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答疑小課堂—逐典全能核酸酶疑惑解答第2期2024/04/03: Q1:在使用溫度低于最適溫度37℃時,如何保證全能核酸酶的應(yīng)用效果?由于逐典全能核酸酶在0-45°C溫度范圍下都具有活力,全能核酸酶對核酸的消化效果取決于酶的添加量、消化溫度和反應(yīng)時間,當(dāng)反應(yīng)溫度較低時,可以適當(dāng)延長反應(yīng)時間;不能依賴增加全能核酸酶添加量保證消化效果,避免添加量過大導(dǎo)致全能核酸酶殘留的問題。Q2：消化體系中的什么物質(zhì)會影響全能核酸酶的酶活和消化效果?消化體系中若含有高濃度的鈉鹽、鉀鹽,超過200mM時會受到明顯抑制,其余高于100mM磷酸鹽,100mM硫酸銨等均會抑制酶活。特別是

AI制藥，9圖全解2024/04/03: 所謂AI（Artificialintelligence，人工智能）制藥，即以醫(yī)藥大數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，通過運用機器學(xué)習(xí)、深度學(xué)習(xí)等AI技術(shù)替代大量實驗，對藥物結(jié)構(gòu)、功效等進(jìn)行快速分析，以達(dá)到縮短試驗周期、節(jié)省成本、促進(jìn)新藥發(fā)現(xiàn)、提升試驗成功率等目的。AI技術(shù)從1956年提出發(fā)展至今已有60余年，全球已有700多家AI制藥企業(yè)。我國目前已有AI初創(chuàng)制藥企業(yè)近80家，成立于2014年的晶泰科技和英矽智能都已完成D輪融資，成為國內(nèi)AI制藥領(lǐng)域的獨角獸。AI浪潮下，國家也出臺相應(yīng)政策大力扶持，發(fā)改委于2022年

Lonza 384孔高通量電轉(zhuǎn)對SAECs進(jìn)行自動陣列CRISPR篩選，賦能新藥研發(fā)2024/04/01: SAECs（小氣道上皮細(xì)胞，Catalog:CC-2547）是藥物發(fā)現(xiàn)中靶點鑒定和驗證的重要模型。在本應(yīng)用中簡要總結(jié)了利用RNPs、384孔Nucleofector™系統(tǒng)（Catalog:AAU-1001）和P3原代細(xì)胞384孔Nucleofector™試劑盒（Catalog:V5SP-3002）對SAECs進(jìn)行自動陣列CRISPR篩選的工作流程。隨著系統(tǒng)生物學(xué)與交叉學(xué)科方法的應(yīng)用，要求細(xì)胞和系統(tǒng)模型越來越接近體內(nèi)細(xì)胞的功能。這就意味著將來的細(xì)胞轉(zhuǎn)染多數(shù)會是原代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。而傳統(tǒng)的方法很難成功轉(zhuǎn)

臨床應(yīng)用|倫敦5家醫(yī)院使用Barkey Plasmatherm無水復(fù)蘇儀進(jìn)行血漿解凍2024/04/01: 生物醫(yī)學(xué)科學(xué)和輸血質(zhì)量專家TolaElegbe（理學(xué)學(xué)士、理學(xué)碩士）的研究結(jié)果發(fā)表在2019年出版的同行評審期刊《輸血》上，她說：“與我們一起，英國的許多其他醫(yī)院都在使用一種創(chuàng)新的干融醫(yī)療設(shè)備——BarkeyPlasmatherm無水復(fù)蘇儀。它在45°C下解凍血漿,安全又快捷。我們進(jìn)行了這些廣泛的驗證測試，以確保我們自己的安全性?！盓legbe女士與LauraGreen博士（MBBS）共同進(jìn)行并發(fā)表了這些研究，在6個月的時間里，她的團(tuán)隊充分評估和測試了傳統(tǒng)水?。═hermogenesisTher

白細(xì)胞介素2（IL-2)的位點特異性聚乙二醇化通過持續(xù)激活調(diào)節(jié)性T細(xì)胞2024/04/01: 白介素2(IL-2)選擇性結(jié)合調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)上的三聚體IL-2受體(IL-2R)，優(yōu)先激活Treg細(xì)胞，使IL2成為有前景的治療自身免疫性疾病的細(xì)胞因子。然而，IL-2的治療窗口窄且半衰期短。在這篇研究中，協(xié)和醫(yī)院張烜教授及合作團(tuán)隊通過無銅點擊反應(yīng)在位點摻入含疊氮化物的氨基酸，將細(xì)胞因子與聚乙二醇（PEG）部分正交結(jié)合而得到藥代動力學(xué)和半衰期都大大提高的IL-2（如上圖所示），尤其是在Tyr31和Thr51位點均被20kDaPEG化的IL-2優(yōu)先結(jié)合IL-2α亞基而不是β亞基，從而持續(xù)

