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上?,|馳儀器有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
Lonza 4D-Nucleofector X 模塊電轉(zhuǎn)條件優(yōu)化指南2022/06/14
本期我們將為您提供優(yōu)化4D-Nucleofector™X單元的Nucleofection™條件的指南,及有關(guān)該主題的常見問題。Nucleofector™I或II條件與4D-Nucleofector™X單元兼容度4D-Nucleofector™系統(tǒng)基于升級(jí)后的Nucleofector™技術(shù),主要改進(jìn)如下:兩種Nucleofection™體系(20ul和100ul),且實(shí)驗(yàn)條件可以互相轉(zhuǎn)移Nucleocuvette™由導(dǎo)電聚合物而非鋁組成,提高了細(xì)胞活力簡化的4D-Nucleofector™試劑更廣
LabChip AAV衣殼蛋白分析助力基因治療藥物研究2022/05/31
重組腺相關(guān)病毒有組織特異性高、安全性好、免疫原性低等等優(yōu)點(diǎn),目前被作為基因治療中常用的病毒載體。行業(yè)內(nèi)常采用三質(zhì)?;蚨|(zhì)粒系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染,進(jìn)而獲得不同血清型的重組AAV載體。其中Cap基因編碼VP1、VP2和VP3三種衣殼蛋白和組裝激活蛋白。VP1與病毒從體內(nèi)逃逸有關(guān),對(duì)感染性至關(guān)重要;VP2對(duì)于組裝或者感染不可少;VP3核心保守序列β-桶結(jié)構(gòu)決定了不同血清型AAV與宿主細(xì)胞作用受體的差異,三者組裝成直徑約25nm的二十面體病毒顆粒,形成病毒衣殼,充當(dāng)病毒基因傳遞載體。圖1:AAV病毒及組成示
如何輕松獲得酶標(biāo)檢測數(shù)據(jù),從選擇EnSight多功能酶標(biāo)儀開始2022/05/23
工欲善其事必先利其器,生物制藥從前期藥物靶點(diǎn)確認(rèn),高通量篩選,藥物優(yōu)化,活性功能分析,工藝開發(fā),直至質(zhì)量控制都離不開酶標(biāo)儀這一檢測工具。一款的酶標(biāo)儀,在靈敏度,穩(wěn)定性,功能多樣性幾個(gè)維度如何平衡和把握呢?酶標(biāo)儀常規(guī)的功能包含光吸收,熒光和化學(xué)發(fā)光,這三種應(yīng)用能夠滿足比較基礎(chǔ)的檢測需求。但它們在原理上有著迥異的差別:光吸收是基于光通過物質(zhì)時(shí)被吸收的定律進(jìn)行定性和定量分析;熒光是熒光分子中處于激發(fā)態(tài)的原子核外電子由高能級(jí)回到低能級(jí)所產(chǎn)生的輻射;化學(xué)發(fā)光的檢測信號(hào)是酶促反應(yīng)過程中釋放的光子,不需要激發(fā)
抗體工藝持續(xù)優(yōu)化,待測樣品數(shù)量巨大?LabChip有辦法2022/05/20
來聊一聊LabChip®毛細(xì)管電泳系統(tǒng)在單克隆抗體研發(fā)和工藝中的應(yīng)用,以及其靈敏、快速和高通量優(yōu)勢。單克隆抗體工藝研究中,大家非常熟悉這些縮寫:QbD,CPP,CQA,DOE,PAT等。其終目的,即自始而終以高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為出發(fā)點(diǎn),基于科學(xué)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,保持持續(xù)優(yōu)化過程,高效靈活地生產(chǎn)出高質(zhì)量的產(chǎn)品,形成一個(gè)開放和穩(wěn)健的良性循環(huán)。在這個(gè)循環(huán)中,持續(xù)優(yōu)化發(fā)揮著引擎作用。如何做到快速分析、高效的反饋、知其然也知其所以然則是這個(gè)引擎運(yùn)轉(zhuǎn)的動(dòng)力來源。抗體蛋白工藝開發(fā)中,需要了解工藝參數(shù)與產(chǎn)品質(zhì)量屬性之間的關(guān)系
IsoPlexis展現(xiàn)T細(xì)胞免疫“十八般武藝”,解析32種細(xì)胞因子2022/05/16
