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中級(jí)會(huì)員 | 第6年
逐典全能核酸酶:高效、安全、高比酶活—生物蛋白藥生產(chǎn)的得力助手!2024/05/11
全能核酸酶可以降解所有形式的DNA和RNA,將它們消化成3-8個(gè)堿基長(zhǎng)度的5-單磷酸寡核苷酸,且不具有堿基識(shí)別特異性。在生物技術(shù)和生物制藥領(lǐng)域中扮演著重要的角色,尤其是在生物蛋白藥的生產(chǎn)過(guò)程中,科研中常用于在蛋白樣品制備和純化工藝的改善、提高蛋白產(chǎn)量等方面;隨著生物藥的快速發(fā)展和應(yīng)用,全能核酸酶廣泛應(yīng)用于去除疫苗樣品、細(xì)胞和基因治療病毒樣品及重組蛋白藥物中的核酸污染,降低核酸殘留毒性風(fēng)險(xiǎn),提高產(chǎn)品安全性。在生物蛋白藥的生產(chǎn)過(guò)程中,全能核酸酶主要用于以下幾個(gè)方面:1,基因克隆與表達(dá):全能核酸酶被用
IL-2實(shí)體瘤治療新思路:腫瘤局部合成2024/05/10
高濃度的IL-2是提高TME浸潤(rùn)、逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫抑制的重要炎癥細(xì)胞因子。如何在保證IL-2起效的同時(shí)降低IL-2的全身毒性是眾多實(shí)體瘤免疫療法開發(fā)的重要研究方向。2022年12月加州大學(xué)舊金山分校的研究團(tuán)隊(duì)在Science上展示了他們的方案。該臨床前試驗(yàn)選擇通過(guò)在T細(xì)胞上搭載合成細(xì)胞因子的通路,在體內(nèi)驅(qū)動(dòng),使細(xì)胞自主產(chǎn)生IL-2,盡可能使IL-2僅在目標(biāo)腫瘤TME中產(chǎn)生作用,降低全身毒性。局部合成IL-2的機(jī)制與效果為了讓IL-2不在全身擴(kuò)散,自主合成細(xì)胞因子回路需要在腫瘤TME的免疫抑制環(huán)境中依
干貨 | 小動(dòng)物活體成像之生物發(fā)光精華篇2024/05/09
小動(dòng)物活體成像技術(shù),是在1999年美國(guó)哈佛大學(xué)Weisslede提出的一項(xiàng)技術(shù),該技術(shù)是指應(yīng)用影像學(xué)方法,對(duì)活體狀態(tài)下的生物過(guò)程進(jìn)行組織、細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究。傳統(tǒng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)分批處死動(dòng)物以獲取實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),而小動(dòng)物活體成像技術(shù)可同時(shí)觀測(cè)多個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、對(duì)同一研究個(gè)體可進(jìn)行持續(xù)、反復(fù)跟蹤成像,避免動(dòng)物而造成的組間差異,節(jié)省動(dòng)物成本,被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域。其中小動(dòng)物活體光學(xué)成像是通過(guò)一定方式對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行光學(xué)標(biāo)記,再通過(guò)成像技術(shù)及設(shè)備(如RevvityIVIS小動(dòng)物活體光學(xué)
Lonza一體化端到端內(nèi)毒素自動(dòng)化檢測(cè)方案2024/05/09
內(nèi)毒素檢查是注射劑安全性檢查中的重要檢查項(xiàng)目,我們接受過(guò)的每一針注射劑都已經(jīng)過(guò)內(nèi)毒素污染檢測(cè)。隨著生物制藥的發(fā)展,內(nèi)毒素的檢測(cè)需求也日益增加,實(shí)驗(yàn)室需要更高效、更精準(zhǔn)的檢測(cè)方案來(lái)應(yīng)對(duì)日益增長(zhǎng)的檢測(cè)需求。然而,傳統(tǒng)的手動(dòng)檢測(cè)方法存在諸多局限,如操作繁瑣、易出錯(cuò)、費(fèi)人工等,這些問(wèn)題限制了實(shí)驗(yàn)室的效率和檢測(cè)通量的提升。Lonza作為擁有幾十年內(nèi)毒素檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)的廠家,新近推出一體化端到端內(nèi)毒素自動(dòng)化檢測(cè)方案,不僅僅通過(guò)PyroTecPro™內(nèi)毒素自動(dòng)化工作流程解決測(cè)試過(guò)程中遇到的問(wèn)題,還將MODA-EM™
