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五大貼壁細胞培養(yǎng)難題全解析,讓你輕松上手!2024/04/24
貼壁細胞(adherentcells),這類細胞的生長必須有可以貼附的支持物表面,如:培養(yǎng)(瓶)器皿壁上,細胞依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼壁因子才能在該表面上生長,繁殖。細胞一經貼壁就迅速鋪展,然后開始進行有絲分裂,并很快進入對數(shù)生長期。當細胞在該表面生長后,一般形成兩種形態(tài),即成纖維樣細胞性或上皮樣細胞。貼壁細胞生長過程分為五個時期,分別是游離期、貼壁期、潛伏期、對數(shù)期、平臺期和衰退期。貼壁細胞因其培養(yǎng)過程較為繁瑣,所以培養(yǎng)時更容易出現(xiàn)問題。今天,就圍繞貼壁細胞培養(yǎng)中常見的5大常見問題,與
到底什么是細胞因子是什么?2024/04/24
一,什么是細胞因子細胞因子(cytokine,CK)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產生的低分子量可溶性蛋白質,具有調節(jié)固有免疫和適應性免疫、血細胞生成、細胞生長以及損傷組織修復等多種功能。細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、、腫瘤壞死因子、集落細胞刺激因子、趨化因子、生長因子在復發(fā)性流產病因中,細胞因子與炎癥、內異癥、凝血、免疫等密切相關,最終影響母胎界面TH1/TH2免疫平衡,繼發(fā)流產。Th1細胞因子包括白介素2(IL-2)、白介素12(IL-12)、腫瘤壞死因子(TNF)-α、腫瘤
核藥:前世今生、市場規(guī)模、準入壁壘、研發(fā)熱點2024/04/23
01放射性藥物(核藥)是什么?放射性藥物(或稱“核藥”)是指含有放射性核素供醫(yī)學診斷和治療用的一類特殊藥物,通常由放射性同位素搭配專門定位于特定器官及組織的分子試劑組成,其中分子試劑的作用是將放射性同位素輸送至特定器官、組織或細胞?;颊咄ㄟ^口服或注射服用放射性藥物后,核醫(yī)學醫(yī)師利用伽馬照相機(如PET或SPECT)檢測用于特定疾病診斷及治療的放射性藥品所含放射性同位素發(fā)出的輻射。放射性藥物能利用其所標記載體的生物學特性反映病變基因、分子、代謝及功能狀態(tài),能夠更早期、更特異洞察疾病分子層面的信息,
Revvity LabChip微流控毛細管電泳檢測mRNA純度及完整性的應用2024/04/23
近年來,基于核酸的技術包括mRNA和質粒DNA被廣泛地用于遺傳疾病的治療、癌癥預防,以及疫苗等研究中。與傳統(tǒng)的滅活或減毒活疫苗相比,mRNA疫苗的生產速度相對更快、成本效益更高,而更快的疫苗開發(fā)需要一種高效和快速的檢測方法來監(jiān)測mRNA的純度和完整性。默沙東公司利用LabChip微流控毛細管電泳來檢測mRNA純度及完整性。LabChipGXII系統(tǒng)是Revvity公司(原PerkinElmer)的,該自動化系統(tǒng)使用“芯片上的實驗室”技術進行電泳。在LabChip上,將含有藍色熒光染料的凝膠篩分基
賽橋生物的Gentle Flex系列助力精繕生物CD20 NK細胞療法IND2024/04/22
喜訊Congratulations賽橋生物熱烈祝賀復星醫(yī)藥控股子公司上海精繕生物科技有限責任公司(以下簡稱“精繕生物”)自主研發(fā)的“GCK-01細胞注射液”的IND申請已經獲得CDE受理,受理號:CXSL230084312月7日,精繕生物的GCK-01細胞注射液的IND申請獲得CDE受理。GCK-01細胞注射液是精繕生物自主研發(fā)的I類生物制品,是同源異體外周血來源的通用現(xiàn)貨型CAR-NK細胞產品,適應癥為B細胞慢性淋巴細胞白血病。該產品采用了賽橋生物的GentleFlexPro高通量全封閉自動化
