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貼壁細(xì)胞的消化,你真的做對了嗎?2024/03/22
如何消化讓細(xì)胞生長的更好,養(yǎng)細(xì)胞關(guān)鍵還是在消化,以下介紹幾種細(xì)胞的消化方法一、酶消化法1、胰酶,這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。消化的時間根據(jù)細(xì)胞種類、操作手法,溫度等因素而變化,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶,37℃一般在消化單層貼壁的細(xì)胞一般1-5分鐘就足夠了,用血清或者含血清的培養(yǎng)基終止。2、膠原酶,一般用于原代細(xì)胞消化,這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,消化的時間也略長,不推薦的原因是膠原酶有點小貴而且培養(yǎng)細(xì)胞株感覺沒有多大的必要。二、離子螯合劑不破壞細(xì)胞表面分子
解鎖白介素2(IL-2)之謎:剖析其結(jié)構(gòu)、功能于來源!2024/03/22
IL-2家族是B細(xì)胞,T細(xì)胞以及NK細(xì)胞的發(fā)育和功能所必須的一類細(xì)胞因子,包括IL-2,IL-4,IL-7,IL-9,IL-15和IL-21等。白細(xì)胞介素2(IL-2)是一種多效細(xì)胞因子,可引起免疫原性和耐受性免疫反應(yīng)。最初是由Gillis和Smith以及Morgan等人于上世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)T淋巴細(xì)胞需要特定的生長因子,而這種介導(dǎo)T細(xì)胞增殖的淋巴細(xì)胞營養(yǎng)因子最初被稱為T細(xì)胞生長因子(TCGF),后來被命名為白細(xì)胞介素-2(IL-2)1,并在1992年作為一種腫瘤免疫治療藥物獲得美國食品和藥物管理
掌握D-螢光素鉀鹽使用方法,輕松提升實驗效果!2024/03/21
一.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至0.15-0.3mg/mL的工作液濃度。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進(jìn)行圖像分析。二.體內(nèi)活體成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用0.2µm濾膜過濾除菌。立即使用,或
Lonza FlashGel 核酸電泳的利器,5分鐘可分離32個樣品2024/03/21
聽說你做核酸電泳和DNA片段回收如此繁瑣?配電泳液→配瓊脂糖→加EB染料→等膠凝固→加樣→等跑膠→凝膠成像儀照膠→紫外燈下切膠→DNA片段回收試劑盒一頓操作猛如虎,一看濃度零點五,費(fèi)時費(fèi)力又傷身,還要重頭再來過。你身心疲憊的說沒有其他好辦法。什么?!比“閃電俠”還快的FlashGel閃膠系統(tǒng)你竟然不知道!閃速解決你的煩惱,讓你不再emo!FlashGel閃膠系統(tǒng)是一個快速分離DNA,不需要紫外光照射就可在跑膠的同時觀察DNA/RNA遷移的便捷電泳系統(tǒng)。這個革命性的工具在5分鐘之內(nèi)分離多達(dá)32個樣
螢光素酶報告基因技術(shù)及應(yīng)用2024/03/20
螢光素酶報告基因技術(shù)報告基因:基因表達(dá)變化或者與基因表達(dá)變化相關(guān)的細(xì)胞事件的一個指示劑。通常是一種編碼易被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因,其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定。引入報告基因,通過很容易被檢測的報告基因的表達(dá)來判斷啟動子區(qū)域功能螢光素酶作為報告基因的優(yōu)點:?沒有內(nèi)源性表達(dá)?易于定量?高靈敏度、線性范圍寬?反應(yīng)迅速?可實現(xiàn)雙螢光素酶報告基因檢測螢光素酶報告基因的應(yīng)用1.免疫學(xué)檢測2.細(xì)胞信號通路分析3.轉(zhuǎn)錄因子分析4.蛋白-蛋白相互作用5.轉(zhuǎn)錄后修飾6.調(diào)控元件功能研究(啟動子,增強(qiáng)子等)7.病毒研究8
細(xì)胞活力檢測原理2024/03/20