Barkey推動(dòng)患者安全和實(shí)驗(yàn)室效率的創(chuàng)新2024/05/09
LizeteCaballero——加州大學(xué)舊金山分校血液和骨髓移植(BMT)實(shí)驗(yàn)室高級(jí)主管在美國(guó),37°C水浴是解凍細(xì)胞治療產(chǎn)品設(shè)備。這種方法需要手動(dòng)將產(chǎn)品直接浸入溫度控制的水中,按摩袋子,或旋轉(zhuǎn)小瓶,以確保解凍。最重要的是,對(duì)于水浴,人們普遍擔(dān)心外源性細(xì)菌對(duì)微生物的污染,這種污染會(huì)使本已脆弱的患者進(jìn)一步患病甚至死亡。LizeteCaballero一直關(guān)注質(zhì)量和創(chuàng)新,他曾在加州大學(xué)舊金山分校(UCSF)血液和骨髓移植實(shí)驗(yàn)室擔(dān)任高級(jí)主管近10年,現(xiàn)在是強(qiáng)生ChimericAntgen受體T細(xì)胞(C
使用Victor NIVO多模式檢測(cè)已進(jìn)行快速Ca2+信號(hào)檢測(cè)2024/05/08
G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)參與許多細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。目前,超過(guò)45%的藥物都以GPCR為靶點(diǎn)。確定GPCR細(xì)胞活性,可以通過(guò)監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變化來(lái)實(shí)現(xiàn)。Ca2+直接或間接調(diào)節(jié)包括基因表達(dá)、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和收縮在內(nèi)的許多生理過(guò)程。諸如蛋白激酶C(PKC)、轉(zhuǎn)錄因子NFAT或鈣調(diào)磷酸酶等多種蛋白質(zhì)均受Ca2+濃度變化的調(diào)節(jié)。在此,我們介紹了使用VICTOR™Nivo多模式讀板儀以水母發(fā)光蛋白生物發(fā)光檢測(cè)方法,分析在GPCR刺激或抑制下的快速胞內(nèi)Ca2+信號(hào)?;瘜W(xué)發(fā)光法檢測(cè)原理是基于GPCR的激活引
深入了解螢光素酶:從疑惑到掌握,一次說(shuō)清!2024/05/08
細(xì)胞螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)受多種因素影響,例如載體狀態(tài),細(xì)胞狀態(tài),轉(zhuǎn)染量,轉(zhuǎn)染效率,裂解效率,加樣精度等等,因此實(shí)驗(yàn)中一般需要做3個(gè)或以上復(fù)孔,且最好采用雙螢光素酶報(bào)告基因,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度?,F(xiàn)將雙螢光素酶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中常見(jiàn)的問(wèn)題匯總?cè)缦拢篞1:如何選擇載體?螢火蟲螢光素酶一般選取pGL-3、pGL-4或pmirGLO的載體,也可自己構(gòu)建相應(yīng)的載體;海腎螢光素酶一般選取phRL-TK或pGL-4載體,建議不使用強(qiáng)啟動(dòng)子(如SV40,CMV),而選取中等強(qiáng)度的啟動(dòng)子Q2:檢測(cè)結(jié)果螢光值過(guò)低或無(wú)螢光
探索白介素IL-18的無(wú)限可能:功能、挑戰(zhàn)與應(yīng)用2024/05/08