CRISPR基因編輯的轉染技巧看這一篇就夠啦!2024/04/22
02/下篇Knock-in對于Knock-in,目前還存在一定的難度,大多數(shù)的出版物只能實現(xiàn)10-40%的敲入效率,不同位點也存在差異。NatureBiotechnology今年5月的一篇出版物利用SLEEK(SeLectionbyEssential-geneExonKnock-in)技術可以在T細胞上實現(xiàn)超過90%的KI效率,同樣在其他常用的免疫細胞如NK,Bcell,IPSC等細胞都實現(xiàn)了非常高的KI效率。對于常規(guī)的KI實驗,我們依然可以從以下方面考量進行進一步優(yōu)化:DonorDNA用量的測
全能核酸酶-病毒純化及檢測利器不容錯過!2024/04/22
全能核酸酶,又稱非限制性核酸內切酶,是一種來源于SerratiaMarcescen的非特異性核酸內切酶,可以降解各種形式的(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀,天然或變性)DNA和RNA,產生3-5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸。無論是實驗研究,還是工業(yè)生產,全能核酸酶都是目前能夠同時有效去除DNA和RNA的酶。另外,全能核酸酶在非常廣泛的條件下(6Murea,0.1MGuanidineHCl,0.4%TritonX100,0.1%SDS,1mMEDTA,1mMPMSF)都能保持很高的穩(wěn)定性和消化活力,非
重磅歸來!IL-2藥物研發(fā)新突破2024/04/22
在整個免疫治療,IL-2有著非常重要的地位。1991年,IL-2藥物Onak(Aldesleukin,Proleukin)的批準上市是免疫學發(fā)展重要突破之一,推動了后續(xù)免疫治療發(fā)展歷程。但Onak因為致死的血管泄漏綜合征等嚴重的系統(tǒng)毒性問題一直沒有被普及使用,在腫瘤治療市場中幾近銷聲匿跡。近年來,基于對IL-2生物學機制了解加深及工程化技術的進步,IL-2新藥開發(fā)活躍,圍繞IL-2的優(yōu)化做出了不同方向的努力,但截止至今,市場上除了Onak之外仍無任何一款IL-2走到監(jiān)管機構的面前,未能取得臨床突
Revvity VICTOR Nivo匹配日常生化和細胞學檢測2024/04/19
珀金埃爾默生命科學與診斷業(yè)務公司正式更名,新品牌Revvity揚帆起航。依托在生命科學與診斷領域的創(chuàng)新,新品牌Revvity致力于改善人類健康與生活。Revvity源自兩個詞語,“revolutionize”(rev,“變革”)和“vita”(vit,拉丁語意為“生命”),提供從科研探索到開發(fā)、從診斷到治療的端到端專業(yè)知識和解決方案。我們?yōu)槟峁膶嶒炇一A科研到臨床前小動物活體成像平臺,包括:IVISLuminaLT二維活體小動物成像系統(tǒng)、VICTORNivo多功能微孔板檢測設備、MicroB
Chaselection逐典耐高鹽核酸酶:突破高鹽環(huán)境,實現(xiàn)高效核酸去除!2024/04/18
隨著生物醫(yī)藥行業(yè)的迅猛發(fā)展,越來越多的生物制品正逐步應用于人類健康的維護與治療,其中包括治療性抗體藥物、細胞治療以及病毒載體疫苗等,這些產品的需求呈現(xiàn)出快速增長的趨勢。與傳統(tǒng)口服類藥物相比,生物制品通常通過注射等方式直接進入人體,因此,對其安全性和有效性提出了更高要求。其中,宿主核酸殘留作為潛在的傳染性和致瘤性風險,成為生物制品安全監(jiān)管中至關重要的環(huán)節(jié)。一HCD殘留控制的法規(guī)要求世界衛(wèi)生組織(WHO)、國家藥品監(jiān)督管理局藥品評審中心(CDE)以及各國政府均針對生物制品中宿主核酸殘留制定了嚴格的標
