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細(xì)胞收到后要怎樣處理？2020/06/30: 收到細(xì)胞株包裹時(shí)，請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開(kāi)始培養(yǎng)，或立即冷凍保存(置于–70°C，隔夜后，移到liqN2)。冷凍細(xì)胞解凍程序:1.根據(jù)細(xì)胞說(shuō)明書來(lái)配置培養(yǎng)基，不同的細(xì)胞株適應(yīng)的培養(yǎng)基不同，請(qǐng)務(wù)必按細(xì)胞需求來(lái)配置。絕大多數(shù)的細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同的基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類，所以當(dāng)細(xì)胞換成你們自己的培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)變差或者速度變緩的時(shí)候，不要著急，可以靜養(yǎng)一段時(shí)間。給細(xì)胞一個(gè)適應(yīng)的時(shí)間，不要一日看三回，操之過(guò)急；如實(shí)驗(yàn)確實(shí)緊張，可以使用中喬新舟細(xì)胞株*培養(yǎng)基，

關(guān)于抗原抗體的生物活性2020/06/28: 抗原抗體的主要功能從而有效地鏟除侵入機(jī)體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物，中和它們所開(kāi)釋的毒素或鏟除某些自身抗原，使機(jī)體堅(jiān)持正常平衡，但有時(shí)也會(huì)對(duì)機(jī)體形成病理性損害，如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的發(fā)生，對(duì)人體可形成危害。(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子差異，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng)；在體外發(fā)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助

關(guān)于細(xì)胞樣的保存2020/06/12: 一、操作步驟：1、在37℃5%CO2條件下將細(xì)胞加在處理的載玻片上，用培育基培育，時(shí)間通過(guò)預(yù)試驗(yàn)確定；2、細(xì)胞長(zhǎng)好后，用洗刷液洗2分鐘×3次，室溫下將其放入細(xì)胞固定液中固定30-60min，蒸餾水洗刷；3、室溫下用洗刷液充沛洗刷固定細(xì)胞，（干燥后-20℃冰凍保存2周以上）4、雜交前將固定的細(xì)胞進(jìn)行如下處理；順次在70%，90%，100%的乙醇中浸泡，脫水每次5min，用二甲苯洗刷，除掉殘留脂質(zhì)順次在100%，90%，70%乙醇中浸泡，進(jìn)行再水化，每次5min，后浸泡于洗刷液中；5、在37℃用胃蛋

胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別在哪里？2020/06/09: 胎牛血清與新生牛血清的三大區(qū)別1、來(lái)源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛，所以胎牛血清的采集工作，便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛。之后人們?cè)谖窗l(fā)育*的胎牛的心臟進(jìn)行穿刺取血，完成采血的工作以后便再通過(guò)一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集自已經(jīng)出生一段時(shí)間的小牛，而且它們的發(fā)育相對(duì)于胎牛而言更加*。2、組份與比例不同雖然胎牛血清與新生牛血清的成分并不存在很大的差別，可是諸如促細(xì)胞生長(zhǎng)因子和促貼附因子等組份并不相同，而且兩者之間的激素還有其他活性物質(zhì)的比例也不同。另外，胎

淺談酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試驗(yàn)辦法2020/06/05: 酶聯(lián)免疫測(cè)定是將抗原抗體反響的高度特異性和酶的催化作用相結(jié)合，開(kāi)展建立一種非放射性符號(hào)免疫分析辦法。因?yàn)镋LISA具有靈敏度高、特異性強(qiáng)，酶免疫試劑的性質(zhì)比較穩(wěn)定，操作辦法簡(jiǎn)潔快速、無(wú)放射性污染以及應(yīng)用范圍廣等很多優(yōu)點(diǎn)，在醫(yī)學(xué)根底理論研究，病毒學(xué)和生物化學(xué)查驗(yàn)等工作中應(yīng)用十分廣泛。該法需將純化的抗原包被在固相載體，與必定稀釋度的待側(cè)血清反響，然后與酶符號(hào)的第二抗體（抗人IgG,IgA,IgM或抗人IgG.A.M的混合物）反響，酶可催化色原反響，在酶標(biāo)測(cè)定儀必定波長(zhǎng)下進(jìn)行比色，測(cè)定吸光度。ELIS

關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)牛血清種類2020/06/01: 一、組份與比例不同胎牛與小牛血清組份與比例不同，兩者所含的促細(xì)胞成長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同，用處與用法不同：某些細(xì)胞必需胎牛血清才干成長(zhǎng)，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。二、血清的成份這幾種血清的成份，總體沒(méi)有什么顯著不同，只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān)，如抗體很等少。此外，因成長(zhǎng)發(fā)育的需求，有些成分在小牛出世后會(huì)發(fā)作一些變化。不過(guò)還沒(méi)有搞清楚它與其它的血清之間的不同。有一點(diǎn)能夠必定，胎牛血清中的部分功用蛋白與