IL-18的功能和挑戰(zhàn)免疫功能:IL-18作為一種IL-1家族的促炎細(xì)胞因子,和IL-12、IL-15一樣具有活化記憶樣NK細(xì)胞的功能。IL-18調(diào)節(jié)Th1和Th2細(xì)胞的反應(yīng),也作用于非極化T細(xì)胞、NK/NKT細(xì)胞、B細(xì)胞、DC和巨噬細(xì)胞,在IL-12存在的條件下產(chǎn)生IFN-γ。不含IL-12但含有IL-2的IL-18則可誘導(dǎo)CD4NKT細(xì)胞、NK細(xì)胞甚至已分化的Th1細(xì)胞產(chǎn)生Th2細(xì)胞因子。IL-18和IL-3還能誘導(dǎo)肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞產(chǎn)生IL-4和IL-13。除了免疫功能,IL-18還參
高鹽病毒制備難題:如何高效去除宿主細(xì)胞核酸?2024/05/07
核酸酶能夠有效去除各種形式的DNA和RNA,是去除宿主細(xì)胞核酸(HostCellDNA,HCD)的理想手段。但來(lái)自粘質(zhì)沙雷氏菌的全能核酸酶(如Pannarase、Benzonase等產(chǎn)品)最適Na+/K+鹽濃度在0-20mM,有效范圍在0-150mM。多應(yīng)用于中低鹽濃度的HCD去除。如果在病毒制備中遇到高鹽條件,怎么更好的去除宿主細(xì)胞核酸?在高鹽環(huán)境下,不僅可以抑制病毒載體聚集、提升產(chǎn)量。因此,在有的病毒制備工藝中,常采用高鹽方法進(jìn)行細(xì)胞裂解來(lái)代替凍融裂解,釋放的病毒載滴度上會(huì)有提升。另外,高鹽
為什么胰酶替代物TrypLUS消化液是消化液?2024/05/07
胰蛋白酶(EC3.4.21.4)是一種絲氨酸蛋白酶,酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組胰蛋白酶是利用基因工程菌表達(dá)并采用層析色譜法純化獲得,其氨基酸序列與豬胰腺來(lái)源的陽(yáng)離子型胰蛋白酶一致,分子量為24kDa,最適pH為7.0-9.0??梢蕴娲i胰腺來(lái)源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過(guò)程中,例如:重組胰島素生產(chǎn)、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解、測(cè)序和各種組織的細(xì)胞分離等。目前市面上常用的細(xì)胞消化液包括非酶法的EDTA和酶法的Trypsin、TrypLUS&TrypLE消化液:EDTA屬于非酶法
IL-15獲批,當(dāng)心其促瘤風(fēng)險(xiǎn)2024/05/06
2024年4月22日,ImmunityBio公司宣布,F(xiàn)DA已批準(zhǔn)Anktiva(N-803)聯(lián)合卡介苗(BCG),用于治療卡介苗不響應(yīng)的非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌(NMIBC)伴原位癌(CIS),伴或不伴乳頭狀瘤患者。但是除了抗腫瘤活性,很多研究顯示IL-15本身也有促進(jìn)腫瘤的活性。IL-15及其受體IL-15是一種多效細(xì)胞因子,最初被認(rèn)為是T細(xì)胞生長(zhǎng)因子,在體內(nèi)連接先天和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。IL-15屬于四α-螺旋束細(xì)胞因子家族,由不同類型的細(xì)胞,如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、上
逐典蛋白定制服務(wù),從設(shè)計(jì)到生產(chǎn),滿足您的所有需求!2024/05/06
逐典生物科學(xué)家團(tuán)隊(duì)在細(xì)胞因子和酶領(lǐng)域深耕十多年,擁有強(qiáng)大的分子設(shè)計(jì)和工藝開發(fā)能力,通過(guò)AI驅(qū)動(dòng)的分子設(shè)計(jì)平臺(tái)、高通量蛋白制備平臺(tái)以及專有的包涵體變復(fù)性平臺(tái)等,可以快速、低成本地為您提供一站式蛋白設(shè)計(jì)優(yōu)化、工藝開發(fā)、放大生產(chǎn)、申請(qǐng)等服務(wù),您可從任何一點(diǎn)切入合作,給您多種服務(wù)模式的選擇。服務(wù)優(yōu)勢(shì)1,AI酶定向進(jìn)化平臺(tái)2,專有包涵體變復(fù)性技術(shù)3,蛋白親和力改造平臺(tái)4,超低內(nèi)毒素質(zhì)控體系5,豐富的酶及細(xì)胞因子項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)案例展示案例一:高活性IL-15pro開發(fā)項(xiàng)目背景:野生型IL-15分子構(gòu)象不穩(wěn)定、活性