逐典新款細(xì)胞活力檢測試劑LuminescentCellViabilityDetectionKit(以下簡稱“LCV”)通過檢測細(xì)胞內(nèi)ATP含量來分析細(xì)胞活性,該試劑盒發(fā)光信號穩(wěn)定,樣品可進(jìn)行批量處理和高通量篩選,是進(jìn)行自動化高通量篩選(HTS),細(xì)胞增殖和毒性分析的理想選擇。LCV使用方便,將單一試劑直接加入含有細(xì)胞的培養(yǎng)液中,即可進(jìn)行檢測!一經(jīng)上線,便深受各位藥企同仁的青睞!檢測原理CellTiter-Glo®是基于ATP的裂解型檢測方法。螢光素在ATP的參與下,被螢光素酶氧化,產(chǎn)生光。螢光素
干貨來襲 | 逐典生物為您提供高活性細(xì)胞因子&酶整體解決方案2024/03/20
細(xì)胞因子有毒副作用且半衰期短?想要獲得靶向特定受體的細(xì)胞因子,篩選工作量大且復(fù)雜?酶在現(xiàn)有反應(yīng)體系中穩(wěn)定性和活性不高?包涵體表達(dá),多次變復(fù)性處理后,細(xì)胞因子和酶居然沒活性?細(xì)胞因子和酶沒表達(dá)或表達(dá)量低,工藝開發(fā)周期長,制備成本太高?您在進(jìn)行細(xì)胞因子和酶的開發(fā)過程中,是否遇到如上問題的困擾?逐典生物通通幫您搞定!一整體解決方案逐典生物科學(xué)家團(tuán)隊在細(xì)胞因子和酶領(lǐng)域深耕十多年,擁有強(qiáng)大的分子設(shè)計和工藝開發(fā)能力,通過AI驅(qū)動的分子設(shè)計平臺、高通量蛋白制備平臺以及專有的包涵體變復(fù)性平臺等,可以快速、低成本
TIL療法獲批 | 看IsoPlexis單細(xì)胞功能蛋白組如何助力TIL功能評估2024/03/20
今年2月16日,IovanceBiotherapeutics公司宣布FDA加速批準(zhǔn)其腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)療法AMTAGVI(lifileucel)上市,用于治療先前經(jīng)過PD-1抗體治療的不可切除或轉(zhuǎn)移性黑色素瘤成年患者。據(jù)悉,lifileucel是款獲批上市的TIL細(xì)胞療法,標(biāo)志著細(xì)胞療法在腫瘤治療領(lǐng)域的又一重要里程碑。開發(fā)有效的TIL療法需要對TIL細(xì)胞本身的功能特性的深入理解,更取決于如何開發(fā)能夠快速擴(kuò)增且保持TIL細(xì)胞功能的生產(chǎn)工藝。在TIL回輸?shù)交颊唧w內(nèi),治療作用的持久性如何保持,
逐典Pannarase全能核酸酶FAQ2024/03/19
Q:在哪一步中加入Pannarase全能核酸酶?A:這取決于您處理的樣本。在病毒純化時,一般在病毒澄清后加入;大腸桿菌蛋白純化時,可以在菌體裂解時就加入;在處理細(xì)胞結(jié)團(tuán)問題時,可以直接加入培養(yǎng)基中與細(xì)胞共培養(yǎng)。Q:如果反應(yīng)溫度無法達(dá)到37℃,該如何使用?A:酶活性受到溫度、處理時間、酶活單位的影響,如果溫度無法達(dá)到37'C,可以適當(dāng)添加酶的用量,或者延長孵育時間。Q:全能核酸酶是否與蛋白酶抑制劑兼容?A:可以兼容,但需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTA。EDTA開始高于1mM時,EDTA將抑
白介素2/21(IL-2/IL-21):促進(jìn)NK細(xì)胞擴(kuò)增和活化2024/03/19
SoifferRJ等自1996年起即報道IL-2低劑量持續(xù)輸注和間歇給藥對轉(zhuǎn)移癌患者的CD56+NK細(xì)胞有明顯擴(kuò)增效果。大部分NK細(xì)胞表面具有IL-2中親和性受體,IL-2誘導(dǎo)NK的殺傷活性約需18~24小時。此外,IL-2還可誘導(dǎo)NK細(xì)胞的增殖,一般在刺激后3~4天開始發(fā)生增殖,其機(jī)理為IL-2可誘導(dǎo)NK細(xì)胞表達(dá)IL-2Rα鏈,新表達(dá)的α鏈與原先細(xì)胞表面的β鏈和γ鏈結(jié)合形成高親和性受體,在IL-2存在下刺激NK細(xì)胞發(fā)生增殖。圖片來源:SharmaR,etal.ImmunolRes.2018We
賽橋Gentle Flex系列一站式全封閉自動化細(xì)胞處理解決方案2024/03/19