免疫系統(tǒng)的反應(yīng)主要可分為兩個(gè)主要組成部分:先天性和適應(yīng)性免疫。圖示先天免疫和適應(yīng)性免疫細(xì)胞。(來自NatRevRheumatol.2021Aug2.)T細(xì)胞作為免疫細(xì)胞的一種,是適應(yīng)性免疫的中堅(jiān)力量,在抗感染、抗腫瘤等免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。細(xì)胞因子可以幫助T細(xì)胞有效對(duì)抗“敵人”,清除自身損傷細(xì)胞。不同細(xì)胞因子表現(xiàn)出廣泛的多效性,以協(xié)調(diào)先天性和適應(yīng)性免疫系統(tǒng),通過分析免疫細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,可以幫助分析和評(píng)估細(xì)胞的免疫功能,如CD4細(xì)胞,根據(jù)其分泌的細(xì)胞因子可分為不同的亞群(如下圖所示),在機(jī)體
5mins分離32個(gè)樣品,核酸電泳的利器——FlashGel閃膠系統(tǒng)2022/05/13
聽說你做核酸電泳和DNA片段回收如此繁瑣?配電泳液→配瓊脂糖→加EB染料→等膠凝固→加樣→等跑膠→凝膠成像儀照膠→紫外燈下切膠→DNA片段回收試劑盒一頓操作猛如虎,一看濃度零點(diǎn)五,費(fèi)時(shí)費(fèi)力又傷身,還要重頭再來過。你身心疲憊的說沒有其他好辦法。什么?!比“閃電俠”還快的FlashGel閃膠系統(tǒng)你竟然不知道!閃速解決你的煩惱,讓你不再emo!FlashGel閃膠系統(tǒng)是一個(gè)快速分離DNA,不需要紫外光照射就可在跑膠的同時(shí)觀察DNA/RNA遷移的便捷電泳系統(tǒng)。這個(gè)的工具在5分鐘之內(nèi)分離多達(dá)32個(gè)樣品,可
Lonza 384孔Nucleofector高通量電轉(zhuǎn)全基因組2022/05/13
當(dāng)前生物醫(yī)藥行業(yè)面臨著藥物靶點(diǎn)同質(zhì)化嚴(yán)重的問題,確認(rèn)疾病的作用機(jī)制并尋找的、有效的、安全的藥物靶點(diǎn)將成為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和創(chuàng)新藥物開發(fā)的有效措施,基于高通量全基因組CRISPR篩選可以為此提供很好的幫助。CRISPR/Cas9已成為一種流行的基因編輯工具,因?yàn)樗子谑褂?,并且與其他基因調(diào)節(jié)工具(例如siRNA技術(shù))相比,脫靶效應(yīng)更少。CRISPR/Cas9敲除篩選文庫的形式主要有混合文庫和陣列文庫,已被廣泛用于靶點(diǎn)識(shí)別和機(jī)制分析。雖然混合文庫的CRISPR/Cas9篩選通常更便宜且耗時(shí)更少,但陣列式CR
如何檢測單細(xì)胞功能性蛋白表達(dá)超能力?2022/05/10
如何知道有沒有超能力呢?首先要有IsoSpark超級(jí)細(xì)胞探測器,采用微流控技術(shù)全自動(dòng)運(yùn)行,搭配IsoCode單細(xì)胞微流控蛋白質(zhì)組分析芯片,進(jìn)行單細(xì)胞蛋白質(zhì)組分析,檢測單細(xì)胞功能性蛋白表達(dá)超能力!芯片內(nèi)12,000個(gè)獨(dú)立亞納升等級(jí)的微室可以同時(shí)捕獲上千個(gè)單細(xì)胞,微室底部的*抗體編碼技術(shù)可以在單細(xì)胞培養(yǎng)于微室時(shí)實(shí)時(shí)捕捉分泌因子或是胞內(nèi)蛋白,單細(xì)胞可獲取30種以上的蛋白數(shù)據(jù)。然后數(shù)據(jù)自動(dòng)端到端傳輸?shù)絀soSpeak分析軟件,獲取單細(xì)胞PolyfunctionalStrengthIndexTM(PSIT
Isoplexis單細(xì)胞蛋白組技術(shù)免疫分析,加速臨床前研發(fā)2022/05/05