重組胰蛋白酶在細(xì)胞分離中的應(yīng)用2024/04/30
你是否對(duì)細(xì)胞分離感到好奇?想知道那些神奇的液體是如何將細(xì)胞從復(fù)雜的環(huán)境中分離出來(lái)的嗎?今天,就讓我們一起揭開重組胰蛋白酶在細(xì)胞分離中的神秘面紗!這個(gè)看似普通的液體到底有何神奇之處呢?首先,我們要明白細(xì)胞分離的重要性。在細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,我們經(jīng)常需要將細(xì)胞從復(fù)雜的生物組織中分離出來(lái),以便進(jìn)行更深入的研究。而重組胰蛋白酶消化液就是我們的得力助手,它能幫助我們輕松實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。那么,組胰蛋白酶消化液是如何工作的呢?簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),它就像一把神奇的鑰匙,能夠打開細(xì)胞間的連接,使細(xì)胞從組織中“脫落
全能核酸酶應(yīng)用場(chǎng)景全解析2024/04/29
是否對(duì)核酸酶這個(gè)神秘而又強(qiáng)大的生物工具充滿好奇?今天,就讓我們一起走進(jìn)核酸酶的世界,探索它在各個(gè)領(lǐng)域中的典型應(yīng)用場(chǎng)景,感受它的魅力與魔力吧!1,新冠滅活疫苗生產(chǎn)過(guò)程中宿主DNA的去除—在新冠滅活疫苗的生產(chǎn)過(guò)程中,宿主DNA的去除是一個(gè)關(guān)鍵的步驟,以確保疫苗的安全性和有效性。2,傳統(tǒng)疫苗工藝純化過(guò)程中去除宿主核酸—核酸酶能夠特異性地切割核酸,因此在疫苗純化過(guò)程中,核酸酶被廣泛用于去除宿主核酸。通過(guò)添加適量的核酸酶到疫苗制備液中,并控制適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件,可以有效地降解宿主核酸,從而確保疫苗的安全性。3
熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn):從入門到精通,一文搞定!2024/04/28
一,基本概念報(bào)告基因:基因表達(dá)變化或者與基因表達(dá)變化相關(guān)的細(xì)胞事件的一個(gè)指示劑。通常是一種編碼易被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因,其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定。熒光素酶(luciferase):一類能夠產(chǎn)生生物發(fā)光信號(hào)的酶的統(tǒng)稱,其中最有代表性的是從甲蟲中分離得到的螢火蟲熒光素酶和從海腎中分離得到的海腎熒光素酶。螢光素酶可以催化自身底物氧化,反應(yīng)中一部分能量以光子形式被釋放,即生物發(fā)光信號(hào)。螢光素酶是理想的報(bào)告基因,因?yàn)椴溉閯?dòng)物細(xì)胞中不含內(nèi)源性螢光素酶,一旦轉(zhuǎn)錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶,同時(shí)在所有的化
細(xì)胞培養(yǎng):重組胰蛋白酶,優(yōu)勢(shì)何在?2024/04/26
物源性胰蛋白酶,如從牛、豬的胰臟中提取的胰蛋白酶,在細(xì)胞培養(yǎng)中起著關(guān)鍵作用。它主要通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)以及斷開細(xì)胞間連接,幫助實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。這對(duì)于各種生物技術(shù)實(shí)驗(yàn),如細(xì)胞流式檢測(cè)、外泌體提取、細(xì)胞轉(zhuǎn)移和透析等都具有重要意義。然而,使用動(dòng)物源性胰蛋白酶也存在一些潛在的問(wèn)題。一,安全性可能的病毒污染:目前,使用豬胰蛋白酶的疫苗生產(chǎn)企業(yè)要按照2010版藥典規(guī)定檢測(cè)可能的病毒含量,如豬細(xì)小病毒??赡芗?xì)菌、真菌、支原體污染:將影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和產(chǎn)品質(zhì)量。重組胰蛋白酶是基因工程重組生產(chǎn),無(wú)外源性的病毒污染,生