前言近年來,我國細(xì)胞治療產(chǎn)品發(fā)展迅速,CGT賽道成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域與水平接軌的重要領(lǐng)域。國內(nèi)監(jiān)管部門對細(xì)胞治療高度重視,指導(dǎo)原則也日趨細(xì)化。為匹配CGT行業(yè)快速發(fā)展,急需高通量、高回收率、更兼容柔和的全封閉化自動化工藝設(shè)備,以降低污染風(fēng)險,縮短生產(chǎn)時間,降低批次間的差異,保證生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定。01設(shè)備概述CellbriBio-Innovation賽橋生物的GentleFlex系列全封閉自動化處理系統(tǒng)包括GentleFlex(適用于自體細(xì)胞治療產(chǎn)品)和GentleFlexPro(適用于通用型或?qū)嶓w瘤細(xì)
基點Sinfo二維碼凍存管QA集錦2024/03/19
Q1:什么是USPVI?達(dá)到這個級別有什么用?USP是美國藥典的縮寫,美國藥典對塑料粒子設(shè)定了六個級別的標(biāo)準(zhǔn),其中高級別為VI級。USPVI級材料通過了嚴(yán)格的生物相容性測試,不會因滲出的化學(xué)物質(zhì)引起有害反應(yīng)或長期身體影響。USPVI測試一般是通過使用不同的提取液(例如聚乙二醇和植物油)制備產(chǎn)品的提取物,并將其注射到體內(nèi)(活體)標(biāo)本(兔子和小鼠)中,以觀察對提取物的生物反應(yīng)。Q2:Sinfo的哪些部分達(dá)到了USPVI標(biāo)準(zhǔn)?Sinfo的管體、管帽、管帽色母均是USPVI級材料。管底雙色部分由于不和樣
Beacon單細(xì)胞光導(dǎo)系統(tǒng)之抗體發(fā)現(xiàn)工作流程2024/03/19
BerkeleyLights故事2011:BerkeleyLights成立于2011年,誕生在加州大學(xué)伯克利分校的大學(xué)校園。我們的初衷是為研究者提供以突破性光導(dǎo)技術(shù)為依托的數(shù)字細(xì)胞生物學(xué)儀器平臺,實現(xiàn)對細(xì)胞生物學(xué)傳統(tǒng)實驗方法的變革。2013:2013年,我們將公司總部遷至加州埃默里維爾。經(jīng)過多年的努力,我們在全球的員工已經(jīng)超過300人(2021年數(shù)據(jù)),在多個國家建立分公司,并且于2020年7月在美國納斯達(dá)克成功上市。2016:2013年,我們將公司總部遷至加州埃默里維爾。經(jīng)過多年的努力,我們在
產(chǎn)品推薦 | 核酸殘留煩惱?全能核酸酶檢測助您輕松解決!2024/03/18
隨著越來越多的生物制品(重組蛋白疫苗、病毒載體疫苗、細(xì)胞治療/基因治療藥物等)進(jìn)入治療領(lǐng)域,生物制品的質(zhì)量控制也日趨嚴(yán)格,其中核酸殘留因其潛在的危害性,是各類質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的重中之重。我國參照WHO、FDA和歐盟標(biāo)準(zhǔn),在藥典中明確規(guī)定酵母、大腸桿菌表達(dá)的生物制品中DNA殘留量不超過10ng/劑量。我國2020年藥典將人用狂犬病疫苗(Vero細(xì)胞)DNA殘留標(biāo)準(zhǔn)更新為≤3ng/劑量。除了殘留量的規(guī)定,F(xiàn)DA、CDE發(fā)布的相關(guān)指導(dǎo)文件中建議,殘留的細(xì)胞宿主DNA片段不能超過一個功能基因的長度(約200bp
“干貨來襲 | 逐典生物為您提供高活性細(xì)胞因子&酶整體解決方案2024/03/18
細(xì)胞因子有毒副作用且半衰期短?想要獲得靶向特定受體的細(xì)胞因子,篩選工作量大且復(fù)雜?酶在現(xiàn)有反應(yīng)體系中穩(wěn)定性和活性不高?包涵體表達(dá),多次變復(fù)性處理后,細(xì)胞因子和酶居然沒活性?細(xì)胞因子和酶沒表達(dá)或表達(dá)量低,工藝開發(fā)周期長,制備成本太高?您在進(jìn)行細(xì)胞因子和酶的開發(fā)過程中,是否遇到如上問題的困擾?逐典生物通通幫您搞定!一整體解決方案逐典生物科學(xué)家團(tuán)隊在細(xì)胞因子和酶領(lǐng)域深耕十多年,擁有強(qiáng)大的分子設(shè)計和工藝開發(fā)能力,通過AI驅(qū)動的分子設(shè)計平臺、高通量蛋白制備平臺以及專有的包涵體變復(fù)性平臺等,可以快速、低成本
CryoPod便攜式低溫運(yùn)送箱和自動化液氮加注站2024/03/15