逐典重組胰蛋白酶消化液 — 細(xì)胞解離更優(yōu)選擇2024/04/01: 胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端肽鍵。傳統(tǒng)的胰蛋白酶由豬、牛和羊等動物的胰臟提取獲得，曾被廣泛應(yīng)用于生物制品的生產(chǎn)。動物來源的胰蛋白酶有引入外源性病毒的風(fēng)險，例如在上世紀(jì)60年代，曾發(fā)生脊髓灰質(zhì)炎疫苗、減毒黃熱活疫苗檢出SV40病毒和禽白血病病毒的事件，2010年，某廠家的輪狀病毒疫苗檢出了豬圓環(huán)病毒序列。中國藥典2020版三部指出：“生物制品的原材料及輔料……應(yīng)盡可能選擇無病毒安全性風(fēng)險或低風(fēng)險的原材料和輔料用于生物制品生產(chǎn)，如選擇采用重組技術(shù)生產(chǎn)的生物材料替代動物源

重組胰蛋白酶：特點解析及其在疫苗中的應(yīng)用價值2024/03/29: 一，什么是重組胰蛋白酶？重組胰蛋白酶是指利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)，它是絲氨酸蛋白水解酶家族成員之一，屬肽鏈內(nèi)切酶，國際酶學(xué)編號為：EC3.4.4.4。二，胰蛋白酶的來源及水解特異性最初發(fā)現(xiàn)并使用的胰蛋白酶是從牛、羊、豬的胰臟提取的，其廣泛存在于在脊椎動物和微生物中，不同來源其最適溫度有所不同，其中哺乳動物源胰蛋白酶與人體最為相近。胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原合成場所，合成后作為胰液的成分而分泌，經(jīng)腸激酶或胰蛋白酶切去前導(dǎo)肽而形成具有活性的胰蛋白酶，為肽

CAR-T療法：“治愈”自身免疫的下一道光2024/03/29: 背景目前，自身免疫性疾病主要由廣泛的免疫抑制劑和阻斷抗體治療，這些藥物可以控制疾病，但通常不能治愈。CAR-T療法是針對某些類型血癌的成熟治療方法，靶向CD19的嵌合抗原受體（CAR）T細(xì)胞在B細(xì)胞惡性腫瘤中非常有效。同時，CD19CART細(xì)胞也靶向觸發(fā)自身免疫性疾?。ˋID）的自身反應(yīng)性B細(xì)胞，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、特發(fā)性炎癥性肌炎（IIM）和系統(tǒng)性硬化癥（SSc）。CAR-T細(xì)胞療法的下一個應(yīng)用會用于治療自身免疫性疾病嗎？或許在近期德國的一項相關(guān)性研究中能找到答案。如圖，B細(xì)胞在自身

帶您認(rèn)識“表皮細(xì)胞生長因子”— EGF2024/03/28: 一，EGF簡介EGF的發(fā)現(xiàn)是由蒙塔爾奇尼（Montalcini）和科恩（Cohen）教授在純化小鼠頜下腺神經(jīng)生長因子(NGF)時發(fā)現(xiàn)一種可促進(jìn)新生小鼠提早開眼、長牙及對熱穩(wěn)定的多肽類物質(zhì)，此多肽物具有抑制胃酸分泌作用，稱為“抑胃素”，后發(fā)現(xiàn)“抑胃素”可直接促進(jìn)表皮生長，因此命名為表皮生長因子（EGF）。兩位生物學(xué)家，也因此獲得1986年的諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。1974年在人尿液中提純獲得人源表皮生長因子(hEGF)，其基因定位于4q25，由53個氨基酸構(gòu)成，分子量約6KDa，含有3個二硫鍵形成了3個分子

生物界的“小燈泡”— 熒光素酶的應(yīng)用！2024/03/28: 在實驗中大家經(jīng)常遇到這些問題：1.通過各種在線軟件進(jìn)行預(yù)測獲得miRNA靶向基因，但miRNA對靶基因的實際作用不清楚;2.又或者預(yù)測到轉(zhuǎn)錄因子對基因的表達(dá)起抑制或增強的作用，而具體活性以及結(jié)合位點仍然需驗證;3.lncRNA或者circRNA吸附miRNA效果如何還未知。這個時候就需要用到熒光素酶(Luciferase)實驗。熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中最有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶，分別命名為