TrypLUS/TrypLE消化液和Trypsin到底有什么區(qū)別2024/04/17
Trypsin一種來源于牛/豬基因組的胰蛋白酶,于大腸桿菌中重組表達。屬于絲氨酸蛋白酶家族,可特異性切割賴氨酸(K)及精氨酸(R)C末端的肽鍵。大腸桿菌重組表達,無動物源性。?應用領域:貼壁培養(yǎng)細胞的分離,原代組織的單細胞解離等。涉及領域包括疫苗及抗體的生產、干細胞培養(yǎng)、免疫細胞治療及藥物篩選等。?活性定義:25℃,pH7.6,每分鐘酶解N-benzoylL-arginineethylesterhydrochloride(BAEE)使253nm下的吸收值增加0.003定義為一個活力單位。?去除方
掌握幾種核酸提取方法,選對實驗輕松沒煩惱2024/04/17
核酸提取作為分子實驗的“第一步”,幾乎是所有實驗的基本,PCR、qPCR、建庫測序等都需要核酸才能順利進行。核酸提取純化質量是保證后續(xù)檢測數(shù)據(jù)準確性的前提。一,什么是核酸酶核酸是一類由核苷酸聚合成的生物大分子,是構成生命所必需的基本物質之一,在生命系統(tǒng)中主要起到作為遺傳信息載體的作用,主要分為脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),其中RNA又可以根據(jù)功能的不同分為核糖體RNA(rRNA),信使RNA(mRNA)和轉運RNA(tRNA)等。核酸廣泛存在于所有動植物細胞、微生物內、生物體內,常
Snorkel海外首秀,助力國際生物及環(huán)境樣本安全2024/04/16
一座現(xiàn)代藝術氣息與自然風光交融的城市科技與文化的不斷碰撞塑造著這個城市魅力墨爾本以其無盡的魅力和無限的可能吸引著全球目光理想的火花與創(chuàng)意的激情碰撞2024,基點生物再次相聚ISBER向全球客戶遞上了名片向世界展示探索的力量ISBER未來樣本庫的無盡想象ISBER(國際生物及環(huán)境樣本庫協(xié)會)年會,是國際生物樣本管理領域最重要的活動之一具影響力的生物樣本庫行業(yè)盛會。4月9-12日,ISBER2024在墨爾本會展中心(MCEC)隆重召開。今年大會主題是DreamingBeyondBarriers:Th
STIRLING SU780XLE助力Scisafe生物樣本庫“中心”推進最佳超低溫實踐2024/04/16
正如麥肯錫公司發(fā)表的文章《從端點到患者:為完善國家冷鏈》所指出的,超低溫冷鏈(UCC)在彈性上的缺乏構成了基礎設施方面的一個重大障礙,在世界范圍內阻礙了對疫情的應對,并且對于對溫度極其敏感的而言,至關重要的儲存工作受到了影響。雖然這場危機促使全球迅速建立超低溫(ULT)儲存能力,同時也使得對以下方面的需求達到了程度:從先進治療方法的研發(fā)和運輸出發(fā),決定速度與成功率提升的一個新興因素是,確立更加嚴謹?shù)牟僮饕?guī)范和解決方案,保護生物資產不出現(xiàn)穩(wěn)定性退化,確保生物活性,及瞬時溫升的情況;為涉足超低溫儲存
如何養(yǎng)好細胞?貼壁細胞VS懸浮細胞2024/04/16
根據(jù)細胞在瓶、皿等容器中,是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為貼附型和懸浮型兩大類。活體體內的細胞離體后在體外培養(yǎng)大多數(shù)以貼壁的方式生長,主要包括一些正常細胞和腫瘤細胞,比如成纖維細胞,骨骼組織(骨及軟骨),心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經膠質細胞,內分泌細胞,黑色素細胞及腫瘤細胞等。貼壁細胞在體外培養(yǎng)中,形態(tài)上表現(xiàn)單一化而失去體內原有的某些特征,多呈上皮樣或成纖維細胞樣。少數(shù)離體細胞在體外培養(yǎng)時則是懸浮生長,主要包括一些取自血、脾臟或骨髓等的細胞。復蘇凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。一般采
