滴定法的核心仍然是平衡，是以電子轉(zhuǎn)移為依據(jù)的平衡，反應條件對平衡的影響很大。沉淀滴定法：沉淀滴定法的核心是沉淀平衡。重點是銀量法,根據(jù)確定終點的方法不同,可分為摩爾法、福爾哈德

三氧化鎢晶胞結(jié)構(gòu)介紹2023/08/29

三氧化鎢晶胞結(jié)構(gòu)介紹：三氧化鎢的理想晶體結(jié)構(gòu)屬于ReO3型，與鈣欽礦ABO3結(jié)構(gòu)非常相似，只是W原子占據(jù)著B的位置，而A位置空置。從單純的化學計量比來看，三氧化鎢中W:O為1:3，其理想晶體結(jié)構(gòu)可以看成由一個處在中心的W原子和圍繞在W原子周圍的六個。原子組成的鎢氧八面體[WO6]經(jīng)過共頂連接而成，八面體之間有許多空隙，形成了各種通道。隨著溫度的升高，八面體中的W離子經(jīng)常會偏離中心，導致八面體發(fā)生部分變形，形成多種晶相，如四方相、正交相、單斜相、三斜相等。

硫酸亞鐵銨的制備過程2023/08/25

鐵屑表面油污去除用電子天平稱取2.0g鐵屑放入錐形瓶中，加入1mol·L1NaCO溶液20mL,緩慢加熱約10min，用傾析法傾去堿液（回23收），用20mL自來水洗滌兩次，最后用去離子水20mL將鐵屑洗干凈（如是用純凈的鐵屑，可省去）。硫酸亞鐵的制備往盛有鐵屑的錐形瓶中加入15mL3mol·L-1H2SO4溶液，水浴加熱，輕輕振搖。在加熱過程中應經(jīng)常將錐形瓶搖蕩，以加速反應，并不時加入少量去離子水，以補充被蒸發(fā)的水分，防止FeSO4結(jié)晶出來。待反應基本完成（直到不再產(chǎn)生氫氣氣泡，約需15min

在陶瓷工業(yè)上常遇到因陶土里混有氧化鐵而影響產(chǎn)品質(zhì)量的問題2023/08/23

在陶瓷工業(yè)上常遇到因陶土里混有氧化鐵而影響產(chǎn)品質(zhì)量的問題，解決方法是加入水攪拌成膠體溶液，使陶土和氧化鐵粒子直徑介于1nm到100nm之間，然后插入兩根惰性電極，接通直流電源，這時陶土氧化鐵陶土膠粒帶負電荷，電泳時向陽極移動而聚集在陽極附近；氧化鐵膠粒帶正電荷，電泳時向陰極移動而聚集在陰極附近直徑為10-9~10-7m之間的陶土和氧化鐵粒子都是膠體粒子，通電后都會發(fā)生電泳。陶土膠粒帶負電荷，電泳時向陽極移動而聚集在陽極附近；氧化鐵膠粒帶正電荷，電泳時向陰極移動而聚集在陰極附近。簡單說：就是帶的電

有機化合物中碳原子的成鍵特點2023/08/16

碳原子最外層有4個電子，不易失去或獲得電子而形成陽離子或陰離子。碳原子通過共價鍵與氫、氧、氮、硫、磷等多種非金屬形成共價化合物。由于碳原子成鍵的特點，每個碳原子不僅能與氫原子或其他原子形成4個共價鍵，而且碳原子之間也能以共價鍵相結(jié)合。碳原子間不僅可以形成穩(wěn)定的單鍵，還可以形成穩(wěn)定的雙鍵或三鍵。多個碳原子可以相互結(jié)合成長短不一的碳鏈，碳鏈也可以帶有支鏈，還可以結(jié)合成碳環(huán)，碳鏈和碳環(huán)也可以相互結(jié)合。因此，含有原子種類相同，每種原子數(shù)目也相同的分子，其原子可能有多種不同的結(jié)合方式，形成具有不同結(jié)構(gòu)的分

酒精在不同實驗中的作用2023/08/15

50%的酒精溶液：在脂肪鑒定中,用蘇丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。75%的酒精溶液：用于殺菌消毒,75%的酒精能滲入細胞內(nèi),使蛋白質(zhì)凝固變性.低于這個濃度,酒精的滲透脫水作用減弱,殺菌力不強；而高于這個濃度,則會使細菌表面蛋白質(zhì)迅速脫水,凝固成膜,妨礙酒精透入,削弱殺菌能力。75％的酒精溶液常用于手術前、打針、換藥、針灸前皮膚脫碘消毒以及機械消毒等。95%的酒精溶液：冷卻的體積分數(shù)為95%的酒精可用于凝集DNA.用于DNA的粗提取實驗.95%的酒精溶液和15%的鹽酸等體積混合：可用