八連排、96深孔板，大量現(xiàn)貨！2020/05/26: 八連排LANSOPCR八聯(lián)排管●0.2ml聯(lián)排管透明，適用于用于熒光定量PCR等檢測(cè)。LANSOPCR八聯(lián)排管蓋●管蓋與管相配套，具有出色的密封性。有凸蓋和平蓋兩種選擇，其中平蓋適合于實(shí)時(shí)PCR。LANSOPCR八聯(lián)排管帶蓋●管蓋相連，更便利，滿足不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康奶峁└噙x擇。96深孔板●高純度聚丙烯制造，材料符合USPVI，化學(xué)穩(wěn)定性高，可以高溫滅菌，適合多道移液器以及自動(dòng)化設(shè)備●錐形圓底孔設(shè)計(jì)，確保樣品低殘留●數(shù)字表示，防止孔與孔之間混淆●符合SBS規(guī)定，可穩(wěn)定疊高●密封性可靠：孔板上部平整均

ELISA檢測(cè)試劑盒有哪些免疫測(cè)定？2020/05/19: ELISA檢測(cè)試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不行濺起，不行發(fā)作氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，避免發(fā)作交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液，再在其中參加血清標(biāo)本，然后在微型震動(dòng)器上震動(dòng)1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物使用液和底物使用液時(shí)可用定量多道加液

無(wú)菌操作的技術(shù)和注意事項(xiàng)2020/05/15: 1、玻璃器皿的消毒和清潔⑴新購(gòu)玻璃器皿的處理新購(gòu)玻璃器皿應(yīng)用熱肥皂水洗刷，流水沖洗，再用1%～2%鹽酸溶液浸泡，以除去游離堿，再用水沖洗。對(duì)容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等，經(jīng)清水洗凈后應(yīng)注入濃鹽酸少許，慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)，使鹽酸布滿容器內(nèi)壁數(shù)分鐘后傾出鹽酸，再用水沖洗。⑵污染玻璃器皿的處理①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡，再煮沸30分鐘，亦可用肥皂或合成洗滌劑洗刷使盡量產(chǎn)生泡沫，然后用清水沖洗至無(wú)肥皂為止。然后用少量蒸餾水沖洗。②細(xì)菌培養(yǎng)用的試管和培養(yǎng)皿可先行集中，用1kg/c

關(guān)于血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用2020/05/08: 一、鑒別方法：血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過(guò)程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無(wú)纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則

動(dòng)物血清如何做到質(zhì)量保證的？2020/04/23: 在細(xì)胞培育試驗(yàn)中，血清一般作為基礎(chǔ)生長(zhǎng)培育基的添加劑。而在試驗(yàn)進(jìn)程中是否挑選添加血清，主要依據(jù)基礎(chǔ)培育基化學(xué)成分，培育細(xì)胞的類型和培育系統(tǒng)而定。血清的質(zhì)量大大的影響到試驗(yàn)作用。一：血清的采集在出產(chǎn)進(jìn)程中，全血運(yùn)用無(wú)菌一次性塑料袋搜集，待凝聚后分離，搜集和冷凍貯存血清。操控初始搜集是操控終血清產(chǎn)質(zhì)量量的關(guān)鍵因素。只要初始質(zhì)料符合咱們的規(guī)范時(shí)才干答應(yīng)出產(chǎn)。二：產(chǎn)質(zhì)量料的挑選在商場(chǎng)存在兩個(gè)胎牛血清規(guī)范：美國(guó)農(nóng)業(yè)部規(guī)范（USDA）和歐洲規(guī)范。美國(guó)農(nóng)業(yè)部規(guī)范，原始血清必須采自未發(fā)生瘋牛病（BSE）和口蹄疫

透析袋如何選擇與使用2020/04/21: 一、透析透析就是利用小分子能夠通過(guò)，而大分子不能夠通過(guò)半透膜的原理，將大小分子量物質(zhì)分開(kāi)的一種實(shí)驗(yàn)手段；在膜兩側(cè)存在濃度差時(shí)，溶質(zhì)從高濃度的一側(cè)（通常是樣品置于透析袋中）擴(kuò)散通過(guò)半透膜到低濃度的一側(cè)（透析溶液一側(cè)）直至膜兩邊濃度達(dá)到平衡。如下圖所示：利用透析分離物質(zhì)的優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：樣品回收率高；操作簡(jiǎn)單，無(wú)需繁瑣準(zhǔn)備工作；成本低廉，可一次性使用；分離條件溫和；無(wú)需監(jiān)控缺點(diǎn)：耗時(shí)較長(zhǎng)（24-48小時(shí)）；要求較為明顯的樣品和雜質(zhì)之間的分子量差（1-2個(gè)數(shù)量級(jí)）。二、三種不同類型的透析袋1、普通型透析

如何保存化學(xué)試劑2020/04/16: 試驗(yàn)中的化學(xué)試劑大多具有不穩(wěn)定性，保存方法也因性質(zhì)不同而不同，那試劑應(yīng)如何保存呢？常用不穩(wěn)定試劑的分類及保存要求：（1）易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。（2）易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。?（3）與二氧化碳反響的物質(zhì)要密封包村。因?yàn)槠湎鄳?yīng)的溶液較固體更易反響，所以更要留意密封保存。（4）易與氧氣作用的試劑，不宜長(zhǎng)時(shí)間存放其水溶液；亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放；鉀，鈉，白磷更要選用液封方式。（5）化學(xué)試劑與水蒸氣，水發(fā)作反響的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保