免疫療法已被證明是一種很有前途的治療方法。但由于免疫相關(guān)的潛在的嚴(yán)重不良反應(yīng),使許多研究人員依賴小鼠模型來獲得對(duì)于研究的治療產(chǎn)品或療法進(jìn)行更深入的了解。從早期研發(fā)到臨床的整個(gè)過程中,IsoPlexis的單細(xì)胞解決方案一直在這方面幫助研究人員,通過體外實(shí)驗(yàn)獲得與體內(nèi)活性相關(guān)指標(biāo)。通過檢測每個(gè)細(xì)胞同時(shí)分泌多個(gè)細(xì)胞因子的能力,即細(xì)胞的多功能性,檢測*的細(xì)胞亞群進(jìn)而建立這種聯(lián)系。對(duì)于單細(xì)胞多功能檢測,允許研究人員發(fā)現(xiàn)臨床前發(fā)展的新機(jī)制,并加速他們的研究。相比于傳統(tǒng)的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)有著很大的優(yōu)勢。IsoPl
轉(zhuǎn)載:Lonza Cocoon® 細(xì)擴(kuò)展細(xì)胞磁珠分選新功能2022/04/27
Lonza近日發(fā)布的第二代Cocoon®儀器擴(kuò)展了Cocoon®平臺(tái)功能,包括在細(xì)胞結(jié)合、細(xì)胞分離和磁珠去除方面新的整合功能。磁珠分選功能可在細(xì)胞治療生產(chǎn)過程的任何階段使用,提供高水平的定制化和一致性,并擴(kuò)展了細(xì)胞治療生產(chǎn)的端到端解決方案。這一創(chuàng)新功能將進(jìn)一步加強(qiáng)Cocoon®平臺(tái)在細(xì)胞治療商業(yè)化方面的地位,幫助將研發(fā)推進(jìn)到可以使患者受益的臨床階段。近日,細(xì)胞和基因治療生產(chǎn)Lonza龍沙宣布,用于自動(dòng)化細(xì)胞治療生產(chǎn)的Cocoon®平臺(tái)的功能擴(kuò)展。新的磁珠分選模塊增加了細(xì)胞結(jié)合、細(xì)胞分離和磁珠去除
一文帶你了解4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的原理2022/04/25
4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)結(jié)合電穿孔技術(shù)和細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)染液,通過系統(tǒng)內(nèi)置優(yōu)化的轉(zhuǎn)染程序,將外源基因高效導(dǎo)入目標(biāo)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,并可直接入核,整合到細(xì)胞染色體中。4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可用于免疫細(xì)胞、干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等較難轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞和各類細(xì)胞系中,其不依賴于病毒感染、不依賴于細(xì)胞有絲分裂,可加快基因表達(dá),已成功轉(zhuǎn)染1200余種細(xì)胞系、130余種原代細(xì)胞,多數(shù)細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50-70%,部分原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率可超過90%。4D-Nucleofector轉(zhuǎn)
Isoplexis 單細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)攻克神經(jīng)免疫研究中的挑戰(zhàn)2022/04/24
神經(jīng)炎癥是對(duì)神經(jīng)組織損傷的一種復(fù)雜生物反應(yīng),它在神經(jīng)退行性疾病中起著關(guān)鍵作用。然而,由于細(xì)胞因子產(chǎn)生的異質(zhì)性和異常的細(xì)胞因子特征,可能很難對(duì)其評(píng)估。為此,IsoPlexis開發(fā)了創(chuàng)新性的單細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)平臺(tái),可以對(duì)每個(gè)細(xì)胞的功能進(jìn)行定義,從而深入探討神經(jīng)免疫作用機(jī)制,以加速開發(fā)更有效的治療。如果僅僅是對(duì)細(xì)胞表面表型或RNA轉(zhuǎn)錄水平分析,可能會(huì)錯(cuò)過發(fā)現(xiàn)胞外和胞內(nèi)的功能表型差異,從而無法揭示患者反應(yīng)的生物學(xué)驅(qū)動(dòng)因素。傳統(tǒng)蛋白檢測技術(shù)往往只能分析樣本中所有細(xì)胞分泌的蛋白平均水平,而IsoPlexis技