有機硅制作流程簡單介紹2023/08/14

一、有機硅的原料準備1.硅粉：優(yōu)質(zhì)硅粉含有高純度的硅元素，通常采用電子級硅等優(yōu)質(zhì)硅粉；2.有機硅前驅(qū)體：有機硅前驅(qū)體為有機硅合成的重要原料，主要有氫氧基、乙烯、丙烯等化合物。二、有機硅的合成反應有機硅的合成反應主要有兩種方法：直接或間接法。1.直接合成法：將有機硅前驅(qū)體與硅粉直接加熱，在惰性氣氛下進行還原反應合成有機硅。2.間接合成法：先將有機硅前驅(qū)體在一定條件下合成成有機硅氫化物，然后將有機硅氫化物與硅粉在惰性氣氛下進行反應，由此得到有機硅。三、有機硅的純化及后續(xù)處理有機硅合成后需要進行純化，

羧酸的結(jié)構(gòu)簡單介紹2023/08/10

羧酸的官能團是羧基，是由羰基和羥基（-OH）相連而成的。但羧酸的性質(zhì)并不是羰基和羥基性質(zhì)的加合，而是具有羧基自身的性質(zhì)。雜化軌道理論認為，羧基中的碳原子是以Sp2雜化的。碳原子的3個Sp2雜化軌道分別與2個氧原子、1個羥基的碳原子或1個氫原子形成3個σ鍵，并處于同一平面上。羧基碳原子上未參與雜化的p軌道與羰基氧原子上的p軌道從側(cè)面平行重疊形成∏鍵。羥基中的氧原子上有一對未共用電子對，可與∏鍵形成p-∏共軛體系。在p-∏共軛體系中，電子的離域使羥基氧原子上的電子云向羰基轉(zhuǎn)移，導致羥基氧上的電子云密

瓊脂粉使用過程中常見問題2023/07/31

瓊脂粉常用作微生物培養(yǎng)基、植物培養(yǎng)基原材料，關于瓊脂粉性狀和使用的常見問題有以下幾點：瓊脂粉在配置MS培養(yǎng)基過程中，MS培養(yǎng)基顏色變黃？是否會對實驗造成不良影響:由于瓊脂粉的批次不一樣，色澤上可能會有細微差異，有些瓊脂粉略顯黃色，并非質(zhì)量問題，不會對實驗造成不良影響。瓊脂粉凝膠強度是什么意思:一般瓊脂粉的凝膠強度（1.5%）≥800g/cm2，800-1200g/cm2，根據(jù)不同批次會有不同數(shù)值。瓊脂粉凝膠強度指的是1.5g瓊脂粉溶于100ml水后溶解凝固后，放置20℃條件下靜置約10小時以上，

滴定管的使用介紹2023/07/28

使用前的準備洗滌：自來水→洗液→自來水→蒸餾水。涂凡士林：活塞的大頭表面和活塞槽小頭的內(nèi)壁。檢漏：將滴定管內(nèi)裝水至最高標線，夾在滴定管夾上放置2分鐘。酸式滴定管：用濾紙檢查活塞兩端和管夾是否有水滲出，然后將活塞旋轉(zhuǎn)1800，再檢查一次。堿式滴定管：放置2分鐘，如果漏水應更換橡皮管或大小合適的玻璃珠。潤洗：為保證滴定管內(nèi)的標準溶液不被稀釋，應先用標準溶液洗滌滴定管3次，每次5~10mL。裝液：左手拿滴定管，使滴定管傾斜，右手拿試劑瓶往滴定管中倒溶液，直至充滿零刻線以上。排氣泡：酸式滴定管尖嘴處有氣

離子對試劑如何選用2023/07/27

1.選擇一根適合的色譜柱，常為C18柱。2.準備流動相時僅使用HPLC級別的水和色譜級試劑；3.選擇能給出最佳分離度的流動相成分和濃度。4.如果樣品中有非離子化物質(zhì)，在嘗試離子化分離之前首先優(yōu)化分離情況。5.選擇合適的離子對系列試劑以提供相應的離子配對：對于酸性分析物使用酸性離子對試劑；對于堿性分析物使用堿性離子對試劑。6.通過比較選擇所得分離度較好的離子對試劑。7.一旦離子對試劑已經(jīng)確定，調(diào)節(jié)流動相的pH值將分離度較大化；因為微小的pH值改變對保留性質(zhì)和選擇性都有較大的影響，所以仔細小心的小幅

常用菌種的保藏法2023/07/26

菌種的保藏常采用干燥、低溫和隔絕空氣等措施，將其新陳代謝限制在較低范圍內(nèi)，使其生命活動處于半長期性的休眠狀態(tài)，使菌種能夠存活、不污染雜菌、不發(fā)生或較少發(fā)生變異，保存菌種原有的各種生物學性狀。較常用的菌種保藏法有斜面或半固體傳代保藏法，以及冷凍真空干燥法和液氮超低溫保藏法等。其它尚有載體保藏法和懸液保藏法等。斜面或半固體傳代保藏法:此法保藏菌種常用的培養(yǎng)基有普通肉湯瓊脂斜面、血清斜面、血瓊脂斜面、雞蛋斜面和血清肉湯半固體培養(yǎng)基等等。在斜面或半固體培養(yǎng)基表面，往往加入滅菌液體石蠟，用以隔絕空氣。此外