螢光素酶如何成為理想的報告基因?2024/04/16
一,什么是報告基因報告基因:是一種編碼易被檢測的蛋白質或酶的基因,其表達產物非常容易被鑒定。傳統(tǒng)基因表達檢測方法的問題:1.通常檢測基因表達是通過RT-qPCR或qPCR(mRNA水平)或WesternBlot(蛋白水平)2.操作方法繁瑣,難于檢測報告基因的優(yōu)點:1.蛋白表達水平檢測2.檢測簡單,易于定量二,什么是理想的報告基因1.具有酶活性(信號放大能力2.蛋白小3.沒有內源性表達,背景低4.易于定量5.高靈敏度、線性范圍寬6.反應迅速三,螢光素酶在生物醫(yī)藥行業(yè)最主要的報告基因為熒光素酶報告基
IL-18丨沉默三十年,老靶點重出江湖2024/04/15
IL-18概述白介素-18(IL18,也稱為干擾素-γ誘導因子),位于人類第11號染色體和小鼠第9號染色體。IL-18屬于IL-1超家族,最早在庫普弗細胞(駐留在肝臟中的巨噬細胞)中被發(fā)現(xiàn),非造血細胞如腸上皮細胞、角質形成細胞和內皮細胞中也有IL-18生成。IL-18具有多種生物學特性,在抗炎,抗腫瘤免疫中具有重要的作用。IL-18受體和信號通路IL-18通過受體介導其作用,該受體屬于IL-1R家族,由IL-18Rα鏈(IL-18R1,IL-1Rrp)和IL-18Rβ鏈(IL-18R輔助蛋白,I
一文讓你了解逐典重組胰蛋白酶的應用領域!2024/04/15
Trypelectase重組胰蛋白酶是逐典生物專門為疫苗、病毒載體生產設計,具有高效、非動物源和高質量標準的特點。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致,由大腸桿菌(E.col)重組表達生產。在GMP級別環(huán)境中生產的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細胞且不造成傷害,產品質量滿足藥典要求。一,在醫(yī)藥開發(fā)、生化研究領域中的應用在生化研究方面,重組胰蛋白酶可分析蛋白質結構、氨基酸序列;在醫(yī)藥領域,由于重組胰蛋白酶會選擇性水解賴氨酸、精氨酸肽鏈,因此可用于治療各種炎癥、潰瘍、癬疥、水腫、血腫等疾病,并
對于低溫樣品來說,為什么干冰不是一個好的選擇2024/04/15
為了避免變質,低溫樣品通常儲存在溫度約為-170°C的液氮或其氣相中。在運輸過程中,一些科學家將這些樣本放在干冰上。然而,研究表明,將低溫樣品放在干冰上比暴露在室溫下更快地升溫。罪魁禍首:對流和傳導?;谡婧思毎闹委焺┑鹊蜏貥悠沸枰诘陀谒AЩD變相閾值(Tg-H2O,約-135°C)的溫度下儲存。在這些條件下儲存可避免生物活性,并最大限度地減少解凍后細胞活力的損失。將真核細胞溶液保存在高于Tg-H2O的溫度下會帶來嚴重風險。當封裝的肝細胞球體在-80°C下儲存時,與在-170°C下存儲的相
Simoa測定表征和驗證方法——檢測極限和定量下限(Part 1)2024/04/15
介紹這篇博客文章的目的是為Simoa®用戶提供有效的資源,用于檢測下限(LOD)和定量下限(LLOQ)的常見分析驗證。確定檢測和定量下限的方法在復雜性上有所不同,這取決于測定開發(fā)階段和適用的法規(guī)。例如,在早期開發(fā)中,通過簡單地插值校準曲線來近似LOD可能就足夠了,但對于最終驗證,可能需要使用真實樣本進行更深入的實驗和統(tǒng)計方法。指導方針臨床和實驗室標準研究所(ClinicalandLaboratoryStandardsInstituteCLSI)專門為診斷免疫測定驗證提供了一些具參考價值的指南。這
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