使用立式超低溫冰箱要注意以下幾點(diǎn)2022/04/21
立式超低溫冰箱的制冷系統(tǒng)基本采用復(fù)疊式制冷的工作原理,選用兩臺(tái)全封閉壓縮機(jī)作為高、低溫級(jí)壓縮機(jī)使用。低溫級(jí)蒸發(fā)器的紫銅管以盤管形式直接盤附于內(nèi)箱體外側(cè),并用導(dǎo)熱膠泥填堵于盤管與箱壁之間的縫隙中,以增加熱交換效果。冷凝蒸發(fā)器為殼管式結(jié)構(gòu),內(nèi)部為四管螺紋型紫銅管,采用逆流式熱交換方式。低溫級(jí)系統(tǒng)中還加配有氣熱交換器,可使從蒸發(fā)器出來的低壓氣體同進(jìn)入冷凝蒸發(fā)器前的高壓氣體進(jìn)行熱交換,這樣不但減少了冷凝蒸發(fā)器的熱負(fù)荷,而且充分利用了熱量。過濾器多采用除蠟型過濾器,其目的是有效去除冷凍油中的石蠟,以降低系
支原體預(yù)防大法,從此污染說拜拜2022/04/19
咱們從細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染的來源說起連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞污染的概率大約15~35%,生物制藥中支原體污染的比例較低,近十年污染百分比在個(gè)位數(shù)[1]。細(xì)胞培養(yǎng)中搗亂的支原體通常是那一小撮,約20多種。其中包括口腔支原體(M.orale)、肺炎支原體(M.pneumoniae)、發(fā)酵支原體(M.fermentans)、精氨酸支原體(M.arginini)、萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)和豬鼻支原體(M.hyorhinis),占污染比例的95%[2],分別為人源、牛源和豬源支原體。(放大)支原體是怎樣
JANUS G3自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建工作站幫你解決重重困難2022/04/19
PCR技術(shù)已應(yīng)用到生物制藥領(lǐng)域的各個(gè)環(huán)節(jié)從前期研發(fā)階段后選序列的篩選,到工藝開發(fā)環(huán)節(jié)穩(wěn)健方法的建立,至生產(chǎn)放行的把控。每一個(gè)環(huán)節(jié)都需要倚仗PCR技術(shù)的結(jié)果作為衡量的依據(jù)。諸如支原體,宿主DNA,內(nèi)外源性病毒,逆轉(zhuǎn)錄病毒等風(fēng)險(xiǎn)因子都要求在生產(chǎn)起始、中間過程和終產(chǎn)品階段,進(jìn)行定性或定量PCR分析,以確保風(fēng)險(xiǎn)因子可控。對(duì)CART,TCRT,CAR-NK等細(xì)胞治療產(chǎn)品而言,CAR/TCR基因拷貝數(shù),RCR/RCL復(fù)制型慢病毒檢測,轉(zhuǎn)染效率等也都是必需的PCR檢測項(xiàng)目。PCR體系構(gòu)建中經(jīng)常遇到的問題一個(gè)樣
Cocoon®和4D-Nucleofector™LV2022/04/19
自體T細(xì)胞免疫療法的研究和開發(fā)進(jìn)展迅速,但關(guān)鍵瓶頸在于擴(kuò)大制造規(guī)模以滿足商業(yè)需求。其中一個(gè)關(guān)鍵痛點(diǎn)是GMP病毒載體(慢病毒和γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒)的安全性、漫長的生產(chǎn)周期和高額的費(fèi)用。解決這個(gè)問題的一個(gè)辦法是利用非病毒轉(zhuǎn)染方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行基因修飾。Lonza的4D-Nucleofector™LV單元采用電穿孔技術(shù),可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、可擴(kuò)展多種細(xì)胞類型和應(yīng)用的非病毒轉(zhuǎn)染方案。Cocoon®平臺(tái)是實(shí)現(xiàn)大規(guī)模自動(dòng)化生產(chǎn)的新工具,它可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分離、激活、轉(zhuǎn)導(dǎo)、擴(kuò)增、細(xì)胞清洗和收獲,同時(shí)提供整個(gè)過程中的實(shí)時(shí)生物反饋