CryoPodTM便攜式低溫運(yùn)送箱CryoPod™便攜式運(yùn)送箱和自動化液氮加注站已經(jīng)改變了實驗室內(nèi)或?qū)嶒炇抑g轉(zhuǎn)移低溫冷凍樣本的方式。CryoPod™根據(jù)用戶需求設(shè)計,支持液氮快速加注,同時具有持續(xù)監(jiān)測和記錄數(shù)據(jù)功能,其重量不到10kg。CryoPod™可作為獨(dú)立的低溫工作站使用,也可與BioStore™自動化樣本管理存儲系統(tǒng)結(jié)合使用。保持溫度記錄溫度、日期、時間和任何警報使用靈活,適配各種實驗室器皿可手動加注或使用CryoPod™加注站可通過USB下載所有監(jiān)測數(shù)據(jù)自動化液氮加注站CryoPod
認(rèn)識明星小分子:IL-72024/03/15
CAR-T細(xì)胞療法的出現(xiàn)給許多患者帶來了福音,但不可否認(rèn)的是,CAR-T療法依然存在一些普遍性問題需要解決,比如原發(fā)性和繼發(fā)性耐藥,效力不夠等。新的研究認(rèn)為,表達(dá)細(xì)胞因子介導(dǎo)殺傷細(xì)胞T細(xì)胞是新一代的CAR-T細(xì)胞,簡單來說,就是設(shè)計表達(dá)某一細(xì)胞因子,以增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤效力,提高其持久性,并改變腫瘤微環(huán)境的特征。細(xì)胞因子指的是由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)刺激合成、分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì),具有調(diào)節(jié)免疫、生長、組織修復(fù)等多種功能。細(xì)胞因子包含白細(xì)胞介素(IL)、干擾素(I
上?,|馳祝賀Quanterix獲得美國FDA突破性器械認(rèn)證2024/03/14
重磅消息3月4日,Quanterix宣布其Simoa磷酸化Tau217(p-Tau217)血液檢測已被美國FDA授予"突破性器械"認(rèn)證,可用于阿爾茨海默病(AD)的輔助診斷評估。隨著NIAAA標(biāo)準(zhǔn)確,p-Tau217是目前最為適合診斷淀粉樣蛋白病理學(xué)的血漿生物標(biāo)志物,p-Tau217已成為阿爾茨海默病病理學(xué)的最佳生物標(biāo)志物。鑒于傳統(tǒng)的正電子發(fā)射斷層掃描(PET)或腰椎穿刺檢測腦脊液(CSF)生物標(biāo)志物的方法是侵入性的,且通常難以獲取,高性能且基于外周血的生物標(biāo)志物檢測可能是患者護(hù)理的合適替代方法
Q&A② | 醫(yī)療器械的內(nèi)毒素檢測不容忽視!步驟與方法一鍵分享!2024/03/14
理論與實踐內(nèi)毒素檢測Q&A②內(nèi)毒素檢測Q&A系列第二彈來襲!本系列旨在為各位QC、QA人員提供內(nèi)毒素檢測相關(guān)各類主題的實用問答中我們已科普了11道基礎(chǔ)問答,本篇將聚焦于醫(yī)療器械中的內(nèi)毒素檢測。在醫(yī)療器械行業(yè),正確的內(nèi)毒素檢測程序?qū)τ诒WC產(chǎn)品符合標(biāo)準(zhǔn)以及確?;颊甙踩陵P(guān)重要。本篇文章將由我們的技術(shù)專家金桔老師為大家詳細(xì)介紹醫(yī)療器械中內(nèi)毒素檢測的關(guān)鍵步驟和方法。1.如何挑選供試品?隨機(jī)選擇不超過10個供試品。測試的供試品數(shù)量取決于幾個因素,包括批量大小、控制水平、統(tǒng)計因素和歷史數(shù)據(jù)。2.如何進(jìn)行成套
D-螢光素鉀鹽解惑答疑(二)2024/03/14
D-螢光素(D-Luciferin)是熒光素酶的常用底物。D-螢光素利用熒光素酶報告基因在活體內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生的熒光蛋白發(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生熒光,從而使用高靈敏度的光學(xué)檢測儀器檢測動物活體體內(nèi)的細(xì)胞活動和基因行為,普遍應(yīng)用于生物領(lǐng)域,特別是生物活體成像技術(shù)。問題答疑Q:D-熒光素鉀鹽與D-熒光素鈉鹽、D-熒光素的區(qū)別A:D-熒光素鉀鹽、D-熒光素鈉鹽以及D-熒光素的主要區(qū)別體現(xiàn)在它們的溶解和分散性能上。D-熒光素是游離態(tài),D-熒光素鈉鹽和D-熒光素鉀鹽是鹽形式,游離態(tài)的D-熒光素難溶于水,需要酸堿進(jìn)行助溶
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