單細(xì)胞功能蛋白組學(xué)助力凱特和Carl June團(tuán)隊的Car-T研究2024/03/27: 細(xì)胞治療臨床研究方案IsoPlexis單細(xì)胞功能蛋白質(zhì)組技術(shù)將單細(xì)胞技術(shù)和功能性蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)合起來采用微流控微室反應(yīng)和抗體條碼技術(shù)在單細(xì)胞水平對分泌的多種細(xì)胞因子和胞內(nèi)磷酸化蛋白組等在活細(xì)胞狀態(tài)下進(jìn)行高靈敏多重檢測分析，對功能蛋白進(jìn)行定性、定量，以此洞察單細(xì)胞功能異質(zhì)性。通過簡單易用的生信分析軟件對單細(xì)胞數(shù)據(jù)進(jìn)行自動分析，得到具有指導(dǎo)性的結(jié)果，幫助下一步?jīng)Q策。CD19CAR-T治療NHL臨床療效相關(guān)生物標(biāo)志物發(fā)表文章：Preinfusionpolyfunctionalanti-CD19chime

使用Revvity VICTOR Nivo進(jìn)行細(xì)胞水平的HTRF檢測2024/03/27: 在藥物研發(fā)過程中常用細(xì)胞學(xué)分析，來揭示化合物在體外誘導(dǎo)的效應(yīng)。本文中，我們將介紹使用VICTORNivo進(jìn)行細(xì)胞水平的HTRF檢測，分析α-微管蛋白乙?；?K40水平。在人類神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，常發(fā)生微管蛋白乙?；蚨粡V泛研究。αβ-微管蛋白異二聚體形成微管，微管是細(xì)胞骨架中的基本聚合物。通過翻譯后修飾（PTMs），細(xì)胞調(diào)節(jié)微管結(jié)構(gòu)和功能。α-微管蛋白在K40上的乙酰化在其他PTMs中起關(guān)鍵作用。已知抑制HDAC6（組蛋白去乙?；?）后，會使微管蛋白乙酰化上調(diào)，我們采用了小鼠成纖維細(xì)胞（NIH

去除核酸污染逐典生物耐高鹽全能核酸酶在150-900mM鹽濃度內(nèi)均保持高酶活2024/03/26: 一，宿主DNA殘留控制的法規(guī)要求隨著生物醫(yī)藥行業(yè)的快速發(fā)展，越來越多的生物制品開始服務(wù)于人類健康，治療性抗體藥物、細(xì)胞治療、病毒載體疫苗等需求日益龐大。不同于傳統(tǒng)口服類藥物，大量生物制品通過注射等給藥方式直接進(jìn)入體內(nèi)，因此更需要嚴(yán)格的質(zhì)量監(jiān)管來保證生物制品的安全性和有效性。宿主核酸的殘留因其可能帶來的傳染性或者致瘤的風(fēng),險而被作為生物制品安全監(jiān)管中的重要一項。WHO及世界各國對宿主核酸的殘留都有嚴(yán)格的規(guī)定如疫苗及治療類生物制品的DNA殘留量通?？刂圃?00pg/劑量以下，部分產(chǎn)品甚至要求DNA殘

白介素2（IL-2)如何助力腫瘤治療，你了解嗎？2024/03/26: 白細(xì)胞介素-2（interleukin2），簡稱白介素-2（IL-2），在趨化因子家族中扮演著重要的角色，參與機體免疫反應(yīng)的表達(dá)和調(diào)節(jié)，已廣泛應(yīng)用于腫瘤治療的佐劑。一，IL-2家族和分類白介素是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子（Cytokine），最初由白細(xì)胞產(chǎn)生又在白細(xì)胞間發(fā)揮作用，由此得名。1979年，第二屆國際淋巴因子專題會議將免疫應(yīng)答過程中白細(xì)胞間相互作用的細(xì)胞因子統(tǒng)一命名為白介素（Interleukin，IL），根據(jù)新確定的因子依次命名，例如IL-1、IL-2……。目前至少

Barkey細(xì)胞治療干式復(fù)蘇儀，你值得擁有！2024/03/26: 作為中國生命科學(xué)行業(yè)，SinoBioTool（上海津禾生物科技有限公司）致力于促進(jìn)與加速中國細(xì)胞治療，疫苗，干細(xì)胞行業(yè)的發(fā)展。上海津禾生物是丹麥Chemometec和德國Barkey中國區(qū)辦事處。2022年6月8日，Azenta,Inc.（納斯達(dá)克代碼：AZTA）宣布了一項最終協(xié)議，收購為醫(yī)療、生物技術(shù)和制藥行業(yè)提供可控速率解凍設(shè)備的供應(yīng)商BarkeyHoldingGmbH及其子公司（以下簡稱：Barkey）。Barkey總部位于德國Leopoldshohe，在血漿、血液和干細(xì)胞的自動解凍方面有