異體細(xì)胞治療工藝之“收、分、凍”解決方案2024/04/26
自體細(xì)胞療法和異體細(xì)胞療法在工藝放大的規(guī)模和策略選擇方面存在顯著的差異,從而影響其集中式或分散式生產(chǎn)的布局規(guī)劃,以及可實(shí)現(xiàn)的規(guī)?;?jīng)濟(jì)性。異體細(xì)胞療法更容易將工藝標(biāo)準(zhǔn)化,可以進(jìn)行規(guī)?;に嚪糯蠓椒ㄟM(jìn)行生產(chǎn),然后以冷凍的方式儲(chǔ)存,以便在需要時(shí)迅速使用,通過(guò)一個(gè)批次的生產(chǎn)制備許多劑量,治療更多患者。自體CAR-T和同種異體CAR-T療法的制造流程(圖片來(lái)源:Allogene公司)異體細(xì)胞療法,無(wú)論是哪種細(xì)胞類型,都面臨一些挑戰(zhàn):工藝上游細(xì)胞的培養(yǎng)、下游大體積細(xì)胞收獲、多規(guī)格高通量的分裝以及冷凍保
逐典全能核酸酶-純化細(xì)胞治療產(chǎn)品、抗體藥物及疫苗的利器2024/04/25
一,核酸酶介紹核酸酶是在核酸分解的第一步中,作用于水解核苷酸之間的磷酸二酯鍵的一種蛋白質(zhì)。在高等動(dòng)植物中都有作用于磷酸二酯鍵的。不同來(lái)源的核酸酶,其專一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,稱為核糖核酸酶(RNase),有些核酸酶只能作用于DNA,稱為脫氧核糖核酸酶(DNase),有些核酸酶專一性較低,既能作用于RNA也能作用于DNA,因此統(tǒng)稱為核酸酶(nuclease)。根據(jù)核酸酶作用的位置不同,又可將核酸酶分為核酸外切酶(exonuclease)和核酸內(nèi)切酶(endonucle
生化檢測(cè)試劑盒 VS ELISA 試劑盒2024/04/25
生化檢測(cè),又稱臨床化學(xué),是在研究人體健康和疾病的生物化學(xué)過(guò)程變化的基礎(chǔ)上,利用物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)的理論與技術(shù)的一門實(shí)驗(yàn)學(xué)科。通過(guò)檢測(cè)諸如人體血液、尿液、腦脊液等樣本中化學(xué)物質(zhì)的量與質(zhì)的變化,為臨床醫(yī)生或研究者提供疾病診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效觀察、判斷預(yù)后以及健康評(píng)價(jià)等信息,最終判斷被檢者是否存在潛在疾病或排除某些疾病、揭示疾病變化以及藥物治療對(duì)機(jī)體生物化學(xué)過(guò)程影響程度。Elisa試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:Elisa檢測(cè)試劑盒、ElisaKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免
基點(diǎn)CREST 系列智能氣相液氮罐,對(duì)用戶使用更為友好!2024/04/25
該系列液氮罐在傳統(tǒng)氣相液氮罐基礎(chǔ)上做了自動(dòng)化升級(jí),對(duì)用戶使用更為友好,具體特點(diǎn)如下:自動(dòng)旋轉(zhuǎn)定位無(wú)需俯身罐口推動(dòng)罐內(nèi)深低溫轉(zhuǎn)盤,目標(biāo)凍存架自動(dòng)旋轉(zhuǎn)至罐口下方,安全省力不結(jié)霧;l自動(dòng)柔性開蓋防氣流擾動(dòng)自動(dòng)開蓋模式,罐口視野清晰,目標(biāo)凍存架一目了然;l自動(dòng)提升凍存架被提吊鉤住的凍存架,按鍵可自動(dòng)升降,松開可懸停任意位置;配合單層鎖定凍存架,可在罐口懸停取放樣本;吊臂多維度自由滑軌設(shè)計(jì),平穩(wěn)提升各凍存架。詳細(xì)信息如下:凍存架無(wú)插條格擋設(shè)計(jì)??蓽p少科學(xué)家繁瑣的勞動(dòng)(帶插條格擋,如取上層樣本,則需要插條抽
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