關(guān)于細(xì)胞傳代的操作2020/04/14: 1.細(xì)胞吸除培育瓶?jī)?nèi)舊培育液。2.參加無(wú)菌pbs洗液（5-8mL）悄悄潤(rùn)濕細(xì)胞，稀釋多余的培育基，之后吸走洗液，動(dòng)作要輕，不可吹打到細(xì)胞。3.向瓶?jī)?nèi)參加含0.25%EDTA的胰蛋白酶混合液少許，以能覆滿瓶底為限。4.置溫箱中2~5分鐘，一旦鏡檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，細(xì)胞變圓，比較松動(dòng)后，當(dāng)即終止消化。?5.參加該細(xì)胞對(duì)應(yīng)的培育基6mL（T25培育瓶）或12mL（T75培育瓶）終止消化。6.用吸管通過(guò)吸取的培育基悄悄反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)應(yīng)盡量以少的次數(shù)將細(xì)

細(xì)胞爬片制備詳細(xì)過(guò)程2020/04/10: 一、爬片的準(zhǔn)備1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用爬片；2.應(yīng)用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時(shí)可用前護(hù)士輸液用于打開(kāi)玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開(kāi)了。如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開(kāi)，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時(shí)再將之切開(kāi)，這樣既保證了細(xì)胞均一性，又可同時(shí)做幾個(gè)指標(biāo)的染色。3.將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過(guò)夜，第二天先用自來(lái)水沖洗20遍，再置于無(wú)水酒清中浸泡6小時(shí)，再用三蒸水沖洗3遍，放

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇操作步驟與注意事項(xiàng)2020/04/07: 細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。一、原理在不加任何條件下直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑，可使冰點(diǎn)降低。在緩慢的凍結(jié)條件下，

細(xì)胞培養(yǎng)方法2020/04/02: 1.玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上;2.無(wú)菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時(shí)以上;3.培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無(wú)菌試驗(yàn):將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi),用無(wú)菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天,肉眼見(jiàn)無(wú)渾濁或沉淀等異物.分裝后置-20度保存;4.消化液(pH7.8)或其它加入液,應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無(wú)菌濾器過(guò)濾除菌,分裝成支置-20度保存;5.培養(yǎng)箱應(yīng)

解析抗原抗體受那些要素影響2020/03/31: 在常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)刂?，有很多不?dāng)操作情況下都會(huì)影響抗原—抗體反響的，以elisa試劑盒為例，為您解析這些要素別離來(lái)自哪里：抗原—抗體結(jié)合進(jìn)程可分為兩個(gè)階段：一階段為特異性結(jié)合階段，此階段反響迅速，在數(shù)秒鐘至數(shù)分鐘內(nèi)完成，但無(wú)可見(jiàn)反響；第二階段為可見(jiàn)反響階段，歷時(shí)數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)，此階段易受以下要素的影響。一、電解質(zhì)抗原和抗體別離有對(duì)應(yīng)的極性基團(tuán)，能彼此吸附并由親水性變?yōu)槭杷?。電解質(zhì)的存在可使抗原—抗體復(fù)合物失掉電荷而凝聚，呈現(xiàn)可見(jiàn)反響。故免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中多采用生理鹽水稀釋抗原或抗體。二、酸堿度抗原—抗體反

影響ELISA試劑盒試驗(yàn)成果的要素2020/03/24: ELISA試劑盒，即酶聯(lián)免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)，并具有操作簡(jiǎn)潔、無(wú)放射性危害的優(yōu)點(diǎn)，因此多年來(lái)廣泛應(yīng)用于各高校、醫(yī)院、血站和科研機(jī)構(gòu)的試驗(yàn)室中。影響ELISA試驗(yàn)的要素有如下三方面：一、試劑盒?1、抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價(jià)下降或失活，成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高，對(duì)雜質(zhì)的反響靈敏度也高，試驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽(yáng)性；2、酶結(jié)合物濃度過(guò)高，也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。二、試驗(yàn)儀器1、加樣器是否通過(guò)校正，酶免測(cè)定血

抗體特異性都有哪些斷定2020/03/20: 抗體的特異性斷定抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的辨認(rèn)才干。抗體的特異性高，它的辨認(rèn)才干就強(qiáng)。衡量特異性一般以交叉反應(yīng)率來(lái)標(biāo)明。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)賽克制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原別離做競(jìng)賽克制曲線，核算各自的結(jié)合率，求出各安閑IC50時(shí)的濃度，并按公式核算交叉反應(yīng)率。假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí)，標(biāo)明這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0，即該血清的特異性較好。拓展延伸：1.抗體的效價(jià)斷定不管是用于確診仍是用于醫(yī)治，制

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