Revvity VICTOR Nivo™ 為您提供一站式的細(xì)胞活性、毒性檢測2024/03/26: 引言基于細(xì)胞活性和毒性檢測的實驗在基礎(chǔ)研究中有廣泛的應(yīng)用，類似的實驗也用于臨床前研究，以表征化合物誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性和副作用。相對于生物化學(xué)的方法，細(xì)胞實驗?zāi)軌蛱峁└嗟纳硐嚓P(guān)數(shù)據(jù)，如細(xì)胞增殖，形態(tài)和信號通路等。ATPlite1step化學(xué)發(fā)光實驗使用代謝活性細(xì)胞中的ATP作為細(xì)胞活力的標(biāo)志物。利用細(xì)胞凋亡和壞死時ATP濃度降低這一方法監(jiān)測化合物誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用是非?？焖俸挽`敏的方法。新面市的VICTORNivo™多功能酶標(biāo)儀其整合了光吸收，化學(xué)發(fā)光，熒光強度，時間分辨熒光以及熒光偏正五種檢測模

Lonza 值得信賴的設(shè)備助力大規(guī)模儀器設(shè)備更新2024/03/25: 2024年3月13日，國務(wù)院印發(fā)《推動大規(guī)模設(shè)備更新和消費品以舊換新行動方案》，實施設(shè)備更新、消費品以舊換新、回收循環(huán)利用、標(biāo)準(zhǔn)提升四大行動，推進(jìn)重點行業(yè)設(shè)備更新改造，包括數(shù)字化轉(zhuǎn)型、智能化升級等重要方向，到2027年實現(xiàn)多個領(lǐng)域設(shè)備投資規(guī)模增長等目標(biāo)。Lonza作為全球制藥和生物技術(shù)行業(yè)的開發(fā)和制造合作伙伴，通過數(shù)十年的技術(shù)沉淀與經(jīng)驗累積，致力為生命科學(xué)的科研機構(gòu)和研發(fā)企業(yè)帶來值得信賴的設(shè)備：384孔Nucleofector™高通量電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，助力AI制藥自動化4D-Nucleofector™

瑞孚迪全面助力國務(wù)院大規(guī)模儀器更新項目2024/03/25: 隨著閉幕,國務(wù)院印發(fā)的《推動大規(guī)模設(shè)備更新和消費品以舊換新行動方案》正式出臺,提出三個堅持:堅持市場為主要,政府引導(dǎo);堅持鼓勵先進(jìn),淘汰落后;堅持標(biāo)準(zhǔn),有序提升?？茖W(xué)、有序地實現(xiàn)設(shè)備更新,提升產(chǎn)業(yè)水平。這是繼2022年“2000億貼息項目”后的又一重大舉措，對國內(nèi)重要領(lǐng)域,重要行業(yè)的設(shè)備優(yōu)化、技術(shù)提升有重大意義。在瑞孚迪(Revvity),我們將“不可能”視為靈感,將“做不到”視為原動力。瑞孚迪提供健康科學(xué)解決方案、前沿技術(shù)和專業(yè)服務(wù),業(yè)涵蓋科研探索、開發(fā)、診斷、治療的端到端全流程。依托在轉(zhuǎn)化多

應(yīng)用分享 | 多文解讀 IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21對NK細(xì)胞功能的影響2024/03/25: 自然殺傷細(xì)胞(naturalkillercell，NK)是機體重要的免疫細(xì)胞，不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生，能夠識別靶細(xì)胞、殺傷介質(zhì)。白細(xì)胞介素，簡稱白介素，是指在白細(xì)胞或免疫細(xì)胞間相互作用的淋巴因子，它和血細(xì)胞生長因子同屬細(xì)胞因子。兩者相互協(xié)調(diào)，相互作用，共同完成造血和免疫調(diào)節(jié)功能。其中多數(shù)與NK細(xì)胞密切相關(guān)，或直接或間接參與其調(diào)控，白細(xì)胞介素例如IL-2、IL-15、IL-18作為NK細(xì)胞的刺激因子，常被用于其體外擴增，活化，參與

掌握這三點，胰蛋白酶區(qū)分不再是難點！2024/03/25: 胰蛋白酶，作為一種重要的消化酶，在生物體的消化過程中起著關(guān)鍵作用。根據(jù)其來源和生產(chǎn)方式的不同，胰蛋白酶大致可以分為兩大類：動物源性胰蛋白酶和非動物源性胰蛋白酶。傳統(tǒng)使用的動物源性的胰蛋白酶，普遍發(fā)現(xiàn)于脊椎動物消化系統(tǒng)，直接提取自牛或豬的胰腺組織；非動物源性胰蛋白酶是利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的，也被稱為重組胰蛋白酶。通過基因重組技術(shù)，人們可以在特定的生物體（如細(xì)菌或酵母）中表達(dá)胰蛋白酶的基因，從而大量生產(chǎn)胰蛋白酶。一，應(yīng)用區(qū)別胰蛋白酶理化性質(zhì)胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，通過多重結(jié)晶方式純化，并進(jìn)

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