轉(zhuǎn)載:Isoplexis超級(jí)英雄細(xì)胞治療結(jié)節(jié)性硬化癥綜合癥腫瘤2022/04/15
結(jié)節(jié)性硬化綜合癥(TSC)是一種常染色體顯性的多系統(tǒng)遺傳疾病,其特點(diǎn)是在皮膚、大腦和腎臟等身體各部位生長良性腫瘤。這種情況還造成了健康問題,影響到世界150多萬兒童和成年人。TSC是由TSC1或TSC2基因的生物等位基因突變引起的,這些突變是腫瘤抑制因子的代號(hào)。這些突變往往導(dǎo)致形成重要器官中的良性腫瘤,從而激活mTORC1途徑并控制細(xì)胞的生長和代謝。鑒于良性腫瘤可以依賴神經(jīng)節(jié)苷脂D3(GD3)來激活mTORC1通路,這是一種在正常大腦發(fā)育和惡性腫瘤中表達(dá)的膜糖磷脂,研究人員在近發(fā)表在JCIIns
新制造工藝提高CAR-NK細(xì)胞的療效2022/04/12
截至目前,超過5種CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品獲得美國FDA認(rèn)證,批準(zhǔn)。國內(nèi)CAR-T產(chǎn)品也已獲批。但CAR-T產(chǎn)品也存在著生產(chǎn)周期長、有細(xì)胞因子風(fēng)暴及神經(jīng)毒性副作用等挑戰(zhàn)。CAR-NK細(xì)胞被認(rèn)為可能應(yīng)對(duì)這些挑戰(zhàn),其發(fā)展引起了研究人員的極大興趣——主要是因?yàn)橄啾葌鹘y(tǒng)的CAR-T細(xì)胞,CAR-NK細(xì)胞具有*的優(yōu)勢。與CAR-T細(xì)胞不同,CAR-NK細(xì)胞可以應(yīng)用于異體細(xì)胞治療環(huán)境,這意味著它有潛力成為一種“現(xiàn)成的”治療方法,并降低移植物抗宿主病(GVHD)的風(fēng)險(xiǎn),解決了周期長,必須應(yīng)對(duì)個(gè)體化需求的問題。C
Nucleofector™核轉(zhuǎn)染技術(shù)助攻愛慕細(xì)胞的外源基因2022/04/12
從前呀,脂質(zhì)體像一艘小船,踏上這艘小船,夢想(基因)被載到細(xì)胞里頭;后來啊,電穿孔敲開一道門,跟著門縫的光,青春(基因)來到了細(xì)胞里頭;然后啊,慢病毒做了月老,我(基因)在外頭,一根紅繩,便把我?guī)У胶死镱^;現(xiàn)在啊,Nucleofector核轉(zhuǎn),我(基因)在這頭,回眸一笑,便早已進(jìn)到細(xì)胞核(心)里頭。Nucleofector™核轉(zhuǎn)染技術(shù)助攻愛慕細(xì)胞的外源基因表達(dá)成功,高效快速完成轉(zhuǎn)染,同時(shí)高質(zhì)量的細(xì)胞活性。Nucleofector™核轉(zhuǎn)染技術(shù)成功的秘籍是什么呢?NucleofectorTM核轉(zhuǎn)染技
PyroTec PRO 系統(tǒng):簡化細(xì)菌內(nèi)毒素自動(dòng)化檢測2022/04/08
細(xì)菌內(nèi)毒素檢查是注射藥物以及植入式醫(yī)療器械QC實(shí)驗(yàn)室基本的測試之一,其測試貫穿原材料、過程控制樣品以及終成品釋放的各個(gè)方面。大多數(shù)細(xì)菌內(nèi)毒素測試都是人工手動(dòng)進(jìn)行,由于傳統(tǒng)的移液步驟繁瑣而重復(fù),因此很容易出錯(cuò)。此外,由于人工測試流程缺乏與人工操作流程相關(guān)的元數(shù)據(jù),因此在數(shù)據(jù)完整性方面會(huì)面臨重大的挑戰(zhàn)。PyroTecTMPRO系統(tǒng)是一個(gè)靈活、強(qiáng)大和用戶友好的自動(dòng)化細(xì)菌內(nèi)毒素檢測系統(tǒng)。與傳統(tǒng)的靜態(tài)設(shè)計(jì)方法不同,Lonza采用創(chuàng)新的動(dòng)態(tài)腳本技術(shù),使軟件算法基于用戶選擇的實(shí)驗(yàn)?zāi)0澹瑯O大地簡化了細(xì)菌內(nèi)毒素自
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