基因合成實驗步驟介紹2023/07/25

1.將兩種寡核苷酸各1μg加入微量離心管中，加水至17μl，再加2μl的10×測序酶緩沖液。70℃加熱5min，然后在合適的退火溫度下保溫5min，取2μl留待以后的分析。2.加2μl4種dNTP混合液和10U測序酶，30℃溫育30min。3.70℃10min滅活DNA聚合酶，取2μl留待以后的分析。4.加10×限制性內(nèi)切酶反應緩沖液，加水和20——100U的適合于克隆的限制性內(nèi)切酶至100μl。適當?shù)臏囟认孪?h以上。5.酚抽提，加100μl4mol/l乙酸銨和400μl的無水乙醇，-70℃

MTT比色法檢測細胞活性操作步驟（背根神經(jīng)節(jié)細胞培養(yǎng)為例）2023/07/24

無菌條件下取新生一天的SD大鼠背根神經(jīng)節(jié)。鏡下去除神經(jīng)根和外膜，放入1ml0.1%膠原酶中37℃消化30min，每5min搖勻一次。洗去膠原酶，吹打分散后，接種于預先涂有L-多聚賴氨酸的96孔培養(yǎng)板中，每孔含100μl無血清L15培養(yǎng)基，細胞約800個。實驗組分別加入純化的表達蛋白（分別以不同的蛋白濃度），陰性對照加入等體積表達蛋白的溶劑。37℃5%CO2培養(yǎng)48hr后，每孔加入10μlMTT，37℃5%CO2孵育4hr。加入100μl20%的SDS處理液，37℃孵育20hr。用EL×800微孔

枯草芽孢桿菌的實驗2023/07/21

實驗材料:枯草芽孢桿菌，種子培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)基，恒溫搖床，無菌吸管，試管，三角瓶，發(fā)酵罐。實驗方法:工藝流程:試管斜面菌種（12h，37℃）→接種(1環(huán)菌苔)→搖瓶種子培養(yǎng)液中，250mL三角瓶振蕩培養(yǎng)（12h，37℃）→種子培養(yǎng)液，接種（1%－5%）→機械攪拌發(fā)酵罐發(fā)酵。發(fā)酵罐種子液的制備:搖瓶種子培養(yǎng)基：葡萄糖20g，牛肉膏1g，蛋白胨5g，NaCl5g，H2O1000ml，pH自然，高壓滅菌鍋121℃滅菌20min。搖瓶種子培養(yǎng)基分裝于250ml三角瓶，每瓶50ml。從斜面上挑取一環(huán)菌種，

細胞是什么簡單介紹2023/07/18

細胞是構(gòu)成所有生物的基本組成部分。但是，沒有顯微鏡，您將看不到大多數(shù)單個細胞。在1660年代，科學家羅伯特·胡克（RobertHooke）通過使用顯微鏡檢查軟木的一部分發(fā)現(xiàn)了細胞。如果看一下地球上生物的一般組織，就會發(fā)現(xiàn)細胞是基礎。細胞可以形成組織，可以創(chuàng)建器官和器官系統(tǒng)。不同的分子和結(jié)構(gòu)構(gòu)成了實際的細胞。蛋白質(zhì)由稱為氨基酸的較小單位組成。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可能因其復雜性而異，您可以將其分類為一級，二級，三級或四級。這種結(jié)構(gòu)或形狀決定了蛋白質(zhì)的功能。碳水化合物可以是為細胞提供能量的簡單碳水化合物，也可

電泳的實驗步驟2023/07/17

1.用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈，放在制膠平板上，封閉模具邊緣，架好梳子。2.根據(jù)欲分離DNA片段大小用凝膠緩沖液配制適宜濃度的瓊脂糖凝膠：準確稱量瓊脂糖干粉，加入到配膠用的三角燒瓶內(nèi)，定量加入電泳緩沖液（一般20~30ml）。3.放入到微波爐內(nèi)加熱熔化。冷卻片刻，加入一滴熒光染料，輕輕旋轉(zhuǎn)以充分混勻凝膠溶液，倒入電泳槽中，待其凝固。4.室溫下30~45分鐘后凝膠全凝結(jié)，小心拔出梳子，將凝膠安放在電泳內(nèi)槽。5.向電泳槽中倒入電泳緩沖液，其量以沒過膠面1mm為宜，如樣品孔內(nèi)有氣泡，應設法除去。

0.01M 磷酸鹽緩沖液（PBS）配制簡單介紹2023/07/14

稱取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌（至少20分鐘），保存存于室溫或4℃冰箱中。需要注意的是，通常所說的濃度0.01M指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na離子或K離子的濃度，Na離子和K離子只是用來調(diào)節(jié)滲透壓的。如果是用于免疫組化的話，則需要在配置的時候分別加入100u/ml青霉素和鏈霉素之后再調(diào)PH

細胞培養(yǎng)步驟及需要注意2023/07/05

復蘇：1.把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。2.把上述細胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中（用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來），1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。3.把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動，使培養(yǎng)皿中的細胞均勻分布。4.標好細胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細胞貼壁后換培養(yǎng)基。5.3天換一次培